предметів

реферат

Головний

Підвищений рівень розчинного Axl (sAxl) у поєднанні з лігандом рецептора Axl, Gas6, був виявлений при цирозі печінки та призначений як діагностичний засіб. 20, 21, 22 Нещодавно ми повідомляли, що sAx1 є точним біомаркером для прогресуючого фіброзу, цирозу та гепатоцелюлярної карциноми (HCC), який має AUC 0,918 для виявлення розвиненого підтвердженого біопсією фіброзу (F> 3) та AUC 0,935 для виявлення F4 у порівнянні зі здоровим контролем. У цьому дослідженні ми переоцінили sAxl як біомаркер фіброзу печінки порівняно з аналізами ELF ™ та TE, використовуючи біопсію печінки як еталонний метод у когорті аналізу та валідації.

результат

Навчання населення

Включено 392 пацієнта (середній вік: 50, 8 років; чоловіки: 55%). З них 361 пацієнт мав хронічну хворобу печінки, тобто НАЖХП, вірусний гепатит (хронічний гепатит В або С), аутоімунний гепатит (АІГ), холестатичну хворобу печінки (ХЛЛ, первинний склерозуючий холангіт [ПСК] та первинний біліарний холангіт [ПБК]). або синдром перекриття, ALD, медикаментозне пошкодження печінки (DILI) та криптогенний цироз (таблиця 1). Тестову когорту, яка складалася з 276 пацієнтів із хронічними захворюваннями печінки та 31 здорового контролю (Віденський медичний університет), порівнювали з групою перевірки (Медичний університет Граца) з 85 пацієнтів. Ці дві групи суттєво не відрізнялись щодо віку, статі та розподілу ІМТ. Жоден із пацієнтів не мав тяжкої серцевої недостатності. Хронічна хвороба нирок (ХБН) була у 4,1% пацієнтів (15/361). Жоден із пацієнтів не страждав на ХХН (4 або 5). Детальні характеристики пацієнта наведені в таблиці 1.

Стіл в натуральну величину

Гістопатологічні результати були доступні у 311 з 392 учасників дослідження. F2, F3 та F4 були у 20,9% (n = 65), 10,3% (n = 32) та 20,3% (n = 63) пацієнтів (табл. 2а). Відповідно до методів візуалізації, цироз був у 16,6% (n = 65) пацієнтів (Таблиця 1) (підтверджена біопсія печінки у 63/65, відсутність біопсії печінки у 2/65, відсутність цирозу у 327 пацієнтів). Розподіл ступенів фіброзу між різними етіологіями захворювань печінки, визначений біопсією печінки, наведено в таблиці 2b. Усі результати тестів на функцію печінки наведені в таблиці 2c.

Стіл в натуральну величину

Стіл в натуральну величину

Стіл в натуральну величину

Рівні SAxl залежать від стадії фіброзу печінки

Рівні SAxl відповідно до етіології захворювань печінки наведені в таблиці 3. Рівні sAxl у пацієнтів з AIH/CLD були значно вищими у групі валідації. Це пояснювалося значно вищими рівнями sAxl, виявленими у пацієнтів з РВС, що було обумовлено відбором підбору через малий обсяг вибірки, оскільки лише 4 пацієнти з когорти валідації були порівняні з 13 пацієнтами у досліджуваній групі. Загальний рівень sAxl збільшувався залежно від стадії фіброзу (рис. 1). Рівні SAxl були значно вищими у пацієнтів з F4 порівняно з F0 до F3 (медіана sAxl: 71, 6, інтерквартильний діапазон (IQR) [53, 91; 94, 73] проти 43, 4, IQR [35, 52; 55, 71 ]), а також у пацієнтів з цирозом, як показано у порівнянні з пацієнтами без цирозу, а також зі здоровими контролями (медіана sAxl: 72, 06, IQR [54, 06; 9, 01] проти 43, 3, IQR [35, 85; 55, 54] проти 40, 2 IQR [34, 2; 48, 0] (рис. 1). Ці дані разом показують, що рівень sAxl не суттєво змінювався на ранніх стадіях фіброзу печінки (F0-F3), тоді як sAxl сильно підвищений при цирозі печінки (F4) порівняно з розвиненим фіброзом (F3).

Стіл в натуральну величину

сироватковий

рівні sAxl у сироватці крові відповідно до стадії фіброзу, а також наявності цирозу печінки на основі методів візуалізації. Статистично значущі відмінності виражаються зірочками: *** P 2, F> 3 і F4 порівняно з хворими, а цироз був 0, 737, 0, 749, 0, 801 та 0, 807 (табл. 4). Розрахунок співвідношення sAxl/альбумін збільшив AUC до 0, 783, 0, 766, 0, 826 та 0, 831 (таблиця 4, додаткова фігура 1). Співвідношення sAxl/альбумін залежно від ступеня фіброзу та цирозу показано на малюнках 2a та d.

