- реферат
- вступ
- Нові результати щодо великих В-клітинних лімфом на основі аналізу мікрочипів та імуногістохімічних досліджень
- GCB подібний, ABC подібний і тип III DLBCL
- ABC-подібні та GCB-подібні DLBCL пов'язані з різними основними онкогенними механізмами
- ABC-подібні та GCB-подібні DLBCL характеризуються різною закономірністю хромосомного дисбалансу
- Імуногістохімія дозволяє ідентифікувати DLCBL, подібні до GCB і ABC?
- За морфологією ми можемо розрізнити DLBCL, подібну до ABC та GCB?
- Які сутності все ще розвиваються в межах DLBCL в результаті цих досліджень?
- Великий розщеплений DLBCL
- Осередок шпинделя DLBCL
- Імунобластичний DLBCL
- FOXP1-позитивний DLBCL
- PMBCL
- Додаткова інформація про варіанти DLBCL, що підтверджує їх розпізнавання як лімфома
- ALK + DLBCL
- Т-клітинні/багаті на гістіоцити лімфоми (THRBCL)
- DLBCL з плазмопластичною морфологією
- DLBCL, що виникає в спеціальних анатомічних місцях
- висновок
реферат
Дифузна велика В-клітинна лімфома (DLBCL), як визначено класифікацією Всесвітньої організації охорони здоров’я (ВООЗ), є клінічно, морфологічно та генетично гетерогенною групою злоякісних проліферацій великих лімфоїдних В-клітин. За останні 6 років було опубліковано кілька досліджень, які покращують наше розуміння цих лімфом. Ці дослідження аналізували DLBCL відповідно до їх профілю експресії генів, надавали додаткову інформацію про деякі варіанти DLBCL, перерахованих у класифікації ВООЗ, та підкреслювали вплив місця походження цих пухлин. У цьому огляді узагальнено останні дані та досліджено їх вплив на розпізнавання нових клінічно-патологічних суб’єктів лімфоми.
Дифузна велика В-клітинна лімфома (DLBCL) становить приблизно 40% дорослих неходжкінських лімфом. Це клінічно, морфологічно та генетично неоднорідна група пухлин, що складається з великих В-клітин.
У цьому огляді ми зосередимося, зокрема, на нещодавно опублікованих даних та вивчимо їх вплив на визнання нових клініко-патологічних суб’єктів, які відповідають принципам „РЕАЛЬНОГО” в межах групи DLBCL.
Нові результати щодо великих В-клітинних лімфом на основі аналізу мікрочипів та імуногістохімічних досліджень
GCB подібний, ABC подібний і тип III DLBCL
У кількох дослідженнях мікрочипів 7, 8, проведених на необробленому de novo DLBCL, виявлено дві основні прогностично різні підгрупи. Обидва вони характеризувалися різним профілем експресії генів, характерним для нормальних зародкових В-клітин або активованих В-клітин пам'яті крові. Підмножина зародкових В-клітин (подібна до GCB) корелювала зі значно кращим прогнозом порівняно з підгрупою активованих В-клітин (ABC). Це прогностичне значення не залежало від міжнародного прогностичного індексу. 7, 8, 9, 10, 11 Не виявлено кореляції між цими підгрупами DLBCL та різними морфологічними варіантами, переліченими у ВООЗ. 7
Третя (група 3) підгрупа включала випадки, що не експресували гени, характерні для GCB-подібних або ABC-подібних підгруп. Ця підгрупа мала поганий результат, подібний до результатів ABC-подібної підгрупи, і вона все ще присутня і, на відміну від GBC-подібних підгруп та подібних ABC-підгруп, не вивчалась далі.
