порушення

  • предметів
  • реферат
  • Передумови:
  • методи:
  • результати:
  • висновок:
  • Головний
  • результат
  • Демографія та харчування
  • Стан кобальтину та фолієвої кислоти для немовлят
  • Гематологічні показники немовлят
  • обговорення
  • висновок
  • методи
  • Населення та дослідження дизайну
  • Забір крові та біохімічний аналіз
  • Статистичний аналіз
  • Звіт про фінансову підтримку
  • розкриття інформації

предметів

  • анемія
  • біомаркери
  • Харчування
  • педіатрія

реферат

Передумови:

Хоча дефіцит заліза вважається основною причиною анемії у немовлят, дефіцит кобаламіну в першу чергу характеризується затримкою розвитку, а типова макроцитарна анемія в цій віковій групі обмежується важкою та тривалою недостатністю кобаламіну. Гематологічні параметри вивчали у дітей 4-місячного віку з біохімічними ознаками порушення кобаламіну, які брали участь у рандомізованому контрольованому дослідженні кобаламіну протягом 6 тижнів.

методи:

Сто сім дітей були випадковим чином призначені для ін'єкції внутрішньом'язово 400 мкг кобаламіну або без втручання через 6 тижнів. Гематологічні параметри та статус кобаламіну та фолатів визначали при включенні та через 4 місяці.

результати:

Добавки кобаламіну покращили всі маркери порушення кобаламіну, але не мали впливу на кількість гематологічних клітин через 4 місяці (Р> 0,18). Симптоми еритропоезу з обмеженим вмістом заліза спостерігались через 6 тижнів та 4 місяці. Через 4 місяці найсильнішими провісниками низького рівня заліза були чоловіки та високий відсоток приросту ваги від народження.

висновок:

У немовлят з біохімічними ознаками порушення функції кобаламіну добавки не покращують кількість гематологічних клітин. Зміна параметрів еритроцитів, як видається, в першу чергу пов’язана із статусом заліза у цій віковій групі.

Головний

Грудне вигодовування - це період, який характеризується швидким зростанням із підвищеною вимогою до кількох мікроелементів та, як наслідок, ризиком недоїдання (1). Як повідомляється, у немовлят, які переважно перебувають на грудному вигодовуванні, дефіцит заліза та кобаламіну переважає (1, 2). Хоча дефіцит заліза вважається основною причиною анемії у немовлят (3), дефіцит кобаламіну характеризується насамперед відставанням у розвитку у цій віковій групі (2, 4). Як повідомляється, у немовлят із граничним дефіцитом кобаламіну спостерігаються нормальні гематологічні показники (5, 6), а панцитопенія та макроцитарна анемія спостерігаються головним чином при важкій та тривалій недостатності кобаламіну (2).

Оцінка харчування немовлят може бути утруднена через значні фізіологічні зміни, що відбуваються в перші місяці життя, що ускладнює інтерпретацію нормальних лабораторних показників (2, 7). Сироватковий кобаламін значно зменшується в перші тижні і залишається низьким протягом перших 6 місяців, тоді як фолієва кислота в сироватці збільшується і залишається високою протягом першого року життя (8). Ці зміни супроводжуються збільшенням метаболічних маркерів загального гомоцистеїну (tHcy) та метилмалонової кислоти (8). Добавки кобаламіну змінюють усі ознаки порушеного кобаламіну в напрямку до профілю, який спостерігається у дітей старшого віку та дорослих із реплікацією кобаламіну, що свідчить про те, що високий рівень tHcy та метилмалонової кислоти, що повідомляється у значної частини немовлят, які переважно перебувають на грудному вигодовуванні, не відображає незрілого метаболізму, а скоріше поганого спільного проживання. -залежні реакції (9).

Швидкість синтезу гемоглобіну та утворення еритроцитів різко зменшується протягом перших днів після народження та досягає максимуму протягом другого тижня життя. Завдяки пригніченому еритропоезу та зниженню життєздатності еритроцитів плода (60–70 днів) рівень гемоглобіну (Hb) та кількість еритроцитів досягають найнижчих значень - через 2 місяці після народження (10, 11). Розмір еритроцитів, що визначається середнім обсягом клітин (MCV), зменшується і є найменшим у віці 6 місяців, а потім поступово збільшується (10). Хоча загальні параметри еритроцитів, такі як рівні Hb і MCV, відображають середні значення популяції еритроцитів із середньою життєздатністю 120 днів, вміст ретикулоцитарного гемоглобіну (CHr) забезпечує оцінку еритропоезу в реальному часі за попередні 24– 48 год (12). Ця перевага робить CHr корисним у періоди швидких фізіологічних змін, і вважається, що CHr є найкращим предиктором дефіциту заліза у немовлят і перевершує традиційні параметри заліза, такі як феритин у сироватці крові та насиченість трансферину (7).

