лабораторної

В середньому спостерігається збільшення кількості інфекцій, спричинених хламідіями та мікоплазмами. Збільшення частоти захворювання також підтверджується нашою лабораторною статистикою.

Це бактерії, які живуть усередині клітин людини, ми знаємо їх більше, але особливо важливі дві групи:

  • деякі викликають інфекції сечостатевої та репродуктивної систем,
  • останні в основному вражають верхні та нижні дихальні шляхи.

Інфекції, спричинені Chlamydia trachomatis, вважаються найпоширенішими з усіх захворювань, що передаються статевим шляхом. Діагностика та лікування хламідійної інфекції складніші, оскільки в більшості випадків вона прихована, без основних видимих ​​симптомів. Мікоплазми та уреаплазми - найпоширеніші колонізатори сечостатевих шляхів людини після хламідіозу. Ці патогени були пов’язані з гострим уретритом у чоловіків та вагінітом та цервіцитом у жінок. Mycoplasma hominis та Ureaplasma urealyticum часто діагностуються у жінок без симптомів захворювання. Як Mycoplasma pneumoniae, так і Chlamydia pneumoniae є збудниками інфекцій верхніх та нижніх дихальних шляхів, часто з безсимптомним або легким перебігом.

Рання лабораторна діагностика цих збудників, лікування та боротьба з інфекціями, включаючи профілактичні заходи, вимагають постійних досліджень та досліджень клінічного та епідеміологічного контекстів.

Методи діагностики

Методи прямої діагностики ґрунтуються на даних про мікроорганізм, про який йде мова, у зразку, взятому безпосередньо з місця підозри на зараження. Оскільки це мікроорганізми з вимогливими умовами культури, вирощування не використовується в звичайних лабораторних умовах. Отже, методи прямого виявлення засновані на виявленні антигену або ДНК. Вирішальним фактором у методах прямих доказів є якість відібраної вибірки. Це особливо важливо при хламідіях, оскільки вони є внутрішньоклітинними мікроорганізмами, і тому важливо, щоб зразок містив епітеліальні клітини. Зразки, що містять лише виділення та ексудати, можуть бути недостатніми для правильної діагностики. За допомогою цих методів можна також виявити мертві мікроорганізми, які можуть бути присутніми у зразку після закінчення терапії, доки їх не усуне імунна система. Тому бажано проводити спостереження після лікування з інтервалом не менше 3 тижнів.

Непряма діагностика заснована на виявленні антитіл у сироватці крові різними імунологічними методами.

Chlamydia trachomatis

Пряма діагностика:

  • свідчення гл. trachomatis - імунохроматографічним методом (за запитом Клінічна мікробіологія I),
  • ДНК-доказ Ch. trachomatis - метод ПЛР (за запитом Інфекційна серологія, свідчення ДНК мікроорганізмів).

Прямий діагноз в основному використовується для прогнозування гострої стадії інфекції, коли виявлення ДНК є Ch. trachomatis чіткі докази зараження. Різниця між двома методами, доступними в Alpha Medical, полягає в чутливості та специфічності аналізу. Метод ДНК-ПЛР має вищу чутливість і специфічність. У цьому методі специфічність досягає 98-100%, а чутливість 96-100% (при концентрації Ch. Trachomatis 5-10 МКЕ/мл). Визначення антигену - це імунохроматографічний експрес-тест, при якому необхідно враховувати можливість як помилкового позитиву, так і негативу. Неможливо розрізнити окремі види хламідій (Ch. Trachomatis, Ch. Pneumoniae, Ch. Psittaci) за допомогою згаданого вище експрес-тесту, якщо вони були присутні у вибірці.

Типи зразків, придатних для вищезазначених досліджень:

  • мазок із шийки матки, вагінальний мазок, мазок з уретри - можна дослідити обома методами,
  • сеча, мазок з кон’юнктивальної сумки - можна досліджувати лише за допомогою ПЛР, визначення Хл. сечовий трахоматис був скасований у наших лабораторіях, тому його більше не перелічують у нових видах позовів.