ABC-подібні та GCB-подібні DLBCL пов'язані з різними основними онкогенними механізмами
Було показано різницю в частоті перестановки гена BCL2 між двома підгрупами, оскільки було виявлено, що t (14; 18) (q32; q21) майже виключно зустрічається в GCB-подібній підгрупі. 7, 12, 13 Ці випадки перебудови гена BCL2 надалі мали надзвичайно подібний профіль експресії генів, припускаючи, що вони представляють унікальну підмножину в GCB-подібному сімействі DLBCL. 12
Навпаки, активація шляху ядерного фактора каппа B (NF-kB) була виявлена в ABC-подібній підгрупі. Дійсно, ці лімфоми експресують гени-мішені NF-κB, які є результатом конститутивної активності інгібітора каппа B (IκB) кінази. Цей фермент фосфорилює IκB, інгібітор NF-κB, що призводить до його протеасомної деградації. Введення MLX105, інгібітора кінази класу Ik B бета-карболену, до клітинних ліній DLBCL типу ABC (але не GCB) індукує апоптоз (Staudt LM. Ann Oncol 2005; 16 (Додаток 5): v36; реферат; ).
ABC-подібні та GCB-подібні DLBCL характеризуються різною закономірністю хромосомного дисбалансу
Підгрупа DLBCL, згідно з даними мікрочипів, підтримується порівняльними дослідженнями геномної гібридизації, і для обох підгруп повідомляється про різні закономірності хромосомного дисбалансу. ABC-подібні пухлини часто демонстрували трисомію 3, виграші 3q та 18q21 - q22 та втрати 6q21 - q22, тоді як GCB-подібні пухлини часто демонстрували виграш 12q12. 14, 15
Виявлено деякі потенційно важливі гени, що переносяться цими хромосомними областями.
Ген PRDM1/BLIMP1, транскрипційний репресор, експресований в підмножині клітин GCB і плазматичних клітин і необхідний для кінцевої диференціації В-клітин, лежить на хромосомі 6q21 - q22.2. Встановлено, що експресія білка PRDM1/BLIMP1 відсутня у більшості випадків, крім GCB DLBCL, незважаючи на наявність медіатора PRDM1/BLIMP1. Мутаційний аналіз PRDM1/BLIMP1 свідчить про роль супресора пухлини цього гена, а інактивація PRDM1/BLIMP1 може сприяти лімфомагенезу, блокуючи диференціювання кінцевих В-клітин у плазматичні клітини. 16, 17
Ампліфікація 18q21, яка містить ген BCL2, була частішою у пухлинах ABC (18%), ніж у пухлинах GCB (5%). Більшість випадків GCB-DLBCL з посиленням 18q21 також мали транслокацію t (14; 18).
Оскільки GCB- і ABC-подібні пухлини походять від В-клітин на різних стадіях диференціації (статеві клітини порівняно з постгермальними середніми клітинами), вони, очевидно, використовують різні онкогенні шляхи (t (14; 18) (q32; q21) транслокації в GCB, на відміну від до пухлин проти активації шляху NF-κB у ABC-подібних пухлинах) і мають різний рівень виживання, можна припустити, що обидві молекулярно визначені підгрупи представляють різні сутності захворювання.
Цікаво, що значне переважання GCB-подібного DLBCL було виявлено у дітей, що може пояснити різницю в клінічному результаті, що спостерігається у дітей порівняно з дорослими. Однак, на відміну від DLBCL, подібного до GCB, не було виявлено жодної асоціації з транслокацією t (14; 18), що може припустити, що інші біологічні механізми можуть лежати в основі дитячої DLBCL. 18
Найважливіші характеристики ABC та GCB-подібних пухлин узагальнені в таблиці 1.
Стіл в натуральну величину
Імуногістохімія дозволяє ідентифікувати DLCBL, подібні до GCB і ABC?
Аналіз мікрочіпів у щоденній діагностичній роботі поки що неможливий. Отже, корисність імуногістохімії для виявлення GCB- та ABC-подібних підгруп DLBCL досліджувалась кількома групами. 19, 20, 21 Більшість із цих досліджень використовують CD10 та bcl-6 як маркери В-клітин GCB та регуляторний фактор MUM1/інтерферону (IRF) 4 як активовані або не-GCB В-клітини.