Раніше ми проводили рандомізоване контрольоване дослідження з використанням кобаламіну у немовлят, які переважно перебувають на грудному вигодовуванні у віці 6 тижнів з біохімічними ознаками порушення функції кобаламіну (9). У цій статті ми повідомляємо про вплив добавок кобаламіну на гематологічні показники у дітей після 4 місяців. Метою цього дослідження було дослідити, чи пов'язаний метаболічний профіль, що вказує на порушення функції кобаламіну, з гематологічною продукцією клітинних ліній протягом перших місяців життя.

результат

Демографія та харчування

До складу досліджуваної групи входило 107 здорових 6-тижневих дітей, 56 хлопчиків (52%), народжених у термін (середній термін вагітності 39,9 (SD 1, 3) т.), Із вагою, що відповідає терміну вагітності (середня 3578 (SD 506 ) g). Істотних відмінностей між кобаламіном та контрольною групою не виявлено за демографічними характеристиками немовлят та матерів при зарахуванні та спостереженні (Р> 0,05), а дані для всієї групи наведені у в таблиці 1 . Використовували два різні типи складу молока, збагаченого залізом (0,7-0,8 мг на 100 мл відновленого молока) та кобаламіну (0,13-0,2 мкг на 100 мл відновленого молока). Використовували різні типи суспензії, всі збагачені залізом (4, 8 - 11, 1 мг на 100 мг порошку). Жодна дитина не отримувала додаткового заліза.

Стіл в натуральну величину

Середній відсоток приросту ваги від народження становив 39% (SD 14%) через 6 тижнів та 95% (SD 26%) через 4 місяці. Кореляція Спірмена полягала у збільшенні процентної ваги через 6 тижнів (r = -0, 44, Р 0,06), і не спостерігалося значних відмінностей у процентному збільшенні ваги або дієті.

Середній вік матерів становив 31,5 року (SD 4, 8) років. І 63 із 104 матерів були багатодітними і мали в середньому 1,4 дитини (діапазон: 1-4). 38 із 104 матерів повідомляли про щоденне використання добавок заліза протягом коротших або довших періодів під час вагітності. Дві матері були вегетаріанками, а інші сказали, що вони мають повноцінні дієти, хоча дев'ять матерів сказали, що рідко або ніколи не їли м'яса (n = 6) або риби (n = 3).

Стан кобальтину та фолієвої кислоти для немовлят

Опубліковано детальний опис стану кобаламіну та фолієвої кислоти (9). Через 6 тижнів середній рівень кобаламіну в сироватці становив 170 (134-255) пмоль/л, а середній рівень tHcy у плазмі крові становив 7,59 (6, 21-9, 28) мкмоль/л; істотних відмінностей у рівні вітамінів та метаболітів між кобаламіном та контрольною групою не спостерігалося. Через 4 місяці група кобаламіну мала на 75% вищий середній рівень кобаліну в сироватці порівняно з контрольною групою, і їх середній рівень tHcy знизився на 39%, але залишався незмінним у контролі, що вказує на метаболічну відповідь на добавки кобаламіну.

Гематологічні показники немовлят

Середні рівні Hb, MCV та CHr знижувались з 6 тижнів до 4 місяців, тоді як середня кількість усіх трьох клітинних ліній зростала; ми не спостерігали жодних суттєвих відмінностей між кобаламіном та контрольною групою ( таблиця 2 ). Ми також не спостерігали впливу добавок кобаламіну на гематологічні параметри (P> 0, 18 для всіх параметрів, дані не показані), використовуючи модель множинної лінійної регресії, яка включала, серед іншого, стать, відсоток приросту ваги, харчування та використання материнських препаратів заліза. ( Таблиця 3 ). Через 4 місяці основними детермінантами гематологічних показників були високий відсоток постнатальної ваги та чоловіча стать, які були пов’язані з нижчим статусом заліза, визначеним MCV та CHr ( таблиця 3 ). Через 4 місяці на рівні Hb не спостерігалося значущих предикторів. Загальні адитивні моделі представлення залежних від дози змін, показаних для CHr та MCV із процентним збільшенням ваги, показані в Фігура 1 . Чоловіки мали значно менші еритроцити та нижчий рівень CHr порівняно з дівчатами на 6 тижні та 4 місяці ( таблиця 4 ).

Стіл в натуральну величину

Стіл в натуральну величину

Зв'язок доза-реакція між відсотком приросту ваги від народження до 4 місяців з ( a ) вміст ретикулоцитарного гемоглобіну (CHr) та ( b ) середній об’єм клітин (MCV) через 4 місяці з використанням узагальнених адитивних моделей. Криві дози-реакції показані суцільними лініями з 95% довірчим інтервалом у вигляді штрихових ліній.

