Термін в пробірці Це термін на латині, що означає у склі. Застосовується тому, що в перших біологічних експериментах, в яких культури тканин проводились поза живими організмами, з яких вони походили, їх проводили у скляних ємностях, таких як пробірки, балони або чашки Петрі.
В даний час термін в пробірці Позначає будь-яку біологічну процедуру, яка проводиться поза організмом, в якому вона зазвичай має місце, щоб відрізнити її від експерименту у природніх умовах де тканина залишається в живому організмі, в якому вона зазвичай знаходиться.
Розмовно називають немовлят, зачатих за допомогою ЕКО ви п'єте пробірку, маючи на увазі скляні або пластикові контейнери, які називаються пробірками, які часто використовуються в хімічних та біологічних лабораторіях.
Однак запліднення в пробірці воно здійснюється в плоских тарілках, які називаються чашками Петрі; найчастіше використовувані чашки Петрі виготовляються з пластику, проте назва ЕКО все ще зберігається.
Показання до запліднення in vitro
Спочатку ЕКО було розроблено для подолання ситуацій безпліддя через проблеми в маткових трубах, але згодом було помічено, що методика також була успішною в інших випадках безпліддя.
Введення внутрішньоцитоплазматична ін’єкція сперми (ICSI) значною мірою вирішує проблеми чоловічого безпліддя.
Щоб лікування ЕКО було успішним, необхідно мати здорові ооцити, сперму, яка може запліднювати, і матку, яка може підтримувати вагітність.
Хоча в деяких країнах лікування ЕКО здійснюється соціальними службами охорони здоров’я, ця методика, як правило, застосовується, коли інші варіанти не вдаються, через те, що ЕКО несе великі витрати.
ЕКО також можна застосовувати жінкам у менопаузі, використовуючи донорські ооцити. Це також методика, яку можна розглянути у пацієнтів, які зазнали повної або часткової втрати фертильності внаслідок агресивного лікування проти серйозної патології (наприклад, раку).
Методи запліднення in vitro
Стимуляція яєчників
Екстракорпоральне запліднення починається на третій день менструації і складається з режиму прийому ліків для стимулювання розвитку множинних фолікулів в яєчниках.
У більшості пацієнтів застосовують ін’єкції гонадотропіну (як правило, аналоги ФСГ), з частим контролем рівня естрадіолу та росту фолікулів за допомогою гінекологічного ультразвуку.
Зазвичай це займає 10 днів ін’єкцій. Мимовільну овуляцію під час циклу запобігає використання агоністів GnRH або антагоністів GnRH, які блокують природну появу лютеїнізуючого гормону (ЛГ).
Вилучення яйцеклітин
Коли дозрівання фолікула вважається адекватним, пацієнту вводять хоріонічний гонадотропін людини (? -HCG).
Ця молекула, яка діє як аналог лютеїнізуючого гормону (ЛГ), спричинить овуляцію приблизно через 36 годин після ін’єкції, але процедура видалення відбувається безпосередньо перед цим.
Екстракція ооцитів проводиться трансвагінально, за допомогою голки, керованої ультразвуком, яка проколює стінку піхви для досягнення яєчників.
Ооцити аспіруються через голку, а фолікулярна рідина переноситься в лабораторію ЕКО для ідентифікації яєць. Це абсолютно делікатний процес, екстракція триває близько 20 хвилин і може проводитися під загальним або частковим наркозом.
Запліднення
Потрапляючи в лабораторію, витягнуті ооцити очищаються, вилучаючи клітини, які їх оточують, і готуючи до запліднення. Одночасно сперма готується до запліднення, усуваючи неактивні клітини та насінну рідину.
Якщо сперма походить від донора, вона, ймовірно, була підготовлена до заморожування та карантину, а при розмороженні вона буде готова до використання.
Сперма та ооцити інкубуються разом (у співвідношенні приблизно 75000: 1) у культуральному середовищі протягом приблизно 18 годин.
На той час запліднення мало відбутися, а запліднений ооцит повинен показати два пронуклеуси.
