У природі утворюються мікроорганізми змішані популяції з іншими типами мікроорганізмів. Тому культури цих сумішей називаються змішані культури. Однак знання мікроорганізмів досягається вивченням ізольованих штамів, культивованих в лабораторії в Росії чисті культури (або аксонічний). Іноді молекулярне дослідження призводить до характеристики мікроорганізмів навіть у змішаних популяціях. Однак ідентифікація бактерій та повна характеристика можливі лише після виділення бактерій та отримання чистих культур. Тому першою проблемою при вивченні бактерії є її ізоляція від решти присутніх мікроорганізмів (у патологічній пробі, воді, ґрунті, їжі тощо). Після досягнення ізоляції можна отримати цікаві бактерії чисте вирощування.

вступ

1.Ізоляція

Це відокремлення певного мікроорганізму від решти мікроорганізмів, які його супроводжують. Найпоширенішим методом є посівний ряд на відповідному твердому культуральному середовищі, поміщеному в чашку Петрі.

Для цього відбирають невелику кількість зразка платиновою петлею і розподіляють по поверхні живильного середовища. Бактеріальні клітини відокремлюються та знерухомлюються на середовищі. Після інкубації у відповідних умовах кожен життєздатна клітина походить a Передмістя видимий результат послідовних поділів клітин. Кожна колонія бактерій має певні характеристики з точки зору своєї форми, межі, висоти, розміру, консистенції тощо. Типи бактерій, присутні в вихідній пробі, видно як різні типи колоній. З достатньо відокремлених колоній можна отримати чисту культуру кожного з видів бактерій, наявних у вихідній пробі...

Успіх ізоляції, розділення на культуральному середовищі залежить від поверхні, на якій розподілено зразок. Дуже важливо зробити якомога більше розтяжок. На перших смугах з’являться зливні колонії або суцільна маса мікроорганізмів. Колонії, відокремлені одна від одної, повинні з'являтися в останніх смугах. Ізоляція вимагає низького стартового посіву. Послідовне зменшення чисельності популяції на петлі (шляхом викиду на живильне середовище), коли вона проходить через культуральне середовище, повинно забезпечити, щоб нарешті деякі клітини були достатньо відокремлені (ізольовані одна від одної) на поверхні.

Критерії диференціації колоній

Зовнішній вигляд колоній, їх забарвлення, розміри тощо. Вони дозволяють диференціювати різні бактерії, хоча на їх загальні властивості сильно впливають умови культури, тому дуже загальний опис наведено нижче. Колонії можуть бути непрозорими, напівпрозорими або прозорими. Деякі виробляють флуоресцентні пігменти при освітленні ультрафіолетом. Інші з’являються з порошкоподібною поверхнею, інші - гладкі або шорсткі або мають концентричні кільця. Іноді запах теж характерний

вид профілю колоній бактерій на TSA

Колонія в Серратія: слизовий вигляд, починає пігментуватися в центральній частині

2. Отримання чистих культур

Це передбачає отримання культури одного мікробного типу в культуральному середовищі, наприклад, у похилій пробірці поживного агару. Для цього з відокремленої колонії ізольовано отримують невелику кількість бактеріальної маси. За допомогою нього інокулюють нове живильне середовище, роблячи смуги близько. Інкубація за належних умов забезпечить чисту культуру. Процес можна повторити для кожного типу колоній. Буде отримана колекція чистих, окремих культур мікроорганізмів, які співіснували у вихідній пробі

.Бажано провести другу ізоляцію перед тим, як приступити до отримання чистої культури. Якщо всі колонії на другій тарілці однакові, одну з них можна використовувати для встановлення чистої культури. Після того, як культура стане чистою, зручно перевіряти її чистоту за допомогою плями Грама. Чисті культури мікроорганізмів зберігаються в лабораторії пересіву (перехід від одного культурального середовища до іншого) послідовний. Одна з копій може бути ліофілізована для консервації