ІНТЕГРОВАНИЙ АНАЛІЗ ПОМИЛКИ ЕМБРІОНАРНОЇ ІМПЛАНТАЦІЇ

У циклі позаплідного запліднення (ЕКО) рівень вагітності становить близько 60%. Загальновизнано, що це залежить від адекватного обміну сигналами між ембріоном та ендометрієм. Іноді навіть з ембріонами оптимальної якості не вдається досягти успішної імплантації через фактори, що перешкоджають гніздуванню.

Невдачі імплантації ембріонів визначаються як випадки, коли було здійснено перенесення 4-6 ембріонів належної якості за 2 або 3 процедури ЕКО без досягнення вагітності.

Протокол ЕНДОМІЧНА є багатофакторним дослідженням, яке розглядає ймовірні причини порушення імплантації ембріонів, аналізуючи їх із комплексним баченням, яке доповнює клінічну поведінку в умовах патології.

ЕНДОМИЧНЕ 1 ДОСЛІДЖЕННЯ ІНФЕКТОЛОГІЧНОГО ФАКТОРА

Вивчення основ

В даний час, за підрахунками, безпліддя вражає приблизно 15% пар у всьому світі. Загалом, проблеми з фертильністю пов’язані з причиною, пов’язаною з репродуктивним здоров’ям жінок або якістю сперми у чоловіків, для яких існують різні методи лікування. Однак, хоча за останні роки методи діагностики безпліддя надзвичайно вдосконалились, у всьому світі існує 15-30% пар, які не знають походження свого безпліддя. У даному випадку ми говоримо про ідіопатичне, незрозуміле чи незрозуміле безпліддя, оскільки неможливо визначити походження цієї репродуктивної проблеми.

Тому вивчення присутності збудників інфекційних захворювань стало важливою стратегією визначення, чи існує в складних випадках ідіопатичного безпліддя інфекційний фактор, що спричиняє проблеми безпліддя, що перешкоджає правильному досягненню вагітності. Завершивши вичерпне дослідження нашої групи з виявлення патогенних мікроорганізмів, ми прагнемо виявити ці інфекції та боротися з ними до тих методів фертильності, яким піддаватимуться пацієнтки, щоб вони не могли негативно впливати на правильний розвиток вагітності.

Методологія

Починаючи із зразків ендоцервікального ексудату, ексудату уретри, сперми або першої порожнистої фракції, а також за допомогою використання звичайних методів qPCR та ПЛР, цей тест дозволяє виявити найпоширеніші патогени, що викликають інфекції в репродуктивній системі жінки та чоловіка. Ці агенти:

  • Chlamydia trachomatis
  • Mycoplasma hominis
  • Ureaplasma urealyticum
  • Вірус простого герпесу (ВПГ-1, ВПГ-2)
  • Вірус папіломи людини (ВПЛ)
  • Герпесвірус 6 типу A (HHV-6A)

відмова

ЕНДОМІЧНА 2 ТРАНСКРІПТОМІЧНА В ІМПЛАНТАТНОМ вікні

Вивчення основ

Імплантація ембріонів - це унікальне біологічне явище, завдяки якому ембріон у стані бластоцисти приєднується до ендометрія матері та інвазує його, утворюючи плаценту, яка забезпечить взаємодію між зростаючим плодом та материнським кровообігом. Цей процес відбувається під час секреторної фази менструального циклу, у певний проміжок часу, який називається вікно імплантації, де сприйнятливість ендометрія є оптимальною. Цей стан оптимальної сприйнятливості відбувається між днями 20 і 21 циклу, через сім днів після сплеску ЛГ. Ембріон здатний прилипати до ендометрію лише протягом цього короткого періоду часу, тому успіх імплантації залежить як від якості ембріона, так і від сприйнятливості ендометрія, впливаючи на мінливість будь-якого з цих двох факторів до правильної одне досягнення вагітності.

