Cryptococcus gattii, ізольовані від гепарда (Acinonyx jubatus) з Національного зоологічного парку Куби

ізольовані

Cyptococcus gattii, ізольовані від гепарда (Acinonyx jubatus) в Національному зоопарку Куби

Хорхе Луїс Поло Леал I; Карлос Мануель Фернандес Андреу II; Херардо Мартінес Махін III; Марія Тереза ​​Ілнайт Сарагосі III; Майда Роза Перурена Ланча IV

Я магістр наук. Національний зоологічний парк. Місто Гавана, Куба.
II доктор наук. Головний дослідник. Лабораторія мікології, Інститут тропічної медицини "Педро Курі" (IPK). Місто Гавана, Куба.
III II ступінь спеціаліста з мікробіології. Помічник наукового співробітника. Лабораторія мікології, ІПК. Місто Гавана, Куба.
IV Випускник мікробіології, магістр бактеріології та мікології. Помічник наукового співробітника. Лабораторія мікології, ІПК. Місто Гавана, Куба.

ВСТУП: криптококоз, системний мікоз, спричинений видами роду Cryptococcus, значно збільшив рівень захворюваності за останні роки, головним чином пов’язаний із зараженням вірусом імунодефіциту людини. Це також було описано у тварин, хоча і з низькою частотою.
МЕТОДИ: було представлено випадок самок гепарда (Acinonyx jubatus), що утримується в неволі в Національному зоопарку в Гавані. Тварина з Південної Африки почала з різкої втрати ваги, астенії, анорексії та дихальних розладів з рясними виділеннями з носа.
РЕЗУЛЬТАТИ: шляхом мікологічних досліджень цих виділень було продемонстровано наявність Cryptococcus gattii серотипу B. Через походження тварини та її постійність у неволі, за оцінками, інфекція залишалася латентною протягом не менше 16 місяців.
ВИСНОВКИ: на Кубі до цього часу всі клінічні ізоляти криптококів відповідають C. neoformans var. grubii, тому, за підрахунками, інфекція була придбана в країні походження тварини. Це являє собою першу ізоляцію C. gattii на Кубі від тварини, завезеної з Південної Африки, де цей гриб є ендеміком.

Ключові слова: Cryptococcus gattii, Acinonyx jubatus, гепард, криптококоз, Куба.

ВСТУП: Системний мікоз криптококу, спричинений видами Cryptococcus - значно підвищив рівень захворюваності за останні роки, головним чином, пов’язаний із зараженням вірусом імунодефіциту людини. Це також було описано у тварин, але рідкісні випадки.
МЕТОДИ: було представлено випадок самок гепарда (Acinonyx jubatus), що утримується в Національному зоопарку Гавани. Тварина прийшло з Південної Африки. Вона почала худнути і страждала на астенію, анорексію та проблеми з диханням із рясним носовим секретом.
РЕЗУЛЬТАТИ: при мікрологічному дослідженні цих виділень виявлено наявність серотипу B Cryptococcus gattii. Через походження та стан тварини в неволі вважалося, що інфекція була прихованою щонайменше протягом 16 місяців.
ВИСНОВКИ: дотепер на Кубі всі клінічні ізоляти криптококів були C. neoformans var. grubii, тому вважається, що інфекція була заражена в країні походження самки гепарда. Це перший ізолят C. gattii на Кубі від тварини, яка походить з Південної Африки, де цей гриб є ендеміком.

Ключові слова: Cryptococcus gattii, Acinonyx jubatus, гепард, криптококоз, Куба.

ВСТУП

Криптококоз - це системний мікоз, спричинений видами роду Cryptococcus, серед яких найбільш клінічно значущими є C. neoformans та C. gattii, які в даний час входять до комплексу близькоспоріднених видів, але також мають достатні відмінності, щоб вважати їх окремими видами. 1

За останні роки цей мікоз значно збільшив частоту захворювань, головним чином пов’язану з інфекцією, спричиненою вірусом імунодефіциту людини. 2 Він також був описаний у різних видів тварин, як домашньої, так і дикої фауни, хоча і з низькою частотою. 3-5 На Кубі на сьогоднішній день всі клінічні ізоляти криптококів у людини відповідають C. neoformans var. grubii (раніше C. neoformans var. neoformans серотип A); навпаки, C. gattii ніколи не був ізольованим у країні. 6 Ця робота представляє першу ізоляцію та характеристику C. gattii на Кубі із патологічних продуктів самки гепарда (Acinonyx jubatus), що прибула до країни з Південної Африки приблизно у віці 12 місяців, які були виставлені на показ у площа хижаків Національного зоологічного парку (PZN).