Повнорозмірне зображення

  • Завантажте слайд PowerPoint

Стіл в натуральну величину

Через 6 тижнів ретикулоцитоз опосередковано асоціювався з рівнем Hb (r =, 0, 62, P 0,06), значних асоціацій не спостерігалося. ).

Залежність доза-реакція між ( a ) рівні гемоглобіну (Hb), ( b ) середній об’єм клітин (MCV) та ( c ) вміст ретикулоцитарного гемоглобіну (CHr) із вмістом ретикулоцитів через 6 тижнів із використанням узагальнених адитивних моделей. Криві дози-реакції показані суцільними лініями з 95% довірчим інтервалом у вигляді штрихових ліній.

Повнорозмірне зображення

  • Завантажте слайд PowerPoint

обговорення

У доношених немовлят із переважно грудним вигодовуванням з біохімічним профілем, що свідчить про порушення функції кобаламіну, добавки кобаламіну мали значний вплив на метаболічні маркери стану кобаламіну через 6 тижнів (9), але не впливали на гематологічні показники через 4 місяці. Високий відсоток приросту ваги після пологів та чоловіча стать були основними детермінантами гематологічних показників і були пов’язані з нижчим статусом заліза. Ретикулоцитоз асоціювався з низьким рівнем MCV та CHr як протягом 6 тижнів, так і через 4 місяці, що свідчить про існування еритропоезу з обмеженим вмістом заліза протягом перших місяців життя у немовлят, які переважно годували груддю.

Формальні обмеження в проекті дослідження включали відсутність сліпих дослідників та матерів шляхом ін'єкції кобаламіну та відсутність ін'єкції плацебо у контрольній групі. Однак ми не вважаємо ці фактори важливими для гематологічного результату у дітей після 4 місяців.

Для визначення фолієвої кислоти та кобаламіну в сироватці крові використовували мікробіологічні тести. Проти конкурентного зв’язування люмінесценції широко застосовуються в останні роки, але мікробіологічний аналіз все ще вважається золотим стандартом фолієвої кислоти в сироватці крові (13). Хоча мікробіологічний аналіз визначає біологічно активний кобаламін, аналізи люмінесценції з конкурентним зв'язуванням також включають функціонально неактивні аналоги кобаламіну. Недавні дослідження показують, що конкурентні тести на люмінесценцію, що зв'язують, можуть мати широкомасштабне порушення, зокрема шляхом надання хибно нормальних значень дефіциту кобаламіну (14).

Через 4 місяці основний приріст ваги після пологів та чоловіча стать були основними детермінантами гематологічних показників, і обидва вони були пов’язані з нижчим рівнем заліза. Швидке зростання з подальшими вищими харчовими потребами може спричинити проблеми, якщо дієта є неоптимальною. Більшість (70%) цих немовлят вигодовуються виключно з народження, і хоча грудне молоко багате енергією, в ньому мало деяких поживних речовин, таких як залізо та вітаміни D і K (20). Повідомлялося про зниження концентрації заліза та кобаламіну в грудному молоці під час лактації (21, 22), а тривале виключне грудне вигодовування асоціюється з підвищеним ризиком дефіциту кобаламіну та заліза (23). Стать чоловіків також є визнаним фактором ризику дефіциту заліза у маленьких дітей (24, 25). Як повідомляється, у хлопчиків рівень MCV та Hb та феритину був значно нижчим порівняно з дівчатами протягом перших 9 місяців життя (24), але механізм цієї гендерної різниці невідомий. Статева різниця частково може бути пояснена більшим збільшенням ваги хлопчиків, що не було підтверджено в нашому дослідженні; чоловіча стать та відсоток приросту ваги виявились незалежними факторами ризику низького рівня заліза.

У цих маленьких дітей кількість ретикулоцитів опосередковано корелювала з рівнем Hb та асоціювалась із низьким рівнем MCV та CHr, що свідчить про еритропоез з обмеженим залізом (26). На відміну від дорослих, у яких низький рівень Hb через дефіцит заліза, як правило, пов'язаний із нормальним або зниженим рівнем еритроцитів (27), високий рівень еритроцитів спостерігався у немовлят у віці 6-48 місяців із залізодефіцитною анемією (28). Ретикулоцитоз, який спостерігався у цій віковій групі, був більш вираженим при легкій та важкій анемії, що пояснюється тим, що важкий дефіцит заліза пов'язаний з дизеритропоезом, що може зменшити кількість вижилих еритроцитів (28).