Численні дослідження показали, що нездатність ендометрію встановити рецептивний фенотип є дуже поширеною причиною ідіопатичного безпліддя, навіть при використанні допоміжних репродуктивних методів, коли вибрані ембріони мають високу якість. Отже, наявність інструменту, що дозволяє визначити, коли у жінки відкрито вікно імплантації, є важливою стратегією збільшення шансів на успішну вагітність.

Методологія

Завдяки вилученню РНК з біопсії ендометрію та за допомогою технології ПЛР у режимі реального часу, цей інструмент здатний аналізувати профіль експресії генів 48 генів, пов'язаних з такими аспектами, як сприйнятливість ендометрія та імунна відповідь. стан сприйнятливості аналізованого зразка. У більшості випадків момент найбільшої сприйнятливості тканини ендометрія настає через 5 з половиною днів (Р + 5,5) після першого прийому прогестерону в заміщеному циклі, тому біопсію рекомендується брати саме в цю дату.

Аналіз результатів

Аналіз профілю експресії гена ендометрію дасть 3 можливі результати:

Ендометрій сприйнятливий: відповідає ендометрію, який досяг вікна імплантації, тому рекомендується здійснювати перенесення ембріонів у циклі з подібними характеристиками, що розроблені для проведення біопсії ендометрія.

Передрецептивний ендометрій: відповідає ендометрію, який ще не досягнув вікна імплантації, тому рекомендується повторна біопсія або персональна передача, що проводиться з додатковими 24-годинним просоченням прогестероном у циклі з подібними характеристиками, що розроблені в оціненому циклі.

Ендометрій після рецепції: Це відповідає ендометрію, який закрив вікно імплантації, тому рекомендується повторна біопсія або персональний перенос, що проводиться з додатковими 24-годинним просоченням прогестероном у циклі з подібними характеристиками, що розроблені в оцінюваному циклі.

ЕНДОМІКА 3. ВИВЧЕННЯ ЕНДОМЕТРІАЛЬНО-СИСТЕМНИХ ІМУНОЛОГІЧНИХ ФАКТОРІВ

Вивчення основ

Незважаючи на те, що безпліддя вважається багатофакторним репродуктивним розладом, в даний час значна частина репродуктивних проблем, що виникають під час гінекологічних консультацій, зумовлена ​​дисбалансом на імунному рівні. імунна система Це ключовий фактор досягнення та збереження вагітності, тому будь-які зміни імунного статусу можуть призвести до проблем безпліддя різного роду на різних етапах вагітності, таких як невдалі імплантації або повторні викидні.

У цьому імунологічному контексті ендометрій, будучи однією з найважливіших материнських тканин під час репродуктивного процесу. Щоб вагітність настала і переносила належний термін, необхідно, щоб ендометрій зазнав численних змін як морфологічно, так і в своєму клітинному складі. В цьому останньому аспекті зміна, яку зазнає ця тканина в складі своїх імунних клітин, має велике значення, щоб, по-перше, забезпечити правильну імплантацію ембріона в материнську матку, а пізніше, щоб забезпечити правильний розвиток і ріст плід.

Під час вікна імплантації ембріонів в ендометрій відбувається постійний потік імунних клітин, де 70% утворюються клітинами природних кілерів (NK), 20% - макрофагами та дендритними клітинами, а 10% - Т-лімфоцитами, що є більшістю меншості В лімфоцити. Найбільш поширеним типом клітин у процесі імплантації є той, який утворюється NK-клітинами, називаючись клітинами Матковий або децидуальний NK (dNK) . Під час підготовки ендометрію протягом усього менструального циклу децидуальні NK-клітини змінюють свою функцію, щоб підготувати тканину до ймовірної імплантації. Замість того, щоб діяти як цитотоксичні та прозапальні, клітини dNK сприяють побудові та реконструкції тканини та утворенню нових судин з метою реваскуляризації ендометрію, створюючи в ендометрії відповідне середовище для досягнення успішної вагітності.