CD10 - це протеолітичний фермент, що експресується на поверхні клітин GCB та ряду інших клітин, включаючи клітини лімфоїдних попередників та деякі клітини епітелію. Точна його функція залишається невідомою, але експресія CD10 є характерною знахідкою лімфобластної, лімфоми Беркітта та фолікулярної. Експресія CD10 у DLBCL виявляється приблизно в 30-40% випадків. 22, 23 Зазвичай він вважається маркером походження фолікулярних центральних клітин і тому використовується як індикатор DLBCL типу GCB. У кількох звітах було встановлено, що експресія CD10 є сприятливим прогностичним фактором для виживання без хвороб і досягнення повної ремісії. 12, 19, 23
Вважається, що ген BCL6 відіграє центральну роль у формуванні центру зародкових ліній і експресується на початку реакції GC і регулюється при відборі для апоптозу або диференціації. Експресія білка Bcl-6 суворо обмежена ядром, тим самим зберігаючи ядро. Експресія виявляється в нормальних клітинах GCB (як центробластів, так і центроцитів) і в 50-70% клітин пухлини DLBCL. Прогностичне значення експресії білка bcl-6 поки не ясно. Цікаво, що експресія білка Bcl-6 не корелює з наявністю або відсутністю перебудови гена BCL6. 24, 25
Білок MUM1/IRF4 (онкоген множинної мієломи 1) є членом факторів транскрипції (IRF). Вони відіграють важливу роль у регулюванні експресії генів у відповідь на передачу сигналів інтерферонами та іншими цитокінами. MUM1/IRF4 експресується лише в лімфоцитах і, ймовірно, відіграє вирішальну роль у розвитку плазматичних клітин. Моноклональні антитіла MUM1 демонструють ядерне фарбування в плазматичних клітинах і незначний відсоток клітин GCB, що демонструє певний ступінь диференціювання плазматичних клітин. Більшість клітин GCB та мантії є негативними щодо MUM1. Вираз MUM1 можна виявити у 40-50% випадків DLBCL. 20, 21, 26 На відміну від нормальних клітин GCB, у яких експресія BCL6 та MUM1 взаємовиключні, клітини пухлини DLBCL можуть ко-експресувати обидва білки. 27
a ) Імуногістохімічний алгоритм Hans et al. поділити DLBCL на прогностичні підгрупи. b ) Альтернативний імуногістохімічний алгоритм поділу DLBCL на сприятливу групу (група 1) та несприятливу групу (група 2) (Муріс та ін.).
Повнорозмірне зображення
За морфологією ми можемо розрізнити DLBCL, подібну до ABC та GCB?
Хоча початкове дослідження експресії гена DLBCL не показало статистично значущої кореляції між ABC-подібними та GCB-подібними молекулами, визначеними DLBCL, та морфологічними варіантами, визначеними класифікацією ВООЗ, спостерігались деякі "тенденції". У групі, подібній до GCB, найчастіше спостерігали центробластичний мономорфний DLBCL, тоді як ABC-подібна група включала більшість імунобластичних та центробластичних поліморфних випадків DLBCL. 7 Так само було виявлено зв'язок між CD10 + GCB-подібним імунофенотиповим профілем та центробластичною морфологією, з одного боку, та ABC-подібним імунофенотиповим профілем та імунобластною морфологією, з іншого. 26
Які сутності все ще розвиваються в межах DLBCL в результаті цих досліджень?
