йохімбін

  • Резюме
  • Вступ
  • Матеріали і методи
  • Тварини
  • Вимірювання ВЧТ у щурів
  • Внутрішньосудинна канюляція та вимірювання артеріального тиску.
  • Тести поведінки у щурів.
  • Статистика
  • Результати
  • Вплив силденафілу на нервово-стимульовані еректильні реакції
  • Вплив йохімбіну на нервово-стимульовані еректильні реакції
  • Вплив комбінацій силденафілу/йохімбіну на стимульовані нервами еректильні відповіді
  • Вплив комбінації силденафілу, йохімбіну та силденафілу/йохімбіну на параметри шлюбної поведінки
  • Вплив на SAP
  • Обговорення

Резюме

Вступ

На сексуальну поведінку та еректильну функцію впливають емоційні та когнітивні функції. На рівні центральної нервової системи гіпоталамічна та лімбічна системи відповідають за центральні еректогенні сигнали, що полегшують роботу спинного мозку, що призводить до ерекції через периферичні вегетативні нерви. 1 Сучасні стратегії фармакологічного лікування еректильної дисфункції (ЕД) сприяють застосуванню пероральних препаратів, включаючи інгібітори PDE5, фентоламін, йохімбін, L-аргінін тощо. 1, 2

Введення сильденафілу цитрату (Viagra Pfizer Inc., Нью-Йорк, Нью-Йорк, США) у 1998 р. Стало проривом у покращенні еректильної функції та забезпечило успішний статевий акт у чоловіків з ЕД із поширеного спектру. 3, 4 Йохімбін - це індольний алкалоїд, чия афродизіачна активність може бути опосередкована комбінацією ефектів центральної нервової системи та периферичних ефектів, включаючи блокування пре- та постсинаптичних α2-адренергічних рецепторів. 5,6,7-плацебо-контрольовані дослідження свідчать про ефективність йохімбіну в лікуванні ЕД через слабку психогенну або органічну етіологію, однак результат його застосування був, однак, невтішним. 8

З моменту появи силденафілу спостерігається пожвавлення інтересу до еректильної дисфункції та збільшення кількості пацієнтів із цим захворюванням. 9 Однак кілька досліджень показали, що введення силденафілу не може призвести до достатньої жорсткості для задовільного статевого акту у 11-22% пацієнтів з психогенами та 36-65% з органічною ЕД. 10, 11 Комбінована лікарська терапія представляється привабливою для лікування пацієнтів з ЕД, у яких монотерапія силденафілом не вдалася. Тому поєднання препарату центральної дії йохімбіну з периферичним кондиціонером силденафілом може бути привабливим підходом. Отже, це дослідження було покликане дослідити вплив йохімбіну на сприяння силденафілу сприянню централізовано та периферично опосередкованому еректильному процесу у самців щурів.

Матеріали і методи

Тварини

Експерименти проводили на самцях щурів-альбіносів вагою 200-350 г (приблизно від 4 до 6 місяців) та самках щурів-альбіносів вагою 150-200 г. Усі тварини, яких використовували, вирощувались у будинку для тварин фармацевтичного факультету згідно з керівництвом NIH, утримувались у постійних умовах навколишнього середовища, дієтами, що годували пшеницею або хлібом, змоченим у молоці. Воду дозволяли довільно .

Вимірювання ВЧТ у щурів

Були проведені експерименти з вимірювання змін внутрішньокавернозного тиску (ICP), викликаних електричною стимуляцією кавернозного нерва (CN) у анестезованих щурів, згідно з методом, описаним Giuliani et al. 12 самців щурів знеболювали шляхом внутрішньоочеревинної ін’єкції тіопенталу (50 мг кг -1), потім вирізали шкіру, що перекривала пеніс, і знімали крайню плоть для оголення кавернозних тіл. Голку калібру 26, заповнену гепаринізованим сольовим розчином, обережно вводили в кавернозне тіло з одного боку для вимірювання ВЧД. Голка була герметично закрита 20-сантиметровою поліетиленовою трубкою, заповненою гепаринізованим сольовим розчином, підключеною до датчика тиску Гульда-Стетхема (Окснард, Каліфорнія, США). ICP відображали на поліграфі Grass (Model 7D, Grass Inst. Co., MA, USA).

Внутрішньосудинна канюляція та вимірювання артеріального тиску.

Вимірювання артеріального тиску та частоти серцевих скорочень у щурів проводили, як описано раніше Tseng et al. 14 На шкірі паху зробили приблизно 1 см розріз і перерізали підлягаючі м’язи, потім оголили стегнову артерію та вену та звільнили від підлеглих м’язів. За допомогою тонких ножиць або вигнутої на 90 ° голки в артерії було зроблено невеликий розріз поблизу закритої прив’язки, через яку вводили 20-сантиметровий поліетиленовий катетер, наповнений гепаринізованим сольовим розчином. Артеріальний катетер був підключений до датчика тиску, і артеріальний тиск відображався на поліграфі трави.

