Пульсуюча секреція фолікулостимулюючого гормону (ФСГ) у допубертатних самок овець із обмеженням їжі та без неї

S. E. RECABARREN, Biol., M.Sc .; А. ЛОБОС, М.В., Маг.С .; О. ПОБЛЕТЕ, М.В.; P. MUÑOZ, J. PARILO, Ing. Agr. Лабораторія фізіології та ендокринології тварин факультету ветеринарної медицини,
Університет Консепсьона, кампус Чілан

* Фінансується проектом FONDECYT 1990389.

РЕЗЮМЕ

Ключові слова: ФСГ, вівці, статеве дозрівання, обмеження їжі.

Ключові слова: ФСГ, ягнята, статеве дозрівання, обмеження їжі.

ВСТУП

Метою даної роботи було визначити особливості добової пульсаційної секреції ФСГ у вівцематок перед пубертатом з обмеженим годуванням протягом 6 - 10 тижнів та порівняти їх із секрецією ФСГ, виставленої у вівцематок без обмеження їжі того ж віку.

МАТЕРІАЛ І МЕТОДИ

Дослідження пульсаційності ФСГ. Дослідження пульсаційності ФСГ складалося із забору зразків крові (3 мл) через раніше імплантований яремний катетер з інтервалом у 10 хвилин протягом 5 годин (10: 00-15: 00 годин) у 20, 26 та 30 тижнів віку, після 0,6 та 10 тижнів обмеження їжі експериментальної групи. Зразки крові депонували в гепаринізовані пробірки (10 МО гепарину/мл крові), їх центрифугували при 1000 х г, протягом 15 хвилин, плазму відокремлювали і заморожували при 20 ° С до подальшого аналізу концентрацій ФСГ у плазмі радіоімуноаналізом (RIA).

Радіоімуноаналіз ФСГ. Радіоімунологічний аналіз FSH проводили з матеріалами NIADDK (США) за протоколом, зазначеним разом із матеріалами. Коротко кажучи, 200 мкл стандартного овечого ФСГ (oFSHRP) в діапазоні від 0,02 до 25,6 нг/пробірку або 200 мкл невідомої проби інкубували зі 100 мкл йодованого ФСГ (oFSH I-1 AFP 5679 C) і 100 мкл антисироватки. проти овечого ФСГ (AFP C 5228113) протягом 24 годин при кімнатній температурі. Потім додавали 100 мкл другого антитіла і інкубацію продовжували протягом 48 годин. Потім пробірки центрифугували при 1000 х g протягом 40 хв при 4 ° C, супернатант відкидали і гранулу кількісно визначали в гамма-спектрометрі LKB. Мінімальна виявляється концентрація, що відповідає 90% контрольного буфера, становила 0,2 нг/мл, з коефіцієнтом варіації коефіцієнта внутрішнього аналізу 6% та міжаналізом 10%.

Визначення характеристик пульсуючої секреції ФСГ. Концентрації ФСГ у плазмі кожної вівці аналізували індивідуально за допомогою комп'ютерної програми CLUSTER, розробленої Veldhuis та Johnson (1986). Ця програма дозволяє ідентифікувати за допомогою повторюваного алгоритму гормональні коливання, визначені як імпульси в послідовній серії проб, використовуючи коефіцієнт варіації RIA, частоту дискретизації, визначену форму імпульсу, призначену оператором ( використання 1 або більше балів для піку і одного або більше балів для надиру), а також статистичні різниці між балами. Програма також визначає середню амплітуду імпульсів, інтервал між імпульсами, тривалість імпульсів і надір (середнє значення плазмових концентрацій між імпульсами). Для ідентифікації імпульсів FSH була обрана форма імпульсу 3x3 для визначення максимуму та мінімуму відповідно за допомогою t-тесту 2,75 (Veldhuis and Johnson, 1986). При цій процедурі ймовірність ідентифікації хибнопозитивного імпульсу становила менше 5%.

Статистичний аналіз. Параметри пульсуючої секреції ФСГ: середнє поперечний переріз періоду (нг/мл/5 год), частота імпульсів (кількість імпульсів/5 год), амплітуда імпульсів (нг/мл) та надір (нг/мл) присутні на 20, 26 і 30 тижнях аналізувались в тій самій групі за допомогою дисперсійного аналізу для повторних зразків у дизайні блоків із порівнянням середніх показників із тестом Ньюмана Келса за допомогою статистичної програми GB.Stat v.6. Дані відображаються як середнє значення ± стандартна помилка. Вважалось Р 0,05). З іншого боку, у вівцематок, яким було обмежено харчування, спостерігалася тенденція до зменшення у віці від 20 до 30 тижнів після 10 тижнів обмеження. Середня концентрація ФСГ у плазмі (нг/мл/5 год) у групі експериментальних вівцематок була нижчою більш ніж на 50% порівняно з плазмовою концентрацією ФСГ контрольних вівцематок (Р> 0,05).