Провівши 16 місяців у неволі, зразок почав виявляти раптову втрату ваги, астенію, анорексію та порушення дихання з рясними виділеннями з носа, для чого був переданий до ветеринарної клініки центру для кращого спостереження та лікування; жодних проявів в інших органах або системах не виявлено. Зразки з носових виділень відбирали стерильним тампоном, а для мікроскопічного спостереження робили мазок, забарвлений за Грамом. Мазки висівали на глюкозний агар Сабуро з левоміцетином та кров’яним агаром та інкубували при 28 ° C та 37 ° C відповідно до появи макроскопічних ознак росту мікробів.

Через 48 годин інкубації спостерігалося зростання дріжджів в обох культуральних середовищах. Ізольований штам був направлений в лабораторію мікології Інституту тропічної медицини "Педро Курі", де ідентифікація роду Cryptococcus була підтверджена спостереженням за капсулою в індійському чорнилі, виробництвом уреази, відсутністю філаментації в агарі кукурудзяного борошна, асиміляція інозиту та утворення пігменту в агарі насіння соняшнику (Helianthus annus). За допомогою середовища CGB (L-канаванін-гліцин-бромотимоловий синій) та слайд-аглютинації (Crypto Check; Iatron Laboratories, Токіо, Японія), штам був визначений як C. gattii серотип B. 1

Хоча C. neoformans та C. gattii мають схожі культурні характеристики (мукоїдний вигляд та білий до кремового кольору при вирощуванні на агарі глюкози Сабуро), вони мають кілька фізіологічних властивостей, що дозволяють їх диференціювати: C. gattii, на відміну від C. neoformans, використовує як джерело азоту D-пролін, D-триптофан, L-яблучна кислота та креатинін, тоді як гліцин використовується як джерело вуглецю та азоту; він стійкий до циклогексиміду (1,6 мкг/мл) та L-канаваніну. Ці відмінності в біохімічній поведінці цих 2 видів дозволили створити різні культуральні середовища, що дозволяють їх ідентифікувати. Середовище КГБ продовжує залишатися найбільш широко використовуваним сьогодні для диференціації цих 2 видів від клінічних ізолятів і засноване на стійкості до L-канаваніну та використанні гліцину як джерела вуглецю та азоту С гатті з подальшим вивільнення аміак та лужнення живильного середовища, що спричиняє зміну кольору від жовтого до інтенсивного синього. 3.7

Хоча C. neoformans в основному вражає людей з ослабленим імунітетом і про нього повідомляють у всіх широтах, C. gattii переважно заражає імунокомпетентних осіб і частіше виділяється в тропічних та субтропічних районах. Однак він був знайдений в Європі, в районах з помірним або середземноморським кліматом і в помірних поясах американського континенту. Цей вид також відповідальний за великий спалах, що стався у Ванкувері, який пізніше поширився на континентальні райони Канади та США, вразивши не тільки популяцію, що проживає в цій зоні, але і, принаймні, 5 видів тварин, як домашніх, так і вільножиття. 8,9 Останніми роками його вважають новим видом у всьому світі. 10 Його поширеність є високою, зокрема, в деяких районах Австралії, Бразилії, Мексики, Таїланду, Центральної Африки та Південної Каліфорнії. 3 Південна Африка, країна походження гепарда, яка є об'єктом цього дослідження, також вважається ендемічною зоною зараження цим грибом. одинадцять

Серед видів тварин, з яких виділено C. gattii, серед них є коти, собаки, коні, вівці, кози, лисиці, тхори, примати, дельфіни, коали; 3-5,8, однак найбільше постраждали коти, у яких захворювання, як правило, має респіраторні симптоми, подібні до тих, що описані у досліджуваному зразку гепарда. Кішки особливо сприйнятливі до зараження обома видами криптококів, що дозволило краще охарактеризувати хворобу у цих тварин та у котів загалом. 12

У цих ссавців інфекція потрапляє шляхом вдихання, яке вражає верхні дихальні шляхи, головним чином порожнину носа. Найбільш часта картина - це риніт, який може переходити в хронічну форму з рясними виділеннями з наступною деформацією носової порожнини в 70% випадків через наявність гранульом на запущених стадіях захворювання. Також може бути порушена носоглотка із виробленням хрипів та задишки. Зазвичай спостерігається збільшення нижньощелепних гангліїв і поширення на підносову підшкірну клітковину. В інших випадках інфекція потрапляє до центральної нервової системи (ЦНС) з такими неврологічними проявами, як депресія, атаксія та порушення координації, периферична сліпота та ретиніт. 12.13

