Целіакія: клінічні лабораторні аспекти Лабораторне навчання Ева Кенесей 2016.05.18.

Sens Spec

Теми Історичний огляд, діагностичні можливості ESPGHAN опис клінічної настанови целіакії. Напрямок розвитку серологічних методів Швидкі тести Інші тести на основі антитіл Нові кандидати на біомаркер

Загальні лабораторні відхилення від целіакії Аномалії, що вказують на морфологічні та функціональні зміни слизової оболонки тонкої кишки: Низький загальний білок у сироватці Ca, P, Zn, Fe Кількість крові, залізодефіцитна анемія, Вітаміни: D, A, E, K, фолат, B12 Типові випорожнення стеатореї> 4 г/добу Аномальні розлади переносу слизової оболонки тонкої кишки Ненормальний тест D-ксилози Точний діагноз базувався на дослідженні пошкодження слизової в тонкому зразку біопсії.

Історичний огляд діагнозу целіакії до 1960 року - клінічна підозра, симптоми, біопсія - гістологія 1971 Seah - ретикулінові антитіла (ARA) - специфічні, але не чутливі 1982 антитіла до гліадину (AGA) Sens 70%; Spec 70% 1983 Chorzelski - антитіло до ендомізію IFA (EMA) Sens70 90%; Spec 100% 1997 антитіла до трансглутаміназної тканини Дітеріх ELISA (ttg) Sens and Spec 90 95% 2005: антидезамідований гліадин: Sens 85%, Spec 90% HLA DQ генетичні тести

Механізм вироблення антитіл проти гліадину та трансглутамінази. При целіакії характерні аутоантитіла націлені на білок TG2. Специфічні антитіла залежать від глютену і виробляються лише в носіях HLA-DQ2/DQ8.

Інструменти діагностики CD-специфічне тестування антитіл HLA тестування; Гістологічне дослідження зразків біопсії тонкої кишки HLA-DQ2 та HLA-DQ8

Антитіла Типові аутоантитіла націлені на білок TG2 при целіакії. Anti-tTG/TG2 (тканинна трансглутаміназа) IgA, IgG Ендомізієві антитіла (IgA) Anti-DGP (дезамідований гліадиновий пептид) IgA, IgG Анти-Гліадин/Антиретикулінові антитіла Специфічні антитіла залежать від глютену і виробляються лише у осіб, що носять HLA-DQ2/DQ8.

Антитілові антитіла до трансглутамінази (ttg) Фермент міститься у всьому тілі (тканини мозку, шкіра, кишечник) Основний аутоантиген при целіакії, антиген проти ЕМА В основному виробляється IgA анти-tg2, але деякі пацієнти також мають IgG. Помилково позитивний: при інших аутоімунних захворюваннях, інфекціях, пухлинах, пошкодженнях тканин Помилково негативний: При ранніх або легких захворюваннях у дітей 10 разів: целіакія, дуже ймовірна сильна атрофія згустків (Marsh3). У пацієнта із симптомами, підтвердження діагнозу за допомогою додаткових лабораторних досліджень (EMA, HLA) може уникнути біопсії. Для підтверджуючих тестів відбір проб слід проводити в інший час (через усунення технічної помилки). Протягом півроку після початку дієти титр IgA ttg зменшується, титр, що падає нижче норми, залежить від початковий титр. У разі дієти без глютену, введеної перед тестом, тест може дати негативний результат!

Тест на дезамідовані антитіла до гліадинових антитіл (IgA та IgG) виявляє гліадин, дезамідований ttg. Більш чутливий і специфічний, ніж старий немодифікований тест на антитіла до гліадину. Тест не замінює тест на антитіла до ttg. Негативний результат (у без дієти) робить целіакію малоймовірною, вона не підтверджує або виключити захворювання. Він більш чутливий до целіакії, ніж антитіла ttg у дітей до двох років, слизова більш чутлива до пошкоджень

Ендомізієві IgA-антитіла (EMA) Виявлення антитіл шляхом непрямої імунофлуоресценції Субстрат: ділянка тканини, що містить гладкі м’язи (стравохід мавпи/пуповина людини) Помічені FITC анти-IgA антитіла до сироватки тканини Антиген Близько 100% специфічний для целіакії Оцінка: негативна/позитивна Якщо є не має фарбування, передбачається дефіцит IgA. Позитивний EMA може свідчити про целіакію навіть при нормальному результаті біопсії.