Стіл в натуральну величину

Рівні sAxl/альбуміну в сироватці крові, рівні ELF ™ у сироватці крові та результати фіброскану, стратифіковані біопсією печінки ( a - c ), а також стратифікований наявністю цирозу на основі результатів візуалізаційних тестів ( d - f ). Статистично значущі відмінності виражаються у вигляді зірочок: *** P 3, F4 та цироз у порівнянні з ELF ™ (рисунок 3, таблиця 4), а також TE (таблиця 4). Коефіцієнти кореляції Спірмена sAxl із співвідношенням sAxl/альбумін, ELF та TE становили 0,969 (P

Порівняння діагностичної точності, що відображається як площа під кривою (AUC) тесту sAxl/альбумін та ELF для значного фіброзу (F ≥ 2; ( a ) розвинутий фіброз (F ≥ 3; ( b ) фіброз 4 ступеня (F4; ( c ) та цироз печінки, як показано ( d )

Повнорозмірне зображення

Співвідношення sAxl і sAxl/альбумін не залежить від статі та ІМТ

Співвідношення sAxl та sAxl/альбумін не залежало від статі (середнє значення sAxl [IQR]: чоловік проти жінки: 46, 1 [37, 7; 58, 1] проти 43, 82 [35, 48; 61, 15], P = 0,518; медіана sAxl/альбумін [IQR]: 1,0 [0,83 1,32] проти 1,0 [0,80; 1,50], Р = 0,683). Крім того, співвідношення sAxl та sAxl/альбумін не залежало від категорії ІМТ. Загалом 35,7% (n = 140/392) пацієнтів мали нормальну вагу (ІМТ 23, 25, а також розвинений фіброз печінки та цироз печінки. У цьому дослідженні ми зосередились на дослідженні діагностичної точності sAxl як біомаркеру для значного та розширений фіброз печінки у цьому дослідженні підтвердили sAxl як точний біомаркер цирозу печінки, і його діагностичну точність можна додатково підвищити, розрахувавши співвідношення sAxl/альбумін AUC 0, 826 для діагностики F4. 1, 29, чутливість 77, 8 та специфічності 78, 5. Зокрема, sAxl та sAxl/альбумінраціо не залежали від статі та ІМТ.

Axl є членом підродини TAM (Tyro3, ​​Axl, Mer) рецепторних тирозинкіназ і, як відомо, бере участь у розвитку раку та опосередковує хіміорезистентність. Окрім впливу на виживання клітин, проліферацію, міграцію та ангіогенез, Axl також відіграє роль у видаленні апоптотичних клітин, агрегації тромбоцитів та регулюванні вироблення прозапальних цитокінів. 27, 28 Після протеолітичного розщеплення позаклітинний домен Axl виділяється в кров, що називається розчинним Axl (sAxl). Встановлено, що він підвищений у сироватці крові або плазмі при декількох захворюваннях, таких як аневризма аорти, серцева недостатність, захворювання периферичних артерій, ХХН, системний червоний вовчак, ревматоїдний артрит та гестоз. 30, 31, 32, 33, 34, 35 Крім того, наша група показала, що sAxl переважно виділяється печінковими міофібробластами, які, як правило, пов'язані з прогресуванням фіброзу печінки. Ці висновки узгоджувались із недавнім дослідженням, яке показало, що Axl бере участь у прогресуванні фіброзу печінки на моделі миші, що нокаутує Axl, демонструючи, що сигналізація Axl через специфічний арешт росту необхідна для активації зоряних клітин печінки. 20

Це перше дослідження для порівняння діагностичної точності sAxl як неінвазивного біомаркеру фіброзу печінки з тестом ELF-TE. Останні два є найбільш інтенсивно оцінюваними неінвазивними тестами на фіброз печінки і комерціалізовані. Результати нашого дослідження добре відповідають попереднім повідомленням про діагностичну точність тесту ELF-TE. 2, 6, 8 Однак обидва тести мають недолік високих витрат. Крім того, ТЕ має обмеження щодо застосовності, оскільки надійні результати не можуть бути отримані у 15,8% пацієнтів, головним чином через ожиріння, наявність асциту або менший досвід оператора. 8, 36, 37 З цієї причини 14,4% тестів TE в нашій групі повинні були бути виключені з аналізу.