Серед великих котів гепарди були одними з найбільш постраждалих видів, клінічні картини дуже схожі на ті, що описані у котів. Беррі та ін. (1997) поставили діагноз (мікробіологічний, рентгенологічний та гістопатологічний) легеневої криптококоми та менінгоенцефаломієліту у зразку Acinonyx jubatus у полоні з підгострою атаксією всіх 4 кінцівок. 14 Інші 2 випадки криптококозу ЦНС були задокументовані Болтоном та іншими у особин цього самого виду, які, крім неврологічних проявів, мали пошкодження дихальних шляхів; Ще 15 нещодавно Міллвард та Вільямс продемонстрували наявність криптококозу у вільноживучому гепарді з пошкодженням дихання та неврології. 4 У 3 згаданих звітах були зразки Acinonyx jubatus з Південної Африки, а збудником - C. gattii, що збігається з даною справою.

Деякі автори припускають, що інфекція вірусу котячого імунодефіциту може бути схильним фактором для криптококозу, однак наявність цього вірусу або вірусу котячого лейкозу не було продемонстровано ні в одного з південноафриканських тварин; Роль, яку вона може зіграти у сприйнятливості цих ссавців до розвитку хвороби C. gattii, стресу неволі та незначній генетичній мінливості, що існує між різними популяціями гепардів, здається більш прийнятною. 4

Незважаючи на кілька спроб, C. gattii ніколи не був ізольований від екологічних джерел на Кубі (неопубліковані дані), тому можна припустити, що тварина-об'єкт цього дослідження була заражена в країні походження. Якщо так, можна також припустити, що інкубаційний період перевищував 16 місяців. Стрес, спричинений транспортуванням та полоном у наших умовах, міг активувати приховану інфекцію через кілька місяців або років. Незважаючи на те, що неактивна або прихована інфекція була описана протягом періоду до 110 місяців, 16 McDougall та Fyfe підрахували зараження C. gattii у людей, інкубаційний період від 6 до 8 місяців, на основі досліджень, проведених у спалаху Ванкувер. 17

Гепарди або гепарди (Acinonyx jubatus) належать до так званих великих котів (порядок Carnivora; сімейство Felidae), поширених переважно в обширних і відкритих саванах Африки на південь від Сахари та частини Азії, де вони можуть полювати на свою здобич (як правило, середню -копитні копитні); В даний час 18 є одним із видів, яким загрожує високий ризик зникнення в дикій природі, тому Міжнародний союз охорони природи класифікував його до категорії вразливих. 19

У попередніх звітах з'являлася часткова та неповна інформація, пов'язана з цією ізоляцією, 20-22, що могло викликати плутанину щодо існування C. gattii на Кубі; Однак це перша робота, яка пропонує найбільш повну інформацію про цей екземпляр Acinonyx jubatus, з Південної Африки, який загинув у Національному зоологічному парку від криптококозу, спричиненого цим видом .

1. Bovers M, Hagen F, Boekhout T. Різноманітність Cryptococcus neoformans - комплекс Cryptococcus gattii. Преподобний Ібероам Мікол. 2008; 25: S4-S12.

2. Warnock DW. Грибкові захворювання: мінлива проблема охорони здоров'я. Med Mycol. 2006; 44: 697-705.

3. Соррелл ТК. Cryptococcus neoformans сорт gattii. Med Mycol. 2001; 39: 155-68.

4. Millward IR, Williams MC. Cryptococcus neoformans гранульома в легенях і спинному мозку вільно вигульованих гепардів (Acinonyx jubatus). Клінічний звіт та огляд літератури. J S Afr Vet Ass. 2005; 76: 228-32.

5. McGill S, Malik R, Saul N, Beetson S, Secombe C, Robertson I, Irwin P. Криптококоз у домашніх тварин у Західній Австралії: ретроспективне дослідження 1995-2006 рр. Med Mycol. 2009; 47: 625-39.

6. Фернандес Андреу К.М., Мартінес Мачин Г., Ілнайт Сарагозі М.Т., Перурена Ланча М.Р., Гонсалес Міранда М. Ідентифікація Cryptococcus neoformans var. неоформани в кубинських клінічних ізолятах. Преподобний Кубанський Мед Троп. 1998; 50: 167-9.