Великий розщеплений DLBCL
Ця лімфома складається з великих, часто веретеноподібних лімфоїдних клітин з виїмчастими та скрученими ядрами, відсутніми чітко вираженими ядрами і вбудованими у дрібну фіброзну перегородку. Фолікулярні дендритні мережі або їх залишки відсутні. Виявлено значну кореляцію між цією морфологією, GCB-подібним імунофенотиповим профілем, експресією перестановок генів CD10 і BCL2. Клінічно ці випадки демонструють незначне переважання жінок і трапляються в більш молодому віці порівняно з іншими DLBCL. Не було продемонстровано ніяких відмінностей щодо DFS та загальної виживаності (ОС) від інших DLBCL. 28
Осередок шпинделя DLBCL
Це ще одна організація, про яку повідомляється в підгрупі, подібній до GCB. На відміну від великого розщепленого DLBCL, ці лімфоми все ще є CD10 та MUM1 негативними, але bcl-6 позитивними. Крім того, вони не показують жодних доказів перебудови генів BCL2, тоді як мутації в генах BCL6 демонструються у всіх випадках. Ці пухлини виникають як первинні екстранодальні лімфоми, вражаючи переважно жінок. 34
Імунобластичний DLBCL
Ця лімфома складається майже виключно з імунобластів. Він знаходиться в ABC-подібній підгрупі і характеризується послідовною експресією MUM1 та рідкісною експресією bcl-6. Найчастіше вражає пацієнтів чоловічої статі із запущеною хворобою вузлів. Цікаво, що імунобластична морфологія є суттєвим несприятливим предиктором DFS при однофакторному та багатофакторному аналізі. 28
FOXP1-позитивний DLBCL
PMBCL
Ця лімфома була внесена до списку тимчасових об'єктів у класифікації REAL і класифікована як окрема клініко-патологічна установка у класифікації ВООЗ. Цікаво, що дослідження експресії генів підтримують цю точку зору, оскільки вони демонструють, що PMBCL мають чіткий профіль експресії, пов'язаний з класичною лімфомою Ходжкіна.
Додаткова інформація про варіанти DLBCL, що підтверджує їх розпізнавання як лімфома
ALK + DLBCL
Ця лімфома занесена до класифікації ВООЗ як рідкісний морфологічний варіант DLBCL. На сьогоднішній день в літературі зареєстровано 15 випадків ALK + DLBCL. 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 Ці випадки характеризуються сильною морфологією та фенотипом. Пухлина складається з дифузної, досить монотонної проліферації великих імунобластоподібних або плазмідоподібних клітин з фенотипом плазматичних клітин (CD20-/CD79a ±/CD138 +) та сильного підмембранозного гранульованого цитоплазматичного фарбування на ALK. ALK є членом сімейства рецепторів тирозинкінази, і, як вважають, повнорозмірний ALK відіграє важливу роль у розвитку ембріонального нерва. Аберрантна експресія ALK була описана в анапластичних великоклітинних лімфомах та запальних міофібробластичних пухлинах і є результатом геномних перебудов гена ALK різними генами-партнерами. 48, 49, 50, 51 вираз ALK у DLBCL не є результатом повного виразу ALK, як спочатку повідомлялося 52, але в більшості випадків це відбувається через повторну транслокацію t (2; 17) (p23; q23). результатом є злитий білок CLTC-ALK. 43, 44 У деяких випадках експресія ALK у цих пухлинах також може бути результатом транслокації t (2; 5) (p23; q35), що призводить до злиття білка NPM (NUCLEOPHOSMIN) -ALK. 46
Ця лімфома зустрічається у дітей та дорослих (у віці від 10 до 59 років) і переважає серед чоловіків (співвідношення чоловіків і жінок 12: 3). Хоча пухлина пов'язана з поганим виживанням у дорослих, біологічна поведінка дітей невідома через низьку кількість випадків, про які зараз повідомляється.