Важливі умови правильного відбору проб:

  • перед витиранням з шийки матки витріть слиз із шийки матки і киньте цей тампон, виконайте збір другим тампоном,
  • пацієнт не повинен мочитися принаймні за 1-2 години до мазка з уретри або збору сечі,
  • найкраще взяти перший потік ранкової сечі, 1 зразок, призначений для вирощування одночасно (потрібен середній потік сечі) та для підтвердження Ch. trachomatis (необхідний перший приплив сечі),
  • мінімізувати зберігання самородної сечі при кімнатній температурі (перед перенесенням у транспортну пробірку із середовищем ПЛР cobas).

Непряма діагностика:

  • визначення антитіл проти Ch. trachomatis IgM, IgA, IgG (скринінгове обстеження) методом ІФА (за запитом Інфекційна серологія, свідчення ДНК мікроорганізмів),
  • визначення антитіл проти Chlamydia spp. IgA, IgG (підтверджувальне обстеження) методом Line Blot - в одному аналізі антитіла проти Ch. trachomatis, Ch. pneumoniae, а також можна виявити антитіла проти Ch. psittaci (кожен вид окремо) (за запитом Інфекційна серологія, свідчення ДНК мікроорганізмів).

Різні склади антигенів, що містяться в різних наборах ІФА, можуть спричинити різні результати, особливо при нижчих рівнях антитіл. Тому в наших лабораторіях можна використовувати підтверджувальне визначення методом Line Blot, який визначає реакційну здатність антитіл з окремими хламідійними антигенами. Ми не проводимо підтверджувальне визначення антитіл методом Line Blot автоматично, але лише якщо це спеціально потрібно за запитом і в скринінговому тесті ми виявляємо позитивність антитіл проти хламідіозу (Ch. Trachomatis або Ch. Pneumoniae) в принаймні один клас (IgM, IgA або IgG).

Домінуючим хламідійним антигеном є видоспецифічний антиген MOMP (білок поверхневої мембрани). Окремі види хламідій мають 25-35% різного амінокислотного складу антигенів MOMP, що створює передумови для диференціації окремих видів хламідій. Однак він надійний лише для зараження одним хламідійним видом. При коінфікуванні кількома видами перехресна реактивність антитіл проти антигену MOMP також може мати місце за методом Line Blot. Отже, блот містить інші антигени: OMP2 (видоспецифічний білок поверхневої мембрани), HSP60 (білок Heat Shock) - є маркером хронічного запалення, а наявність антитіл цього типу пов’язане з безпліддям та реактивним артритом та MIP-антигеном (Macrophage потенціатор інфекційності) - поверхневий фактор вірулентності у внутрішньоклітинних мікроорганізмах. Антитіла до окремих антигенів мають різне значення при якісній блот-оцінці. Через високу поширеність Ch. pneumoniae у популяції, як правило, є інтерпретацією серологічного дослідження антитіл у Ch. trachomatis, часто складний.

Типи зразків, придатних для вищезазначених досліджень:

  • рідна венозна кров,
  • сироватка.

Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum

Пряма діагностика:

  • обстеження культури M. hominis та U. urealyticum для визначення чутливості до антибіотиків - ідентифікаційний тест культури на основі різних метаболічних властивостей та природної стійкості до мікоплазм (за запитом Клінічна мікробіологія I),
  • докази ДНК M. hominis - методом ПЛР,
  • свідчення ДНК М. genitalium - методом ПЛР,
  • свідчення ДНК U. urealyticum- методом ПЛР.

Тести ПЛР перераховані на запит Інфекційна серологія, виявлення ДНК мікроорганізмів.

Культурне обстеження надає можливість напівкількісної оцінки, а у випадку позитивних знахідок - також інформацію про чутливість до антибіотиків. Це вимагає збору в спеціальному транспортному середовищі, з якого неможливо провести інші обстеження культури. Результати обстеження культури доступні протягом 2-3 днів. ДНК окремих мікоплазм методом ПЛР можна дослідити з тієї ж проби, що і ДНК Ch. trachomatis. Недоліком визначення ПЛР порівняно з обстеженням культури є відбір серії зразків для 1 аналізу ПЛР, тому в стандартному режимі результати доступні протягом 5-7 днів.

Типи зразків, придатних для вищезазначених досліджень:

  • мазок з шийки матки
  • вагінальний мазок
  • мазок з уретри, сеча - можна досліджувати обома методами.