Коли кількість сперми низька, один сперматозоїд вводиться безпосередньо в ооцит, використовуючи внутрішньоцитоплазматична ін’єкція сперми (ICSI).
Запліднене яйце переносять у спеціальне живильне середовище і витримують близько 48 годин, поки воно не досягне 6-8 клітинної стадії.
Культура ембріонів
Після запліднення яйцеклітини та отримання зиготи її культивують, щоб сприяти її поділу та росту клітин для створення ембріона.
Ця культура триває від 2 до 5 днів, і дуже важливо, щоб її проводили в оптимальних для ембріона умовах, оскільки від її якості та швидкості імплантації це залежатиме при її перенесенні в матку.
Щоб ріст зародка відбувався в найкращих можливих умовах, використовуються різні типи культурального середовища:
Прості засоби: простий склад і простий у приготуванні. Вони оптимальні для початкового росту ембріона (до 3 днів культури). Зазвичай ембріони культивують протягом 3 днів до імплантації, після чого вони досягають стадії 6-8 клітин.
Це дозволяє ембріологу контролювати швидкість поділу клітин та активацію генів, переконатися, що ембріон життєздатний і що він буде правильно імплантований.
Момент імплантації буде просунутий, як правило, після двох днів посіву, коли у пари, яка перебуває ЕКО, мало ембріонів для перенесення або коли зародки розвиваються повільно.
Складні носії інформації: його склад складніший, включає вітаміни, амінокислоти, метали, сироватку. Вони є найбільш придатними для вирощування ембріона з 3 по 5 день. Після п’яти днів культури ембріон досягає стадії бластоцисти, в якій він складається з 12-16 клітин і має високу швидкість імплантації. Зазвичай їх культивують до цієї стадії, коли раніше у пацієнта були аборти або збої в імплантації.
Послідовні ЗМІ: взяти до уваги той факт, що ембріон проходить через різні середовища від моменту запліднення у матковій трубі до досягнення матки.
Послідовні середовища складаються з трьох типів середовищ: середовища для підготовки гамет, іншого для розвитку до дня 3 і третього для досягнення фази бластоцисти.
Крім цього, дуже важливо також контролювати умови температури, світла та рН.
Відбір
Лабораторії, що спеціалізуються на ЕКО, розробили бальні методи для оцінки якості ооцитів та ембріонів. Зазвичай фахівці досліджують симетрію зародка, структурну цілісність його клітин та загальний ріст через два-п’ять днів після запліднення.
Зараз вчені починають аналізувати не тільки ембріон, але і середовище, в якому він росте. Деякі центри використовують хімічний аналіз та математичні формули для створення "метаболічного відбитка пальця" здорового ембріона, який можна використовувати як барометр для оцінки потенціалу виживання ембріона.
Інші намагаються проаналізувати білки, що секретуються ембріонами, і виміряти кількість споживаного кисню, що є загальною ознакою росту. [1]
Зазвичай ембріони, які досягли 6-8 клітинної стадії, переносяться через 3 дні після екстракції.
Однак іноді ембріони зберігаються в культурі протягом більш тривалого періоду (близько 6 днів), і перенесення відбувається на стадії бластоцисти, особливо якщо спостерігається багато якісних 3-денних ембріонів.
Перенесення стадії бластоцисти демонструє кращі показники вагітності.
Перенесення ембріонів
Ембріони оцінюються ембріологом залежно від кількості клітин, співвідношення росту та ступеня фрагментації. Зазвичай для поліпшення шансів на імплантацію та вагітність одночасно переносять кілька ембріонів.
Кількість переданих ембріонів залежить від доступної кількості, віку жінки, діагностичних міркувань та законодавчих обмежень (у деяких країнах максимальна кількість обмежена двома-трьома).
Ембріони, які вважаються «кращими», переносяться в матку жінки за допомогою дуже тонкого пластичного катетера, який вводиться через піхву та шийку матки та контролюється за допомогою ультразвукової візуалізації.
Показники успіху
У США рівень народжуваності за допомогою ЕКО становить близько 27% за цикл (при 33% випадків вагітності), але шанси на успіх сильно різняться залежно від віку жінки (або, точніше, віку використовуваних ооцитів ).
