реферат
Хронічний рецидивуючий мультифокальний остеомієліт (CRMO) характеризується періодичними запальними ураженнями в метафізі довгих кісток і, як правило, вражає дітей та підлітків. Подібність з аутосомно-рецесивним мишачим розладом (КМО, хронічний мультифокальний остеомієліт) змусив нас провести сімейне дослідження асоціації з двома маркерами на хромосомі 18q в регіоні, гомологічному локалізації мишей КМО. Ми виявили значну зв'язок CRMO з рідкісним алелем маркера D18S60, що призводить до відносного ризику гаплотипу (HRR) 18. Це свідчить про існування гена в цій області, який суттєво сприяє етіології CRMO та демонструє перші докази генетичної основи CRMO. Цей ген відрізняється від RANK, який мутує при сімейному розширеному остеолізі (FEO), але не в CRMO. Скринінг мутацій у генах RANK та генах PIGN та KIAA1468 призвів до виявлення двох варіантів (один у RANK та один у PIGN), які перебувають у нерівноважному стані з рідкісним алелем D18S60, але не пов'язані самостійно з CRMO.
матеріал і методи
пацієнтів
Двадцять сім пацієнтів із CRMO та їхні батьки були доставлені з кількох центрів у Німеччині. Усі пацієнти були німецького походження, крім одного турецького та одного хорватського пацієнтів. Діагноз CRMO базувався на остеолітичних ураженнях з крайовим склерозом при рентгенографії, хорошому загальному стані та нормальному рівні крові. Крім того, існував мультифокальний та/або характерний ділянку (метафіз довгих кісток або ключиці) та/або супутній пальмоплантарний пустульоз. Письмова інформована згода була отримана від усіх пацієнтів та/або їх батьків. Протокол дослідження був затверджений Комітетом з етики медичного факультету Мюнхенського університету.
Молекулярні дослідження
Статистичний аналіз
Дані генотипів для маркерів D18S1148 та D18S60 були статистично проаналізовані двома методами асоціації на основі сімей, відносним ризиком гаплотипу (HRR) 11 з точним тестом Фішера та тестом на нерівноважний дисбаланс (TDT) 12 зі значеннями P, визначеними за допомогою біноміального розподілу з точним біноміальна проба. Значення P порівнювали з рівнем значимості, виправленим для багаторазового тестування, використовуючи корекцію Бонферроні для двох маркерів, кожен з п’ятьма алелями, використовуючи поправочний коефіцієнт 5–1 = 4 для кількості алелів, як пропонував Шайд, 13 помножений на кількість маркерів (2x4 = 8) (a = 0,05: 8 = 0,00625, a = 0,01: 8 = 0,00125). Для кожного маркера ми протестували ще чотири загальних алелі та поєднали дуже рідкісні алелі (n ⩽ 3) у п'ятому неперевіреному алелі. Для подальшого аналізу даних гаплотипів (варіант PIGN Exon 15, 1692A/T та варіант RANK Exon 9, 971G/A) був використаний точний тест Фішера для аналізу асоціації між маркером та варіантом та TDT, як реалізовано в GENEHUNTER 14 для аналізу асоціації між CRMO. і гаплотипи.
результат
Для маркера D18S1148 не спостерігалося різниці між частотами алелів між переданими батьківськими алелями (алелями, переданими пацієнтам) та неперекладеними батьківськими алелями (псевдоконтролі). В одному з 27 псевдоконтролів (54 батьківських алелів, що не підлягають передачі), рідкісний алель (довжиною 166 п.н.) маркера D18S60, описаний з частотою 0,05 у родоводах CEPH, був знайдений в гетерозиготному стані, в одному з 27 псевдоконтролів (54 непереносимі батьківські алелі), але 11 із 27 пацієнтів, жоден з батьків не був гомозиготним щодо цього алелю). Ця різниця є надзвичайно значущою (Р = 0,0011 А, присутня у 6 з 54 переданих та 2 з 54 неперекладених батьківських алелів, не має суттєвої асоціації з CRMO (Р = 0,26). Проте, вона суттєво пов’язана з алелем D18S60/166. bp (RANK/A був присутній у 5 з 12 батьківських хромосом з алелем D18S60/166 bp та 4 з 96 без, P = 0 0007).
Гаплотипи D18S60-PIGN-RANK на переданих та неперекладених хромосомах батьків пацієнтів CRMO. Довжина алелю D18S60 у bp показана з супутніми алелями PIGN1692 (A або T) і RANK971 (G або A), по одному гаплотипи спостерігаються лише один або два рази, узагальнені в "інші".
Повнорозмірне зображення
обговорення
Дякую
Ми дякуємо пацієнтам та їх сім'ям за участь, G Shen-Ong за корисну дискусію та лікарям за допомогу у наборі пацієнтів: M Borte, Leipzig, H Girschick, Würzburg, R Häfner, Garmisch-Partenkirchen, T Hospach, Stuttgart, V Jansson, Мюнхен, J і S Killburger, Schalksmühle, RM Küster, Bad Bramstedt, M Mann, St. Августин, Дж. Мейстер, Ауе, Д. Мейєр, Ульм, З. Олькерс і Б. Рідель, Гамбург, К. Х. Пульчер, Харгесхайм, М. Сейлер, Інсбрук, С. Шауер-Петровська, Берлін-Бух, Ф. Шилінг, Майнц, П. фон Шенайх, Аугсбург, П Шютце, Дрезден.