(Випадок первинної міксосаркоми матки з генералізованими метастазами у кроликів. Звіт про патологічний випадок

Резюме. Автори описали випадок первинної міксосаркоми матки у 4-річної тушки самок кроликів із надмірною вагою сірого кольору, виявлену під час патологічного дослідження. Злоякісна мезенхімальна пухлина розвинулася з лівої матки і зробила паратуморальне одиночне метастазування в широкій зв’язці матки, віддалені множинні метастази у вісцеральній очеревині та легенях. Гістопатологічне дослідження як первинних, так і вторинних пухлин показало посилений неоангіогенез, спричинений пухлиною, великі крововиливи та некроз. У ожирілого кролика спостерігались важкі патологічні некробіотичні жирові печінки, атрофія та ліпоматоз підшлункової залози, а також ліпонекроз у сальнику. Первинна та вторинна пухлини демонстрували позитивність до виментину та негативність до панцитокератину, α-SMA-, клаудіну-5. Індекс маркування Ki-67 демонстрував 18%. Автори припустили, що причинами розповсюдженої внутрішньосудинної коагулопатії у кроликів були великі крововиливи, некроз пухлин, індукований пухлиною ліпонекроз сальника та кетоз.)

Міксосаркома або міксоїдна саркома - це злоякісна пухлина мезенхімального походження, що характеризується наявністю недиференційованих плеоморфних фібробластів та значним утворенням позаклітинного муцину (муцину). Гістопатологічними особливостями пухлини є клітини сполучної тканини пухлини зіркоподібної та веретеноподібної форми, вбудовані в багату слизом строму, утворюючи пухку клітинну мережу і характеризуються помірним і помірним ядерним поліморфізмом (анізонуклеоз) та помірною мітотичною активністю (22, 24, 25).

У кроликів повідомляється про шкірну міксосаркому шиї, плечей, грудної клітки, живота та задніх кінцівок зі шкіри (25), а також про метастатичну міксосаркому, спричинену онкогенним поксвірусоподібним вірусом (6, 20, 21) та американських порожнинах. у ветеринарній літературі підшкірна міксосаркома поперекового відділу спинного мозку була описана у кроликів (19).

У нашому випадку миксосаркома з матки та метастази в організмі були виявлені за допомогою гістогістологічного та імуногістохімічного дослідження змішаної, сірої, 4-річної, домашньої кролиці нуліпара. На сьогоднішній день у ветеринарній літературі описано один гістологічний тип первинної пухлини матки у кроликів (16).

Матеріал і метод

Медична історія

У вересні 2011 року 4-річною сірою, змішаною самкою кролика її доставили в клініку для домашніх тварин. За словами власника, тварина важко дихала за кілька днів до смерті, не їла та втратила інтерес до свого оточення. Кролиця не була щеплена і не була вагітна протягом усього життя. Його тримали одного в клітці, годували кролячою їжею, луговим сіном, сухим хлібом та овочами.

Труп був доставлений до відділення патології та судово-медичної ветеринарної медицини SZIE-ÁOTK для дослідження.

Патолого-гістологічні дослідження

При посмертному дослідженні відбирали зразки з різних уражень органів туші, які зберігали при кімнатній температурі протягом 24 годин у 8% забуференному (PBS, pH 7,0) розчині формальдегіду. Отримані таким чином зразки тканини були пристосовані для подальшої обробки на машині для підготовки тканин Shandon excesior. Автоматична машина для підготовки тканини, під час своєї 14-годинної програми, після 6-ступінчастого висхідного спиртового ряду (4х1 година, потім 2х1,5 години) та 3-ступінчастого висхідного ксилолового ряду (3х1 год) у 3 кроки (3x80 хвилин) з парафіном 60 ºC (парафіновий віск з гранульованого шандону Гістопласт) забруднив зразки. Підготовка тканини супроводжувалася вкладанням парафіну. Зрізи товщиною 3–4 мкм готували із звичайних парафінових блоків та фарбували гематоксиліном та еозином за допомогою автоматизованої фарбувальної машини Shandon Varistain 24-4. Зрізи аналізували за допомогою світлового мікроскопа Nikon Optiphot-2.

Згодом для імуногістохімічних досліджень зрізи двічі депарафінізували в ксилолі (2x10 хв), потім три рази в спирті (100%, 70% та 50% спирту протягом 3x5 хв), а потім обробляли 1x PBS. прання. Антигени перетравлювались при високій температурі в мікрохвильовій печі (30 хв, 800 Вт), доповненій розчином отримання мішені (DAKO; Glostrup, Данія, pH 6). Ендогенну пероксидазну активність блокували 0,3% H2O2 у метанолі протягом 5 хв. Для наших експериментів були використані наступні антитіла: антивіментин (моноклональне антитіло миші, розведення 1: 200), актин анти-α-гладкої мускулатури - α-SMA (моноклональне антитіло миші, розведення 1: 8000, Sigma, DAKO), антицитокератин AE1- AE3 (моноклональне мишаче антитіло), розведення 1: 100, DAKO), анти-Ki-67 (моноклональне антитіло миші, розведення 1: 100, DAKO) та антиклаудин-5 (мишаче моноклональне антитіло, розведення 1: 100, Zymed Inc.) . Імуногістохімічні реакції візуалізували за допомогою системи імунопероксидази авідин-біотин (набір DAKO LSAB2) та хромогену DAB (діамінобензидин). Контрастне фарбування проводили гемалоуном Майєра. Були підготовлені зрізи негативного контролю з опусканням первинних антитіл.