висновок

У немовлят з біохімічними ознаками порушення кобаламіну добавки кобаламіну через 6 тижнів мали значний вплив на внутрішньоклітинні метаболічні маркери статусу кобаламіну, але не впливали на гематологічні показники через 4 місяці. У цих немовлят, які переважно перебувають на грудному вигодовуванні, високий відсоток приросту ваги та чоловіча стать були основними чинниками, що визначають гематологічні показники, і вони були пов’язані із зниженням рівня заліза через 4 місяці. Подальші дослідження стану мікроелементів у дітей молодшого віку, особливо на грудному вигодовуванні, є виправданими.

методи

Населення та дослідження дизайну

У період з грудня 2004 р. По квітень 2006 р. 107 здорових 6-тижневих немовлят, у тому числі три пари близнюків та їх 104 матері, були прийняті до місцевих служб охорони здоров'я в Бергені, Норвегія, та були включені в дослідження кобаламіну. Опубліковано детальний опис методів та результатів дослідження (9). Гематологічні дані були доступні для 107 дітей у віці 6 тижнів та 102 дітей у віці 4 місяців, і ці діти були включені в цей аналіз.

Анкету щодо харчування немовлят та матерів, добавок вітамінів, параметрів росту, співвідношення та вживання тютюну заповнювали через 6 тижнів та 4 місяці. Оскільки всі різні види їжі та каш, що використовуються, містили залізо, харчування немовлят визначали як виключно грудне вигодовування проти невиключного, яке включало грудне вигодовування та годування немовлят, виключне вигодовування немовлят та будь-яке з них у поєднанні з повноцінною дієтою.

Немовлятам призначали шляхом рандомізації блоком внутрішньом’язову ін’єкцію 400 мкг гідроксикобаламіну (депо вітаміну В12; Nycomed Pharma, Аскер, Норвегія) (n = 54, група кобаламіну) або без лікування (n = 53, контрольна група). Персонал лабораторії, відповідальний за збір та аналіз крові, був засліплений для призначення групи.

Етична згода на протокол була надана Регіональним комітетом з питань етики медичних досліджень, а матері дали письмову інформовану згоду. Цей тест зареєстровано в ClinicalTrials.gov за номером NCT00479479.

Забір крові та біохімічний аналіз

Зразки крові отримували через 6 тижнів та 4 місяці антеубуальною венепункцією та збирали у пробірки EDTA Vacutainer (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ). Гематологічні параметри (Hb, MCV, еритроцити, ширина розподілу еритроцитів, CHr, лейкоцити та тромбоцити) аналізували протягом 4 годин за допомогою автоматизованого гематологічного аналізатора (ADVIA 120; Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY). Індекси ретикулоцитів (ретикулоцити та CHr) були доступні для субпопуляції досліджуваної популяції (n = 62 із 107 через 6 тижнів, n = 72 із 102 через 4 місяці та n = 58 із 102 парних даних через 6 тижнів та 4 місяці ),

Зразки крові, використовувані для приготування ЕДТА-плазми, поміщали в крижану воду і плазму відокремлювали протягом 4 годин. Рівні tHcy та метилмалонової кислоти у плазмі крові аналізували за допомогою газової хроматографії-мас-спектрометрії на основі дериватизації метилхлороформату (29). Сироватку отримували шляхом взяття крові в безвакуумні пробірки (Бектон Дікінсон). Кобаламін сироватки крові визначали за мікробіологічним тестом Lactobacillus leichmannii (30), а фолієву кислоту - за мікробіологічним тестом Lactobacillus casei (31).

Статистичний аналіз

Результати повідомляються як середнє значення та інтерквартильний діапазон та середнє значення та SD. Медіани порівнювали за допомогою критерію Вілкоксона з підписаною позицією та U-критерієм Манна-Уітні, що означає t-критерій Стьюдента. Різниця в категоріальних змінних була перевірена за допомогою тесту χ 2 .

Кореляція Спірмена була використана для оцінки взаємозв'язку між відсотком приросту ваги та вагою при народженні та взаємозв'язку між гематологічними показниками через 6 тижнів та 4 місяці. Кілька моделей лінійної регресії використовувались для оцінки взаємозв'язку гематологічних показників дитини (Hb, MCV та CHr) через 4 місяці із втручанням кобаламіну, статтю, процентним збільшенням ваги від народження до 4 місяців, харчуванням немовлят та використанням заліза матері. Від 6 тижнів до 4 місяців.

Графічне представлення залежності дози рівня Hb, MCV та CHr з кількістю ретикулоцитів через 6 тижнів та відсоткове збільшення ваги при CHr та MCV через 4 місяці були отримані за допомогою узагальнених адитивних моделей.

Узагальнені адитивні моделі розраховували за допомогою програмного забезпечення mgcv-пакету (версія 1.4-1) у R (R Foundation for Statistics Computing, версія 2.8.1; Відень, Австрія), а статистичний пакет SPSS (версія 18) використовували для решти статистичних аналізів . Двосторонні значення P