Коли використовуються власні (а не донорські) ооцити жінки, для жінок у віці до 35 років рівень вагітності становить близько 43% за цикл (36,5% живонароджених), тоді як для жінок старше 40 показник різко падає до лише 4% для жінок старше 42 років.
Інші фактори, що визначають рівень успіху, включають якість ооцитів і сперми, здоров’я матки та досвід клініки.
Зазвичай кілька ембріонів переносяться одночасно, щоб поліпшити рівень успіху, що має протилежність ризику багатоплідної вагітності.
Нещодавня методика полягає у зануренні ембріона в поживну культуру на 5 днів, поки він не досягне стадії бластоцисти. Потім лікарі визначають, які ембріони мають найбільшу ймовірність розвитку. Люди кращої якості переносяться в матку жінки.
Таким чином можна поліпшити рівень вагітності без збільшення ризику багатоплідної вагітності. Це відносно нова техніка і знаходиться на етапі експериментів.
Клініки з програмами ЕКО зазвичай публікують показники вагітності. Однак важко провести порівняння між клініками, оскільки результати є наслідком багатьох змінних. Крім того, результати також багато в чому залежать від типу обраних пацієнтів.
Є багато причин, чому вагітність може бути недосягнутою після лікування ЕКО та перенесення ембріонів, зокрема:
- Можливо, час овуляції було неправильно витлумачено, або його не можна передбачити, або воно може не відбутися.
- Спроби отримати ооцити, що розвиваються під час контрольованого циклу, можуть бути безуспішними.
- Отримані ооцити можуть бути ненормальними або пошкодженими під час екстракції.
- Адекватна проба сперми може бути недоступною.
- Запліднення ооцитів для утворення ембріонів може не відбутися.
- Поділ клітин запліднених ооцитів може не відбутися.
- Зародок може не розвиватися нормально.
- Імплантація може не відбутися.
- Несправності обладнання, зараження чи помилки людини або інші непередбачувані та неконтрольовані фактори, які можуть призвести до втрати або пошкодження ооцитів, зразка сперми або ембріонів [3]
За даними шведського дослідження 2005 року, опублікованого в оксфордському журналі "Репродукція людини", 166 жінок пройшли спостереження за місяць до початку циклів ЕКО, і результати не показали значної кореляції між результатами ЕКО та стресом.
Дослідження завершилось рекомендацією клінікам, що, інформуючи пацієнтів про ЕКО про результати дослідження, можливо, можна зменшити стрес, що виникає під час протоколу лікування.
Хоча, можливо, психологічний стрес, пережитий під час циклу, може не вплинути на результат ЕКО, не виключено, що досвід ЕКО може призвести до стресу, який збільшує шанси на депресію.
Лише фінансові наслідки ЕКО (якщо використовується приватна клініка) можуть викликати занепокоєння і бути приголомшливими.
Однак для багатьох пар альтернативою є безпліддя, а сам досвід безпліддя також може спричинити стрес та депресію.
Ускладнення
Найбільшим ускладненням ЕКО є ризик багатоплідної вагітності. Це безпосередньо пов’язано з практикою передачі кількох ембріонів для збільшення рівня вагітності. Багатоплідна вагітність пов’язана з підвищеним ризиком викидня, акушерських ускладнень, передчасних пологів та захворюваності новонароджених з можливістю довгострокової шкоди.
У багатьох країнах існують суворі обмеження щодо максимальної кількості ембріонів, які можна перенести, щоб зменшити ризик багатоплідної вагітності (триплетів або більше).
Спонтанний поділ зародка може також відбуватися в матці (як при традиційній вагітності), але це рідкісний випадок, коли народжуються однояйцеві близнюки. Подвійне сліпе рандомізоване клінічне дослідження супроводжувало вагітність після ЕКО, в результаті якої 73 дитини (33 хлопчики та 40 дівчаток) дійшло до висновку, що 8,7% одиноких дітей та 54,2% близнюків мали вагу при народженні
- Підпишіться на розсилку