Тести поведінки у щурів.

Тести на копулятивну поведінку на щурах проводили, як описано раніше Бутчером та співавт. 15 Самців і самок щурів утримували при кімнатній температурі за 1 тиждень до початку експериментального періоду, по три-чотири в клітці. Всі експерименти проводили між 1100 та 1500 годинами в звукозаглушеному приміщенні. 16 Статеву активність щурів оцінювали після чотирьох тестів відбору на спаровування із сприйнятливими самками. Після скринінгових випробувань тварин допускали до експериментальної сесії, якщо вони демонстрували принаймні одну еякуляцію за тест. 17 Нормальний спосіб статевого акту у самців щурів характеризується такою послідовністю поведінки: (1) кріплення самки з подальшим вторгненням пеніса тривалістю приблизно 1/3 с, (2) відведення пеніса та демонтаж, і (3 ) короткий інтервал відпочинку приблизно 40-60 с. Ця послідовність повторюється кілька разів, поки не відбудеться еякуляція з кінцевим вторгненням серії. Еякуляція була ідентифікована за допомогою енергійної молочниці та більш тривалого періоду вторгнення, і завжди супроводжувався періодом відпочинку (інтервал після еякуляції (PEI)) 10-15 хв. п’ятнадцять

Еструс індукували в жіночому подразнику комбінованим лікуванням естрогеном та прогестероном. За сорок вісім годин до тестування жінкам вводили підшкірно 60 мкг кг -1 естрадіолу бензоату, а потім 1 мг кг -1 прогестерону за 4 год до періоду спостереження. Після 10-хвилинного періоду адаптації в оглядовій клітці сприйнятлива самка була представлена ​​самцю, обережно опустивши її в клітку. Безпосереднім спостереженням було зафіксовано такі поведінкові параметри:

Затримка кріплення (ML): час від введення самки до появи першого кріплення;

затримка вторгнення (ІЛ): час від впровадження самки до появи першого вторгнення;

затримка еякуляції (EL): час від першого вторгнення до еякуляції;

PEI: час від еякуляції до подальшого вторгнення;

частота вторгнення (ІФ): кількість вторгнень, які передують еякуляції;

частота еякуляції (EF): кількість еякуляцій за один сеанс; Y

інтеркопуляційний інтервал (ICI): середній інтервал між послідовними вторгненнями (EL/IF).

Тестові заняття тривали 30 хв. Кожна тварина чоловічої статі служила своїм контролем. Кожного щура використовували лише двічі, один раз як контроль, а другий (принаймні через 48 год) під час лікування. Препарат, комбінацію або носій (фізіологічний розчин) вводили внутрішньочеревно за 1 год до сеансу тесту. Час між двома періодами (контрольним та лікувальним) повинен становити щонайменше 48 годин.

Статистика

Значення виражали як середнє значення ± sem. Для парного аналізу даних використовували t-тест Стьюдента. Для багаторазового порівняння був проведений односторонній дисперсійний аналіз (тест ANOVA або F), а потім Даннет або посттест Стьюдента-Ньюмена-Кілса. Критерій статистичної значущості встановлений на рівні 0,05. У рукописі "n" вказує кількість щурів.

Результати

Вплив силденафілу на нервово-стимульовані еректильні реакції

Цей набір експериментів розпочався із 3–5 стимуляцій CN на різних частотах, щоб вибрати відповідну частоту, яка призведе до субмаксимального збільшення ВЧД. Субмаксимальна частота (зазвичай від 1 до 6 Гц) повторювалася двічі; отримано відтворювану відповідь. Потім досліджуваний препарат вводили внутрішньовенно і реєстрували кавернозні реакції на стимуляцію CN протягом 5 хвилин після введення препарату (рис. 1). Силденафіл викликав посилення нейрогенної еректильної відповіді при всіх концентраціях, що застосовувались, при значних рівнях, що досягались при концентраціях 10 мкмоль кг -1. Електрична стимуляція CN дала значення ICP/SAP 0,413 ± 0,075 мм рт. Ст. У присутності 1 ммоль кг -1 сильденафілу порівняно з 0,095 ± 0,016 мм рт. Ст. ) .

Репрезентативний слід, що демонструє вплив внутрішньовенного введення силденафілу на внутрішньокавернозні зміни тиску та середній системний артеріальний тиск, пов’язаний з ерекцією пеніса, стимульованою кавернозними нервами, у анестезованих щурів.