Лабораторні міркування Лабораторія, яка проводить спеціальну діагностику КР, повинна постійно залучатися до внутрішнього та зовнішнього контролю якості. Використовуваний тест повинен бути підтверджений, наприклад: еталонний стандарт ema. Між кожним тестом можуть бути відмінності в чутливості, специфічності, нормальному порозі, наприклад: анти-ttg - існують різні тести генерації. Лабораторія повинна дати верхній нормальний поріг використовуваного тесту. зуби. Може бути дано найвище розведення, при якому тест все ще є позитивним. Вкажіть, яку тканину лабораторія використовує як субстрат. Під час тесту слід враховувати потенційний ефект відскоку (високий титр антитіл).

Додаткові аспекти віку пацієнта необхідні для правильної інтерпретації рівня сироваткового IgA у сироватці пацієнта; у компетентних осіб IgA результат антитіл до IgA - це переважно звички споживання глютену пацієнтом (у випадку безглютенової дієти негативний результат неможливо оцінити). пацієнт, який отримує імунодепресивне лікування

Серологічний тест Чутливість% Специфічність% Ізотип антитіл Anti-tTG 91-95 95-97 IgA та IgG Антиендомізал 85-98 95-100 IgA Антигліадин 58-75 85-95 IgA та IgG Антидезамінований гліадиновий пептид 86-90 93-96 IgA та IgG Michael X Ma та ін. Діагностичні дилеми при целіакії Expert Rev. Gastroenterol. Гепатол 7 (7), 643-655 (2013)

Ендоскопія та біопсія, гістопатологія Нормальний тонкий кишечник Целіакія тонкий кишечник Клейковина Безглютенова дієта

Целіакія: оновлення для патологоанатомів J Clin Pathol 2006, жовтень 59 (10): 1008-1016 Змінена класифікація БЕРЕЗНЯ

Кілька генів беруть участь у розвитку хвороби Генетичне тестування Один або обидва HLA DQ2/DQ8 постійно присутні, необхідна умова для розвитку целіакії, але недостатня. Перенесення гена навряд чи спричинить вашу хворобу, проте антитіла TG2 та EMA, знайдені на компакт-диску, виробляються лише у осіб з HLA-DQ2 або DQ8. HLA + глютенова целіакія

Характеристика HLA DQ2 та DQ8 HLA має сильне негативне прогностичне значення Виявляється у> 95% целіакії Переносить 25-30% нормальної популяції Бідне позитивне прогнозне значення

ESPGHAN (Європейське товариство з питань дитячої гастроентерології, гепатології та харчування для діагностики целіакії) Клінічне керівництво 2012

Кого ми повинні обстежити? Група 1: діти та дорослі з незрозумілими симптомами з інших причин Хронічна періодична діарея Затримка росту, втрата ваги Затримка статевого дозрівання, аменорея Залізодефіцитна анемія Нудота, блювота Біль у животі Хронічна втома Часті виразки Група 2: безсимптомні діти та дорослі Синдром Дауна Аутоімунне захворювання щитовидної залози Синдром Тернера Селективний дефіцит IgA Аутоімунні захворювання печінки Родичі целіакії першого ступеня

Чому необхідно використовувати інший алгоритм симптоматичного або у безсимптомних, але пацієнтів групи ризику? 1. Помилково позитивний або тимчасовий TG2 частіше зустрічається у генетично скомпрометованих пацієнтів, ніж у пацієнтів із симптомами. 2. За нормальної гістології (марш 0) титр TG2, як правило, низький, норма. верхнє значення у 10 разів збільшення титру IgA сильно робить діагностику CD антидезамідований гліадиновий пептид (IgA та IgG) до 2 років більш чутливим, ніж ttg Anti EMA IgA найбільш специфічні та найчутливіші Специфічні антитіла можуть бути відсутніми під час безглютенової дієти HLA DQ 2 & HLA DQ 8 Негативний результат перешкоджає діагностиці CD