Регулярний догляд та утримання даніо (Danio rerio) Лабораторія: Вступ

1. Зберіть розсіл креветок за допомогою крана внизу інкубатора. Відкиньте початковий потік, який складається з невилуплених яєць соляних креветок.
2. Викинувши ненароджені соляні креветки, зберіть вилуплені соляні креветки, які будуть використовуватися як їжа для даніо.
3. Відокремте соляні креветки від солоної води, використовуючи сітку для збору соляних креветок (

   4. Вирощування личинок

   Запліднені яйця зберігали в інкубаторі (

   28,5 ° C) протягом 72 годин, поки личинки не вилупляться. Зараз вони є вільно плаваючими личинками хоріона і готові до переведення в основний рибний резервуар. Личинок потрібно годувати через 5 днів після запліднення (dpf) і утримувати в середині ембріонів (склад, описаний у частинах 3, 10) або водної системи. Личинки можна тримати в круглих пластинах с

   50% і більше води в ньому змінюється щодня. Заміна води повинна включати видалення загиблих або хворих личинок та будь-якого іншого сміття.

4. Акуратно перенесіть личинок у резервуар, що містить невелику перегородку (близько 300-400 мкм). Слід видаляти мертві та хворі личинки та щодня додавати повільно кілька мілілітрів води.
5. Через 14 днів резервуари для личинок можна подати в систему та забезпечити невеликим потоком циркулюючої води (1-2 краплі в секунду). У міру зростання личинок потік води можна збільшувати. Залежно від розміру личинок можна використовувати різні розміри перегородок (наприклад, розмір перегородки 300-400, 500, 700-750 та 1000 мкм), а для дорослих риб слід використовувати звичайну пластикову перегородку.
6. Зазвичай для переростання ембріонів у статевозрілих дорослих особин потрібно 3 місяці.

Репрезентативні результати

Кілька критичних проблем, які можуть виникнути в лабораторії даніо, включають блокування подачі води до окремих/усіх резервуарів в системі житла, погану якість води та витоки в трубах або резервуарах циркуляційної системи. Крім того, проблеми з отриманням зародків розплоду можуть бути ще одним приводом для занепокоєння. Вирішення проблем із цими проблемами розглядається нижче.

Малюнок 2. Мікроскопічний огляд розсольних креветок при 12X (A), одиночних розсольних креветок при 90X (B) та незаплідненого яйця при розсольних креветках 90X (C).

Малюнок 3. Мікроскопічний огляд (16X) запліднених і незапліднених яєць, де лише дві незапліднені яйцеклітини, незапліднені яйця позначені чорними стрілками (A). Більший вигляд збільшення (90X) a. запліднене (B) та незапліднене яйце (C)

Малюнок 4. Самка-яйцеклад-яйцеклад (позначена чорною стрілкою) Ілюстрація.

Таблиця 2. Параметри якості води. Параметри якості води. Оптимальний діапазон параметрів навколишнього середовища в акваріумі даніо 11.

Обговорення

Данири походять з річки Ганг на півночі Індії і стають популярними в дослідженнях як на дорослих, так і на личинкових стадіях 2, оглянуті Spence et al. 3. Рибки даніо мають ряд переваг перед іншими моделями тварин, такі як висока плодючість, простота обслуговування, оптичне очищення ембріонів, швидкий розвиток ембріона та низька вартість обслуговування. Вони сприйнятливі до генетичних маніпуляцій 6 і придатні для виявлення високопродуктивних препаратів 4,5. Його запліднення є зовнішнім, що вигідно використовувати біологам розвитку. Завдяки цим сприятливим характеристикам даніо набирає популярності в генетичних 7, 8 фармакологічних та поведінкових дослідженнях 9,10. Існує низка проблем із утриманням об'єкта данини та вирощуванням даніо для ембріонів. Тут ми описуємо наш досвід та рекомендації щодо вирішення цих проблем та окреслюємо протокол для обслуговування системи, годівлі та вирощування личинок.

Обслуговування системи

Більшість систем даніо використовують хлоровану воду з-під крана, проте деякі системи використовують деіонізовану воду. Важливо підтримувати провідність води системи від 300 до 1500 мС

оскільки це зменшує енергію, необхідну рибі, щоб утримати солі з організму. Отже, даніо не можна утримувати в деіонізованій воді, якщо не додавати солі для підтримки оптимального рівня провідності. Якщо використовується водопровідна вода, існує ризик високих концентрацій міді у воді системи, оскільки вугільний фільтр не видаляє мідь. Тому користувач повинен перевірити, чи максимально уникають концентрації міді та мідних труб.

Риб даніо ніколи не слід перегодовувати, оскільки це може підвищити рівень нітратів у воді, що може вплинути на їх розмноження 11 або життєздатність, оскільки деякі риби можуть загинути через переїдання. Рекомендується не давати більше їжі під час будь-якого годування, ніж риба може закінчити за 10 хвилин. Дуже важливо видалити сіль з розсолу креветок перед тим, як годувати даніо, оскільки надмірна концентрація солі спричиняє смерть. Якщо потрібно більше яєць даніо, рибу можна годувати тричі на день. Щоденне прибирання розплоду для риби також покращує рівень несучості.

Годуючи у водних середовищах існування, ми зазвичай вимикаємо водяний насос та повітряний насос, щоб риба могла їсти їжу протягом 10 хв. Це зменшує кількість їжі, яка промивається у фільтрах. Однак користувачі повинні бути обережними, щоб повторно пошкодити, щоб знову ввімкнути насоси пізніше.

Рибки даніо зазвичай знаходяться в оптимальних умовах розмноження між ними

Збільшення личинок

Годування личинок слід починати з 5 дпф (запліднення через дні). Молодих личинок можна годувати сухим кормом

Розміром 100 мкм (наприклад, ZM100) або живими продуктами, такими як парамецій та коловертки (що стимулює ріст). Розмір повільної їжі можна збільшити на 200 мкм (наприклад, ZM200) або на 300/400 мкм (наприклад, ZM300). Доросла популяція риб повинна становити близько 7,6 риби на літр води. Ця практика рекомендується для кращого підтримання БПК (біологічної потреби кисню) в резервуарах.

Розкриття інформації

Конфліктів інтересів не заявлено.

Подяка

Автори висловлюють подяку Таммі Есмайлі за допомогу в управлінні лабораторними витратними матеріалами. AA отримує стипендію докторанту від Центру вдосконалення досліджень та догляду за хворобою Альцгеймера в Школі медичних наук університету Едіт Кован. MC Doctor отримує фінансову підтримку від Ротарі Клубу, Перт. AM, GV, KT та RNM фінансуються Фондом досліджень Альцгеймера Маккаскера.

• Xplora Care; Xplora Великобританія
• Салют і Бенестар; Природна охорона здоров’я
• Регулювати запор, необхідний для схуднення; Інтегративне здоров’я
• Правда чи хибність - чи безпечно пити вашу сечу - догляд за раком у Західному Нью-Йорку
• Вживання речовин - амфетаміни - UI Health Care