Як показано в таблиці 1, частота імпульсів FSH не представляла статистичних відмінностей між віком в тій самій групі або між групами. Амплітуда імпульсів FSH, як правило, зростала у віці від 20 до 30 тижнів у контрольній групі, зменшуючись більше ніж на 50% у вівцематок з обмеженим годуванням у віці від 20 до 30 тижнів (P> 0,05). Амплітуда імпульсів, як правило, була нижчою у вівцематок з обмеженням їжі, ніж у контрольної групи у віці 30 тижнів (Р = 0,079), після 10 тижнів обмеження їжі.

Надір зменшився на 50% після 10 тижнів обмеження їжі у вівцематок із обмеженням їжі, але без статистичної значущості між віком або між двома групами вівцематок.

Що стосується профілів плазмових концентрацій ФСГ кожної вівцематки, у контрольних вівцематок у віці 30 тижнів, за винятком однієї вівцематки, спостерігається, що пульсуюча секреція ФСГ була посилена порівняно з 20 і 26 тижнями вік (рисунок 1). Навпаки, у вівцематок з обмеженим вигодовуванням пульсативність секреції ФСГ зменшується порівняно з контрольними вівцематками того ж віку (рисунок 2).

фолікулостимулюючого

ОБГОВОРЕННЯ

Існує постулат, що обмеження їжі затримує настання статевого дозрівання вівцематок, що пов’язано з меншою секрецією GnRH, пов’язаною з меншою секрецією LH. Метою цього дослідження було визначити, чи обмеження дієти також може впливати на секрецію ФСГ, маючи на увазі, що ФСГ, а також ЛГ секретуються з гіпофіза у відповідь на ГнРГ.

Підводячи підсумок, концентрація ФСГ у плазмі не значно зростає у віці 20 - 30 тижнів у вівцематок із нормальним режимом годування, тоді як у вівцематок з обмеженим харчуванням ФСГ у плазмі має тенденцію до зниження. Результати свідчать про те, що обмеження їжі мало б частковий пригнічуючий ефект на секрецію ФСГ, таким чином, що затримка ініціювання естральних циклів у вівцематок з обмеженням їжі була б наслідком інших механізмів, при яких секреція ФСГ не була б порушена. ФСГ, або якби він був, ФСГ не був би визначальним фактором у цьому явищі.

АНОТАЦІЯ

ДЯКУЮ

Автори дякують NIADDK та доктору А. Парлоу за їх щедре забезпечення реагентами для АФІ FSH. Доктору Хосе Коксу за надання нам приміщення для експериментів.

ЛІТЕРАТУРА

БУХЛІК, Р., Н. Р. АДАМС, Г. Б. МАРТІН. 1996. Вплив харчування на баланс виробництва гормонів яєчників та гіпофіза вівцематок. Анім. Грати Наука 45: 59-70. [Посилання]

КАМЕРОН, J. L., T. E. WELTZIN, C. MC CONAHA, D. L. HELMREICH, W. H. KAYE. 1991. Уповільнення пульсуючої секреції лютеїнізуючого гормону у чоловіків після сорока восьми годин голодування. Дж. Клін. Ендокринол. Метаб. 73: 35-41. [Посилання]

I ? ANSON, H., E. H. QUINT, R. I. WOOD, B.C. АНГЛІЯ, Д. Л. ФОСТЕР. 1994. Ось надниркових залоз та гіпогонадотропізм у самок ягняти з обмеженим ростом. Біол. 50: 137-143. [Посилання]

I ? ANSON, H., J. M. MANNING, C. G. HERBOSA, J. PELT, C. R. FRIEDMAN, R. I. WOOD, D. C. BUCHOLTZ, D. L. FOSTER. 2000. Центральне пригнічення секреції гонадотропін-рилізинг-гормону у гіпогонадотропних жіночих овець із обмеженим ростом. Ендокринологія 141: 520-527. [Посилання]

KALRA, S. P., P. S. KALRA, 1996. Харчове безпліддя: Роль взаємопов’язаного гіпоталамічного нейропептиду Y-галанін-опіоїдної мережі. Спереду. Нейроендокринол. 17: 371-401. [Посилання]