Повнорозмірне зображення

Вплив внутрішньовенного введення силденафілу (1 мкмоль кг -1 до 1 ммоль кг -1) на еректильну реакцію на електричну стимуляцію кавернозного нерва, 1 хв ( до ) і 5 хв ( b ) після ін’єкції. Результати виражаються як середнє значення ± сім з восьми експериментів. * Позначає значну різницю порівняно з контролем на рівні P -1 до 1 ммоль кг -1) не суттєво збільшив ICP/SAP порівняно з контрольними значеннями ні через 1 хвилину, ні через 5 хвилин після ін'єкції iv, n = 7 ( Малюнок 3).

Вплив в/в йохімбіну (0,1 мкмоль кг -1 до 1 ммоль кг -1) на еректильну реакцію на електричну стимуляцію кавернозного нерва, 1 хв ( до ) і 5 хв ( b ) після ін’єкції. Результати виражаються як середнє значення ± сім з семи експериментів. ВЧД: внутрішньокавернозний тиск; iv, внутрішньовенно; SAP, системний артеріальний тиск.

Повнорозмірне зображення

Вплив комбінацій силденафілу/йохімбіну на стимульовані нервами еректильні відповіді

Збільшення ICP у відповідь на електростимуляцію CN було зафіксовано до і після в/в ін'єкції комбінацій йохімбіну 1 мкмоль кг -1 із збільшенням доз силденафілу (1 мкмоль кг -1 до 1 ммоль кг -1). Ефект від усіх випробуваних комбінацій був значно більшим, ніж ефект від одного лише йохімбіну. Через одну хвилину після внутрішньовенного введення відсоток посилення ICP/SAP, викликаний комбінацією 10 мкмоль кг -1 силденафілу та 1 мкмоль кг -1 йохімбіну, був значно більшим, ніж ефект лише силденафілу та загальної суми алгебраїки окремих ефектів, що вказує на синергетичну дію. Подібна дія спостерігалась і при комбінації вищих доз (1 ммоль кг -1 силденафілу та 1 мкмоль кг -1 йохімбіну) через 5 хвилин після ін’єкції, n = 7 (рис.4).

Вплив йохімбіну (1 мкмоль кг -1) на різні параметри копуляції у щурів-самців. Значення виражаються як середнє значення ± сім з восьми експериментів. Щурам вводили препарат внутрішньочеревно з препаратом за 1 год до 30-хвилинної експериментальної сесії. * Позначає значну різницю порівняно з контролем на рівні Р

Вплив силденафілу (10 мкмоль кг -1) на різні параметри копуляції у самців щурів. Значення виражаються як середнє значення ± сім з восьми експериментів. Щурам вводили препарат внутрішньочеревно з препаратом за 1 год до 30-хвилинного експериментального сеансу. * Позначає значну різницю порівняно з контролем на рівні Р

Ефект йохімбіну на еректильну функцію, як видається, головним чином централізовано опосередкований, оскільки в цьому дослідженні його гостра інтраперитонеальна ін'єкція зменшила затримки монтажу та еякуляції, ICI та PEI, що відображає збільшення сексуальної мотивації. Ці результати узгоджуються з попередніми дослідженнями на тваринах, які показали, що препарат має помітний позитивний вплив на сексуальну діяльність. 29, 30, 31 Йохімбін, як повідомляється, сприяє статевому збудженню, впливаючи на α 2 адренергічні рецептори в центральній нервовій системі. 2, 32, 33 Цікаво, що йохімбін може стимулювати рецептори серотоніну в головному мозку, 32 а також повідомляється, що посилена серотонінергічна передача стимулює секрецію окситоцину в крові самців щурів, що, в свою чергу, покращує сексуальну поведінку та ерекцію. 34 Крім того, було висловлено припущення, що дофамінергічна система може бути остаточним шляхом вираження поведінки, спричиненої йохімбіном. 35

У подібній спробі вивчити ефект поєднання йохімбіну з кондиціонером NO, Lebret et al. 42 продемонстрували, що введення 3,25 г попередника NO L-аргініну та 6 мг йохімбіну, введених за 1–2 години до запланованого статевого акту, за потребою значно покращувало еректильну функцію у пацієнтів з легкою та середньою еректильною дисфункцією. Результати поточного дослідження, які ще мають бути клінічно доведеними, демонструють, що комбінація силденафілу та йохімбіну для лікування ЕД може бути корисною.

Зроблено висновок, що йохімбін може посилити та продовжити дію силденафілу на еректильний процес у щурів, не викликаючи супутньої гіпотензії. Силденафіл може посилити центральний вплив йохімбіну на ерекцію: можливий сприятливий ефект комбінації був більш вираженим у центральному компоненті (сексуальна поведінка), ніж у периферичному компоненті еректильного процесу. Силденафіл посилює вплив йохімбіну на ефективність копулятивної функції чоловіків, але не на сексуальну мотивацію чоловіків. Отже, використання менших доз силденафілу в поєднанні з йохімбіном може представляти потенційну перевагу при лікуванні випадків ЕД, які не реагують лише на силденафіл.