Важливі умови правильного відбору проб:

  • умови такі самі, як і для прямих методів доказування Ch. trachomatis.

Непряма діагностика:

  • при діагностиці сечостатевих мікоплазм не проводиться.

Хламідіоз пневмонії

Пряма діагностика:

  • ДНК-доказ Ch. пневмонія - метод ПЛР (за запитом Інфекційна серологія, свідчення ДНК мікроорганізмів).

Пряме виявлення ДНК Ch. pneumoniae повинен бути золотим стандартом у діагностиці гострих захворювань, враховуючи те, що в перші тижні хламідійної інфекції існує «серологічне вікно» (уповільнена реакція антитіл). Ch ДНК можна виявити за допомогою ПЛР. pneumoniae від неінфекційних сітчастих тіл, а також від неживих елементарних тіл. Відбір проб з найбільш підходящого місця (відповідно до типу інфекції) та якість відібраної проби мають вирішальний вплив на точність діагнозу. Позитивний результат є чітким доказом зараження, негативний результат означає відсутність хламідіозу у відібраній пробі, але не може виключити хламідійну інфекцію в організмі.

Типи зразків, придатних для вищезазначеного дослідження:

  • мазок з носоглотки, аспірат носоглотки - при інфекції верхніх дихальних шляхів,
  • мокрота, бронхоальвеолярний промивання - при інфекціях нижніх дихальних шляхів,
  • кров, зібрана в ЕДТА, може допомогти в діагностиці системної хламідійної інфекції, коли може спостерігатися стійкість хламідіозу в моноцитах і макрофагах, вона не підходить для гострих респіраторних інфекцій,
  • синовіальна рідина при виявленні хламідіозу у пацієнтів з реактивним артритом.

Важливі умови правильного відбору проб:

  • при мазку носоглотки через ротову порожнину важливо вставити вигнутий тампон за задній край м’якого клімату, протирати слизову в склепінні носоглотки віялоподібним рухом тампона і утримувати тампон у носоглотки протягом 5 секунд для вбирання виділень,
  • при мазку з носоглотки через носову порожнину слід вводити мазок через носову порожнину в носоглотку м’якими гвинтовими рухами (до тих пір, поки не помітите опір), плавно і повільно обертаючи тампон в носоглотці протягом 5 секунд, щоб вбрати секрет,
  • для мазка з носа або з мигдалин є матеріали, для яких необхідно розраховувати на більший відсоток помилкового негативу, і тому ми не рекомендуємо його в нашій лабораторії для діагностики Ch. пневмонія.

Непряма діагностика:

  • визначення антитіл проти Ch. pneumoniae IgM, IgA, IgG (скринінгове обстеження) методом ІФА (за запитом Інфекційна серологія, свідчення ДНК мікроорганізмів),
  • визначення антитіл проти Chlamydia spp. IgA, IgG (підтверджувальне обстеження) методом Line Blot - в одному аналізі антитіла проти Ch. trachomatis та Ch. pneumoniae, а також можна виявити антитіла проти Ch. psittaci (кожен вид окремо) (за запитом Інфекційна серологія, свідчення ДНК мікроорганізмів).

У гл. pneumoniae, збільшення антитіл IgM відбувається лише через 3-4 тижні після зараження; під час реінфекції антитіла можуть взагалі не утворюватися. Антитіла IgG позитивні через 6-8 тижнів після зараження, швидший ріст антитіл IgG відбувається при реінфекціях (через 1-3 тижні після реінфекції). Після подолання гл. pneumoniae, позитивність антитіл IgG зазвичай зберігається через 3-5 років після першої інфекції, при реінфекціях довше 5 років. Період напіввиведення антитіл IgA коротший, ніж у антитіл IgG, і тому позитивність антитіл IgA вважається найкращим показником стійкої інфекції. Однак у дорослого населення часто виявляється висока поширеність не тільки антитіл IgG, але й антитіл IgA, що може бути пов’язано не тільки з персистуванням інфекції, але й з повторним впливом Ch. пневмонія. На відміну від цього, у маленьких дітей віком до 5 років позитивність антитіл до Ch. pneumoniae трапляється рідко, що може бути пов’язано із слабкою антигенною стимуляцією або незрілістю імунної системи.