Т-клітинні/багаті на гістіоцити лімфоми (THRBCL)
Ця лімфома зазначена в класифікації ВООЗ як варіант DLBCL і визначається в широкому розумінні як велика В-клітинна пухлина, що супроводжується численними Т-клітинами та гістіоцитами. Цю лімфому не слід плутати з багатими стромальними Т-клітинами В-клітинними лімфомами, що імітують периферичні Т-клітинні лімфоми, і раніше її описували як багаті Т-клітинами В-клітинні лімфоми. 53 THRBCL вперше був визнаний Delabie et al. 54 як лімфома, що складається з невеликої кількості великих розсіяних неопластичних В-клітин (що становить менше 10% від загальної кількості клітин), включених в рясну стромальну відповідь, що містить малі Т-клітини і багату кількість гістіоцитів. Ці пухлини імітують лімфому Ходжкіна з переважними вузликовими лімфоцитами (NLPHL). 55 На відміну від індолентного NLPHL, THRBCL зустрічається здебільшого на запущеній клінічній стадії і демонструє дуже агресивну поведінку. 54 Крім того, пацієнти з THRBCL мають високий ризик невдалого лікування. 56, 57
THRBCL демонструє специфічний профіль експресії генів, як показано шляхом профілювання експресії генів з використанням мікросередовища та запальної реакції господаря як визначальних ознак у DLBCL. 58 У цьому дослідженні було виявлено три біологічно стійкі кластери DLBCL, що характеризуються або профілем «окисного фосфорилювання», «рецептором/проліферацією В-клітин», або «реакцією господаря (HR)». Ці скупчення не були пов’язані з раніше визнаними молекулярними підгрупами (подібні до GCB, подібні до ABC та типу III). Цікаво, що кластер HR містив THRBCL і мав надійну сигнатуру цільового гена NF-κB. Ці висновки надалі підтверджують уявлення про те, що THRBCL є окремою суттю лімфоми.
DLBCL з плазмопластичною морфологією
Варіант плазми DLBCL у плазмі, який спочатку згадувався як морфологічний варіант у ВООЗ, зараз вважається гетерогенною групою пухлин, яка, можливо, представляє різні сутності. Це рідкісні пухлини, що виникають в середовищі зараження вірусом імунодефіциту людини (PEL та плазмобластна лімфома ротової порожнини) та у імунокомпетентних пацієнтів (ALK-позитивні DLBCL та асоційовані з піотораксом лімфоми 59, 60). Повідомлялося про останні огляди диференційованих у плазмі В-клітинних лімфом та асоційованих із синдромом набутого імунодефіциту лімфом. 61, 62, 63
DLBCL, що виникає в спеціальних анатомічних місцях
На відміну від класифікації Т-клітинних лімфом, анатомічне розташування не було однією з основних ознак для визначення В-клітинних лімфом у класифікації REAL та ВООЗ. Останнім часом зростає інтерес до розташування великих В-клітинних лімфом, оскільки клінічна поведінка може значною мірою залежати від місця передлежання. Тому були розроблені специфічні для класифікації системи класифікації лімфом.
Подібним чином було показано, що "первинна центральна нервова система DLBCL" (PCNSL) пов'язана з переважно ABC-подібним імунофенотипом. 66 На клінічну поведінку та прогноз цих лімфом впливає не тільки анатомічне розташування, але, мабуть, також біологічні фактори (пухлини, подібні до ABC, проти GCB з різними основними онкогенними механізмами). Встановлено, що імуногістохімічна експресія bcl-6 у PCNSL пов'язана з більш тривалою ОС. 67
висновок
Класифікація лімфом - це постійний процес, зумовлений зростаючими знаннями та біологією цих пухлин, які часто набувають за допомогою недавно розроблених методик. Дослідження мікрочипів чітко проілюстрували неоднорідність у групі DLBCL та виявили дві прогностично різні підгрупи. Далі ці дослідження надали величезну кількість додаткової інформації про DLBCL, що призвело до відкриття кількох генів, що сприяють лімфомагенезу, ідентифікації нових онкогенних шляхів та розпізнаванню кількох нових прогностичних маркерів. Тепер гематопатологам доведеться перевести ці дані в морфологічні характеристики, корисні в щоденній діагностичній практиці, і використовуватимуть цю інформацію для виявлення інших клініко-патологічних суб’єктів у великій групі DLBCL.