Моніторинг кишкових паразитозів у дітей із сегрегованого поселення та їх діагностика

Анотація:

У період 2013 - 2019 років ми проводили моніторинг наявності кишкових паразитів у дітей у сегрегованому поселенні ромів у місті Медзев. Ми дослідили загалом 434 зразки калу у дітей, розділених за віком на 5 груп. Зразки передавались в дитячу амбулаторію в Медзеві під час профілактичного огляду або, на прохання педіатра, при підозрі на паразитарну інфекцію. Ми підтвердили яйця гельмінтів A. lumbricoides (50,9%), T. trichiura (16,6%), E. vermicularis (10,5%), Taenia spp. (0,2%), Hymenolepis nana (0,5%); ми виявили у найпростіших цисти Giardia duodenalis (13,4%) та антиген криптоспорідії (4,4%). Найбільша кількість позитивних зразків була в групі 6-9-річних дітей. Цей документ узагальнює інформацію про методології, що використовуються в нашому Інституті, який досліджував зразки, такі як основні копрологічні методи діагностики та спеціальні методи - ІФА та гніздова ПЛР для виявлення антитіл, антигенів, генотипів або видів окремих паразитів.

кишкових

Ключові слова: ендопаразити, діти, методи, найпростіші, гельмінти

* Усі таблиці, графіки та малюнки, які є частиною статті, можна знайти у вкладеному PDF-файлі в кінці дослідження.

Вступ

Кишкові паразитарні інфекції можна розділити на найпростіші інфекції та гельмінтози. Ascaris lumbricoides - один із важливих видів кишкових паразитів, що вражає людей у ​​всьому світі,
Trichuris trichiura, Ancylostoma duodenale, Necator americanus, Strongyloides stercoralis. Велику групу складають також гельмінти тварин з можливою передачею людям, де вони належать
Toxocara spp., Baylisascaris spp., Сімейство Ancylostomatidae, Strongyloides spp., Trichuris spp. і інші. Найважливішими протозойними кишковими зоонозними умовно-патогенними мікроорганізмами у людини є Giardia duodenalis та Cryptosporidium spp. (1). Існує велика поширеність паразитів у маргіналізованих групах (сегреговані поселення ромів), головним чином завдяки належним умовам для поширення цих паразитів.

Матеріал

Роми в Медзеві живуть у відокремленому поселенні, де особиста та комунальна гігієна знаходиться на низькому рівні. Сюди ми включили 434 зразки калу дітей, розділених за віком на 5 груп (діти віком до 1 року, група 1 - 5 років, 6 - 9 років, 10 - 14 років, 15 - 18 років). Усі діти перебувають на обліку у педіатра в медичному центрі в Медзеві. Зразки стільця досліджували в Інституті паразитології UVLF в Кошицях.

Методологія

Усі зразки стільця у дітей досліджували флотаційними методами (з використанням розчину Козака Магрова та Фауста) на предмет виявлення кіст, ооцист найпростіших та яєць гельмінтів. Мікроскопічно
позитивні зразки використовували для генотипування збірки G. duodenalis. Подальша молекулярна ідентифікація базувалася на мультилокусному секвенуванні генів tpi, bg та gdh (2). Для діагностики криптоспорідійних ооцист ми використовували метод фарбування Кінюна або Ціля та Нельсена; тест ELISA був використаний для виявлення антигену криптоспоридії. Для діагностики Enterobius vermicularis використовували перианальний клей. Культивуючи метод на агарових пластинах Кога (KAP), ми можемо сконцентрувати рабдитиформну та ниткоподібну личинки Strongyloides stercoralis. Ми використовували комерційний тест Strongyloides IgG ELISA для виявлення специфічних антитіл IgG проти Strongyloides stercoralis у дитячій сироватці.

Результати

Ми підтвердили широкий спектр гельмінтів у дітей із сегрегованого поселення ромів; ми виявили яйця A. lumbricoides у 50,9% проб (221 +/434), T. trichiura у 16,6% проб (72 +/434), E. vermicularis у 10,5% (17 +/162), Taenia spp. у 0,2% (1 +/434), Hymenolepis nana у 0,5% зразків (2 +/434). З найпростіших ми підтвердили цисти Giardia duodenalis у 13,4% (58 +/434) та криптоспорідійний антиген у випорожненнях дітей у 4,4% зразків (19 +/434). Досліджені зразки сироватки у дітей підтвердили якісні докази специфічних антитіл IgG проти Strongyloides stercoralis (3). Зразки стільця були KAP негативними щодо личинок S. stercoralis. За допомогою вкладеної ПЛР ми підтвердили збірки A, B Giardia duodenalis (4) у дітей. Загалом, найбільша кількість позитивних зразків була у групі 6-9-річних дітей. Дуже часто були змішані інфекції.

Обговорення та висновок

Ізольовані громади є найбільш вразливою групою населення, де інфекція варіюється в залежності від соціально-економічного стану, водопостачання, наявності каналізації та гігієнічних звичок людей, що проживають у цих сегрегованих громадах, а також готовності співпрацювати з педіатрами, соціальними робітників та вчителів. Паразитоз може вплинути на розумовий та фізичний ріст дитини (неправильне харчування, анемія, втрата ваги, діарея). Крім того, в даний час не існує звичайного контролю над цими паразитами у дітей. Ми хотіли вказати на методи, які можуть бути включені в планові дослідження людського калу в лабораторіях, що покращить діагностику паразитозу.

Подяки: Ця публікація створена завдяки підтримці наукового грантового агентства VEGA №. 1/0536/18.
Конфлікт інтересів: Автори заявляють, що у них немає конфлікту інтересів.

ЛІТЕРАТУРА
1. Сяо Л. Молекулярна епідеміологія криптоспоридіозу: оновлення. Експериментальна паразитологія 2010; 124: 80-89.
2. Cacciò SM, Beck R, Lalle M, et al. Багатолокусне генотипування Giardia duodenalis виявляє вражаючі відмінності між комплексами A та B. Міжнародний журнал з паразитології 2008; 38: 1523 1531.
3. Štrkolcová G, Goldová M, Gajdošová K. Виникнення Strongyloides stercoralis у дітей у східній Словаччині. Педіатрія (Братислава) 2017; 12 (5): 225-229.
4. Štrkolcová G, Goldová M, Maďarská M, et al. Giardia duodenalis та Giardia enterica у дітей: перші докази зв’язків A та B у Східній Словаччині. Дослідження паразитології 2016; 115: 1939-1944.