Через важливу роль, яку імунні клітини відіграють під час вагітності, будь-який дисбаланс у цих субпопуляціях клітин може призвести до численних репродуктивних проблем, оскільки все більше досліджень пов'язує зміни рівня цих клітин із випадками ідіопатичного безпліддя, імплантації ембріонів, повторних абортів та інші патології під час вагітності. З усіх цих причин вивчення імунного статусу жінки є важливим інструментом для з’ясування, чи є проблеми її безпліддя внаслідок будь-яких змін в її імунній системі, що перешкоджають досягненню та правильному розвитку вагітності, і в такому випадку допомагають виправити це.

Методологія

Для проведення цього дослідження необхідно мати зразок крові та біопсію ендометрія, в якій за допомогою проточної цитометрії буде проводитися імунофенотипування різних клітинних популяцій за допомогою панелі моноклональних антитіл, безпосередньо кон'югованих з різними флуорохромами.

Аналіз результатів

Після імунофенотипування різних типів клітин, згаданих вище, пацієнту буде наданий детальний результат підрахунку кожної з цих імунологічних популяцій клітин, а також наявність аутоантитіл, які можуть спричиняти аутоімунне розлад, повідомляючи, чи є якісь дисбаланс на цьому рівні, що створює несприятливе імунне середовище для правильної імплантації ембріона і, отже, досягнення вагітності.

ЕНДОМИЧНЕ 5. ВИВЧЕННЯ НУТРИГЕНЕТИЧНИХ ФАКТОРІВ, ПОВ'ЯЗАНІ З ПЛОДІВНІСТЮ

Вивчення основ

Одним з головних факторів навколишнього середовища, які змінюють і впливають на наші гени, є харчування. нутригенетика вивчає взаємозв'язок між генами та дієтою, з метою досягнення оптимального стану здоров'я за допомогою дієти. Харчування та спосіб життя є тригерами для проблем із фертильністю. Таким чином, дослідження в галузі епігенетики роблять висновок, що діти батьків, що страждають ожирінням, можуть успадкувати схильність до надмірної ваги, а також схильність страждати на захворювання та порушення обміну речовин.

Цей вплив на навколишнє середовище важливий не тільки для генетики дитини, але й впливає на якість гамет, як це спостерігається у випадках, коли надмірне вживання жирних продуктів негативно позначається на кількості та рухливості сперми. Надмірна вага у жінок також представляє ризик, оскільки ускладнює вагітність, оскільки жирова тканина виконує ендокринну функцію, яка негативно впливає на певні процеси в організмі, викликаючи хронічне запалення, що впливає на згортання крові та серцево-судинну систему, необхідну в матці жінки для розвитку ембріонів.

З усіх цих причин правильне харчування стає ключовим фактором досягнення успішної вагітності, тому рекомендації щодо харчування є важливими як для пар, які прагнуть завагітніти природним шляхом, так і для тих, хто проходить лікування безпліддя.

Методологія

Цей нутригенетичний аналіз дозволяє вивчити генетичні варіанти кожного пацієнта, щоб визначити, який план харчування є найбільш підходящим для досягнення оптимального стану фертильності. Варіанти, включені в дослідження, були пов'язані з конкретними харчовими потребами та чутливістю до певних компонентів дієти.

У цьому генетичному тесті проводиться аналіз ДНК, виділеної із зразків крові або слини, з метою вивчення індивідуальних генетичних варіацій у 107 генетичних варіантах 75 локусів шляхом генотипування. Цей генотипування виконується за допомогою ДНК-мікрочіпу на платформі, що забезпечує оптимальний генетичний аналіз, поєднуючи переваги точної хімії розширення праймерів з мас-спектрометрією MALDI-TOF. Різні маси кожного з генерованих продуктів ПЛР перетворюються на інформацію про генотип, забезпечуючи високу пропускну здатність зразків та високу точність аналізу.

Аналіз результатів

Після результату генотипування буде розроблений план дій згідно з виявленими варіантами, що встановлює індивідуальні харчові рекомендації для кожного пацієнта, яким вдається поліпшити свої проблеми з фертильністю і, отже, збільшити шанси на вагітність.