Mycoplasma pneumoniae

Пряма діагностика:

  • Докази ДНК M. pneumoniae - метод ПЛР (за запитом Інфекційна серологія, свідчення ДНК мікроорганізмів).

Культивування мікоплазм непридатне для стандартної діагностики, оскільки мікоплазми ростуть дуже повільно, і колонії видно лише через 2–5 тижнів культивування. Таким чином, пряме виявлення ДНК за допомогою ПЛР є підходящою альтернативою, оскільки дозволяє швидко отримати результати (вони зазвичай доступні в нашій лабораторії протягом 2-3 днів). Метод ПЛР є високочутливим і специфічним. Як і у випадку з хламідіозом, тип і якість зразка мають великий вплив на правильний діагноз. Ймовірність виявлення мікоплазм можна збільшити, надіславши 2 зразки з різних місць. На стадії зараження, коли антитіла IgG піднімаються, зразок верхніх дихальних шляхів вже може бути негативним щодо ДНК M. pneumoniae, але це не виключає зараження в нижніх дихальних шляхах.

Типи зразків, придатних для вищезазначеного дослідження:

  • мазок з носоглотки, мазок з горла, аспірат носоглотки - при інфекціях верхніх дихальних шляхів,
  • мокрота, бронхоальвеолярний промивання, ендотрахеальний аспірат - при інфекції нижніх дихальних шляхів.

Важливі умови правильного відбору проб:

  • мазки з носоглотки можна робити через порожнину рота або носа; інструкції щодо правильного збору наведені вище для ДНК Ch. пневмонія,
  • мазок з носоглотки слід доповнити тампоном з мигдалин,
  • у разі мазка мигдалини слизову оболонку мигдалин слід ретельно протирати, гвинтово обертаючи мазок, рухаючи тампон вперед і назад, а потім зверху вниз; у пацієнтів після тонзилектомії слід взяти мазок із задньої стінки глотки,
  • у дітей рекомендуються мазки з носоглотки та мигдалини, у дорослих - мокрота.

Непряма діагностика:

  • визначення антитіл проти M. pneumoniae IgM, IgA, IgG (скринінгове обстеження) методом ІФА (за запитом Інфекційна серологія, свідчення ДНК мікроорганізмів),
  • визначення антитіл проти M. pneumoniae IgM, IgA, IgG (підтверджувальне обстеження) методом Line Blot (за запитом Інфекційна серологія, докази ДНК мікроорганізмів).

Збільшення антитіл IgM відбувається вже через тиждень після зараження, але, як правило, лише під час первинного зараження M. pneumoniae. Тому визначення IgM є найбільш показовим значенням у дітей дошкільного віку. Позитивність IgM рідко повідомляється під час реінфекції. Якщо під час реінфекції відбувається збільшення антитіл IgM, ця позитивність може зберігатися протягом тривалого часу, і така довготривала знахідка не корелює з клінічним станом пацієнта. Антитіла IgG з'являються через 2 - 3 тижні після підвищення рівня IgM під час первинної інфекції, підвищення швидше відбувається при реінфекції. Поширеність антитіл IgG проти Mycoplasma pneumoniae значно вища у маленьких дітей (віком до 5 років), ніж поширеність антитіл IgG проти Chlamydia pneumoniae. Антитіла IgA є найкращим показником активної інфекції - завдяки їх швидкому зростанню та найкоротшому періоду напіввиведення порівняно з IgG та IgM. Після подолання інфекції позитивність антитіл IgA залишається найкоротшою, позитивність антитіл IgG може зберігатися від місяців до років.

Висновок

На закінчення слід сказати, що правильна діагностика та раннє лікування хламідійних та мікоплазмових інфекцій є відносно складним процесом, який починається з ретельного збору відповідного матеріалу, продовжується з правильного вибору методу обстеження та правильної інтерпретації результатів. Інфекції, викликані описаними мікроорганізмами, класифікуються як так звані атипові, які можуть призвести до порушення імунітету і можуть вразити практично будь-який орган. Успішне лікування вимагає доброї співпраці не тільки між пацієнтом та лікарем, а й діагностиком у лабораторії.