7. Кляйн К.Р., зал L, Демл С.М., Рисаві Дж.М., Вольфіель С.Л., Венгенак Н.Л. Ідентифікація Cryptococcus gattii за допомогою середовища L-канаванін гліцин бромотимол синього та секвенування ДНК. J Clin Microbiol. 2009; 47: 3669-72.

8. Стівен С, Лестер С, Чорний З, Файф М, Раверті С. Багатовидова спалах криптококозу на південному острові Ванкувер, Британська Колумбія. Can Vet J. 2002; 43: 792-4.

9. Галаніс Е, Макдугалл Л. Епідеміологія Cryptococcus gattii, Британська Колумбія, Канада, 1999-2007. Emer Infect Dis. 2010; 16: 251-7.

10. Спрінгер ді-джей, Чатурведі В. Проектування глобального виникнення Cryptococcus gattii. Emer Infect Dis. 2010; 16: 14-20.

11. Morgan J, McCarthy KM, Gould S, Fan K, Arthington-Skaggs B, Iqbal N, et al. Інфекція Cryptococcus gattii: характеристика та епідеміологія випадків, виявлених у південноафриканській провінції з високою серорозповсюдженістю ВІЛ, 2002-2004. Clin Infect Dis. 2006; 43: 1077-80.

12. Кастела Г., Абарка М.Л., Кабаньєс Ф.Ж. Криптококоз і тварини-компаньйони. Преподобний Ібероам Мікол. 2008; 25: S19-S24.

13. Малік Р, Вігні Д.І., Мюїр Д.Б., Грегорі Ді-джей, Любов Д.Н. Криптококоз у кішок: клінічна та мікологічна оцінка 29 випадків та еволюція лікування із застосуванням перорально введеного флуконазолу. J Med Vet Mycol. 1992; 30: 133-44.

14. Беррі WL, Jardine JE, Espie IW. Легенева криптококома та криптококовий менінгоенцефаломієліт у королівського гепарда (Acinonyx jubatus). J Zoo Wildl Med.1997; 28: 485-90.

15. Болтон Л.А., Лобетті Р.Г., Евезард Д.Н., Пікард Ж.А., Несбіт Дж.В., Ван Херден Дж. Та ін. Криптококоз у гепардів (Acinonyx jubatus): два випадки. J S Afr Vet Ass. 1999; 70: 35-9.

16. Garcia-Hermoso D, Janbon G, Dromer F. Епідеміологічні дані щодо сплячої інфекції Cryptococcus neoformans. J Clin Microbiol. 1999; 37 (10): 3204-9.

17. MacDougall L, Fyfe M. Поява Cryptococcus gattii в новому середовищі дає підказки про його інкубаційний період. J Clin Microbiol. 2006; 44: 1851-2.

19. Міжнародний союз охорони природи та природних ресурсів (МСОП). Міжнародний Червоний список видів, що перебувають під загрозою зникнення. Версія 2009.2. 2009. [Процитовано 2009 23 листопада]. Доступно за адресою: http://www.iucnredlist.org

20. Baró T, Torres-Rodríguez JM, Morera Y, Alía C, López O, Méndez R. Серотипування ізолятів Cryptococcus neoformans з клінічних та екологічних джерел в Іспанії. J Clin Microbiol. 1999; 37: 1170-2.

21. Торрес-Родрігес Ж.М., Морера Ю., Баро Т., Лопес О, Алія С, Хіменес Т. В пробірці сприйнятливість серотипів Cryptococcus neoformans до похідного GM 237354 класу сордарин. Мікози. 2002; 45: 313-6.

22. Torres-Rodríguez JM, Alvarado-Ramírez E, Gutiérrez-Gallego R. Відмінності в активності ферменту уреази між Cryptococcus neoformans та Cryptococcus gattii. Преподобний Ібероам Мікол. 2008; 25: 27-31.

Отримано: 15 лютого 2010 р.
Затверджено: 4 травня 2010 р.

Доктор Карлос М. Фернандес Андреу. Лабораторія мікології, Інститут тропічної медицини "Педро Курі". AP 601, CP 11300. Місто Гавана, Куба. Електронна адреса: [email protected]

Весь вміст цього журналу, крім випадків, коли він ідентифікований, підпадає під ліцензію Creative Commons