На відміну від цього, sAx1 є стабільним сироватковим маркером, який можна легко виміряти за допомогою імуноферментного аналізу (ІФА) за низькою вартістю. Нещодавно ми зафіксували точність діагностики за допомогою AUC 0,918 (межа 53, 89 нг/мл) для виявлення F ≥ 3 та AUC 0,935 (межа 54, 0 нг/мл) для виявлення F4 у плазмі. 190 пацієнтів із хронічними захворюваннями печінки порівняно зі здоровими контролерами. У нашому дослідженні ми включили 360 пацієнтів з хронічними захворюваннями печінки, а також 31 здоровий контроль і зосередили увагу на розрізненні значущого та поширеного фіброзу або цирозу із нижчих стадій фіброзу або здорового стану. Таким чином, при виявленні пацієнтів з F4 sAxl досяг AUC 0,801 (граничний показник 52, 98 нг/мл). Точність діагностики була збільшена до AUC 0,826 (граничний показник 1,29) для виявлення F4 (еталонний метод біопсії печінки) та AUC 0,832 (граничний показник 1,29) для виявлення цирозу печінки (показ еталонного методу) шляхом додавання загальної кількості сироватковий альбумін в модель. Використовуючи одне і те ж граничне значення 1,29, AUC для виявлення значного фіброзу (F> 2), поширеного фіброзу (F> 3) та F4 становила 0, 763, 0, 766 та 0, 826. При граничному значенні 1, 29, PPV та NPV для виявлення F4 становили 46, 2 відповідно. 93,9%, таким чином надійно виключаючи наявність F4.

У цьому контексті ми повинні взяти до уваги, що використання біопсії печінки як еталонного методу, хоча і є золотим стандартом, може автоматично призвести до недооцінки неінвазивних біомаркерів (AUC 39, 40

Крім того, було показано, що етіологія захворювань печінки є головним фактором, що впливає на показники неінвазивних маркерів фіброзу. Зокрема, щодо холестатичних захворювань печінки, таких як PBC та PSC, дані щодо неінвазивної оцінки фіброзу обмежені. Крім того, класичні гістологічні бальні системи, такі як системи Людвіга, фіброз можуть бути частково вирішені на 3 та 4 стадіях (посилання 42, 43). У нашому дослідженні співвідношення sAxl/альбумін продемонструвало невідповідні рівні граничних показників у когорті хворих на AIH/CLD/Overlap із граничним значенням 3,66 для ≥F3, але граничним значенням 1,6 для діагнозу F4, який може відображати зміщення обсягу вибірки, оскільки лише 4 пацієнти цієї групи були класифіковані як F3 в гістології печінки.

Нарешті, співвідношення sAxl/альбумін є точним маркером розвитку фіброзу та цирозу печінки при НАЖХП та вірусному гепатиті. Завдяки простоті використання та низькій вартості, він підходить як скринінговий параметр для значно прогресуючого фіброзу та цирозу печінки, особливо коли ТЕ недоступний або не може бути використаний. Діагностичну точність sAxl при AIH та холестатичній хворобі печінки слід підтвердити у різних когортах пацієнтів.

Матеріали і методи

Навчання населення

Комерціалізовані тести на фіброз печінки

Аналіз ELF вимірювали у сироватці крові на системі імунного аналізу ADVIA Centaur згідно з протоколом виробника (Siemens Healthcare Diagnostics Inc., NY, США). ТЕ з використанням Fibroscan® (Echosens, Париж, Франція) проводили натщесерце та відповідно до інструкцій виробника. Результати, що показують 23, 38

Статистичний аналіз

Кількісні змінні виражали як медіану з інтерквартильним діапазоном (IQR) та порівнювали за U-тестами Манна-Уітні. Якісні змінні були описані з використанням абсолютних та відносних частот та порівняні з використанням точних тестів Хі-Квадрат або Фішера. Порівняння більш ніж двох груп проводили за допомогою тесту Крускала Уолліса. Коефіцієнт кореляції Спірмена був використаний для оцінки кореляції між усіма використовуваними неінвазивними тестами. Точність sAxl була визначена AUC для прогнозування (1) значного фіброзу (≥F2), (2) прогресуючого фіброзу (≥F3), 3) F4 та (4) цирозу печінки, як показано (A) одним маркером та в комбінація з (C) вмістом сироваткового альбуміну (мг/дл; виражається як співвідношення sAxl/альбумін). Індекс Юдена був розрахований для визначення оптимальних граничних значень. Крім того, були розраховані чутливість, специфічність, PPV та NPV. Значення Р