ПАДМАНАБХАН, В., Ч. Д. МІЄ, М. БОРОНДІ, Х. І ? ЕНСОН, Р. І. ВУД, Т.Д. ЛАНДЕФЕЛЬД, Д. Л. ФОСТЕР, І. З. БЕЙТІНС. 1992. Циркулюючий біоактивний фолікулостимулюючий гормон та менш кислі фолікулостимулюючі гормони збільшуються під час експериментальної індукції статевого дозрівання у самки ягняти. Ендокринологія 131: 213-220. [Посилання]

POLKOWSKA J, Y. LERRANT, M. WANKOWSKA, A. WOJCIK-GLADYSZ, A. STARZEC, R. COUNIS. 2003. Вплив обмеження дієтичного білка на секрецію ЛГ та ФСГ у самок ягнят до пубертату. Анім. Грати Наука 76: 53-66. [Посилання]

RECABARREN, S. E., A. URRUCELQUI, M. ROBBIANO, A. LOBOS, P. ORELLANA, J. PARILO. 1995. Вплив внутрішньовенної інфузії L-аргініну та L-орнітину на секрецію гормону росту у овець перед пубертатом. Арх. Мед. Ветеринар. 28: 99-103. [Посилання]

RECABARREN, S. E., A. LOBOS, E., ABALOS C. ARRIAGADA. 1999. Вплив інфузій налоксону на пульсуючу секрецію ЛГ, концентрацію інсуліну та кортизолу у плазмі ягнят, що голодують. Досвід Клін. Ендокринол. Діабет 107 (доповнення 1): S49. Реферат Р-12. [Посилання]

RECABARREN, S. E., A. LOBOS, V. TORRES, R. OYARZO. 2001. Вплив обмеження їжі на секрецію лептину та лютеїнізуючого гормону в овець ягнят. 83-та щорічна зустріч Ендокринного Товариства, Денвер, США. Анотація P3-312. [Посилання]

SCHREIHOFER, D. A., D. B. PARFITT, J. L. CAMERON. 1993. Придушення секреції лютеїнізуючого гормону під час короткочасного голодування у самців резус-мавп: роль метаболічних та стресових сигналів. Ендокринологія 132: 1881-1889. [Посилання]

ШТАЙНЕР, Р. А., Дж. Л. КАМЕРОН, Т. Х. МКНЕЙЛ, Д. К. КЛІФТОН, В. Дж. БРЕММЕР. 1983. Метаболічні сигнали для настання статевого дозрівання. В: Нейроендокринні аспекти розмноження. Видавництво: Р. Л. Норман, с. 183-228, Academic Press, NY. [Посилання]

TJONDRONEGORO, S., G. B. MARTIN, S. R. SUTHERLAND, R. BOUKHLIQ. 1996. Взаємодія між харчуванням, тестостероном та інгібіном у контролі секреції гонадотропіну у зрілих баранів. Грати Родючі. Посл.8: 855-862. [Посилання]

VELDHUIS, J. D., M. L. JOHNSON. 1986. Кластерний аналіз: простий, універсальний та надійний алгоритм виявлення ендокринного імпульсу. Am. J. Physiol. 250: E468-E493. [Посилання]

VIZCARRA, J. A., R. P. WETTEMANN, T. D. BRADEN, A. M. TURZILLO, T. M. NETT. 1997. Вплив частоти пульсу гонадотропін-вивільняючого гормону (GnRH) на концентрацію лютеїнізуючого гормону та фолікулостимулюючого гормону, сироваткових та гіпофізарних рецепторів, рецепторів GnRH та рибонуклеїнової кислоти для субодиниць гонадотропіну у корів. Ендокринологія 138: 594-601. [Посилання]

УЕЙД, Г. Х., Дж. Е. ШНАЙДЕР, Н-Й. LI. 1996. Контроль фертильності за допомогою метаболічних ознак. Am J Physiol. 270: E1-E19. [Посилання]

WELT, C. K. 2002. Фізіологія та патофізіологія інгібіну, активіну та фолістатину в жіночому розмноженні. Curr. Думка. Акушерський. Гінеколь. 14: 317-323. [Посилання]

УАЙЛДТ, Л., А. ХАУСЛЕР, Г. МАРШАЛ, Дж. С. ХАТЧІСОН, Т. М. ПЛАНТ, П. Е. БЕЛЬЧЕТ, Е. КНОБІЛ. 1981. Частота та амплітуда стимуляції вивільнення гонадотропіну та секреції гонадотропіну у резус-мавпи. Ендокринологія 109: 376-385. [Посилання]

Весь вміст цього журналу, крім випадків, коли він ідентифікований, підпадає під ліцензію Creative Commons