При оцінці імуногістохімічних реакцій дегу маткову ангіоломіому використовували як зовнішній позитивний контроль для віментину, α-SMA, Ki-67 та клаудіну-5 (7) відповідно. холангіоцелюлярна карцинома з панцитокератину (8). Імуногістохімічні реакції оцінювали за допомогою світлового мікроскопа Nikon Optiphot-2 у 10 випадкових полях зору із великим збільшенням. Виходячи з частки пухлинних клітин, що виявляють позитивну імунну відповідь, застосовували таку бальну систему: 0 (негативна) = 0–5%; 1 = 5-30%; 2 = 30-50%; 3 = Результати

Під час огляду туші кролика ми спостерігали розвиток, який відповідає віку та породі, а також надмірній вазі стану харчування. Видимі слизові були блідішими за норму. У підшкірній сполучній тканині на видоспецифічних ділянках ми накопичили велику кількість білої жирової тканини, що спостерігалося в ліпомоподібній, плоско-округлої, симетричній формі навколо шиї (Фігура 1). У черевній порожнині спостерігалося 15-20 мл червонуватого, рідкого, вільного вмісту. Крапельниця, брижа, широка маткова оболонка та ділянки навколо нирок перепліталися рясною блідо-жовтувато-білою жировою тканиною. У лівій матці в області, близькій до яєчників, спостерігалася сірувато-червона, м'яко-тактильна, драглиста тканинна маса діаметром 3,5–4 см, параметрична діаметром 2 см, діаметром 2 см, рясно переплетена жирова тканина. була подібним вогнищем (Малюнок 2).

міксосаркома

Нерегулярне потовщення желатинової слизової, обмежена попередня опуклість та ознаки кровотечі спостерігалися у відкритій лівій матці, її зміненій ділянці (Малюнок 3). На поверхні сліпої кишки ми побачили тверді вогнища проса, розміром з горошину, сірувато-червоні, також желатинові, тверді (Малюнок 4). У центральній ділянці крапельниці спостерігали драглисту, червонувату, нерівну поверхню, аномального вигляду, аномальне розростання тканин (Малюнок 5). Крім того, атрофія підшлункової залози та інфільтрація жировою тканиною, а також збільшення та дифузна жирова жирова печінка (Малюнок 6). У грудній порожнині спостерігали 6-8 мл скупчення червонуватої рідини, ознаки лущення епікарда та збільшені, темніші від норми темні кольори легеневих часточок.

Формула лівої матки при гістогістологічному дослідженні виявила інфільтративно зростаючі клітини фібробластів пухлини, що утворюють пухку клітинну сітку, зіркоподібну та веретеноподібну, що має ознаки легкого анізокаріозу. Клітини пухлини були вбудовані в рясний блідо-блакитний позаклітинний матрикс (слиз). У мезенхімальних пухлинах велика кількість первинних індукованих мікросудинами пухлин (Малюнок 7) та ознаки екстенсивної кровотечі та коагуляційного некрозу (Малюнок 8). Параметричні вогнища демонстрували зовнішній вигляд тканини, подібний до ураження матки. У зразках, відібраних із тканини пухлинної краплинної інфільтрації, були виявлені гістологічні дані, що відповідають мезенхімальним пухлинам матки, проте вторинний аномальний ангіогенез тут був більш вираженимМалюнок 9), множинний мікротромбоз, наслідком загибель та крововиливи у стаді (Малюнок 10). Значну кількість гетерофільних гранулоцитів було виявлено у просвіті аномальних мікросудин, що утворюються у вторинних (метастатичних) пухлинах. Ознаки екстенсивного ліпонекрозу спостерігалися на ділянках, інфільтрованих крапельною пухлиною (Малюнок 11).

Спостерігали важку некробіотичну жирову дистрофію, що супроводжується загибеллю клітин паренхіми в печінці, атрофією підшлункової залози та ліпоматозом (аномальне переплетення тканин підшлункової залози з жировою тканиною). Гістопатологічне дослідження легенів виявило множинну емболізацію артеріальної пухлини (Малюнок 12), а в дрібних судинах спостерігався множинний мікротромбоз (Малюнок 13). При обстеженні серця виявлено накопичення субепікардіальної жирової тканини та мультифокальну гостру кровотечу. Гістопатологічне дослідження мозку виявило дифузний, легкий набряк кори, мультифокальну нейрональну дистрофію та периваскулярні мікрокровотечі.

У пухлинній імуногістохімії клітини міксосаркоми продемонстрували дифузний, інтенсивний (3) цитоплазматичний позимент віментинуМалюнок 14), α-SMA, панцитокератин і клаудин-5 були негативними. Встановлено, що індекс поширення Ki-67 становить 18%. Внутрішньопухлинні мікросудини виявляли ознаки імунореактивності віментину та клаудіну-5. Показано, що інтактні ліпоцити корисні як внутрішній контроль віментину.

Діагноз, заснований на знахідці: паратуморальний одиночний з лівої матки кролика із ожирінням, поміщений поруч у широку маткову зв’язку, міксосаркома з віддаленим метастазуванням у вісцеральну область очеревини та легенів. У печінці спостерігали дифузне, аномальне некротичне жирове переродження, що супроводжується загибеллю клітин печінки (кетоз кроликів).

Обговорення

Оглянули тушу 4-річного сірого, змішаного самки домашнього кролика. У тварини спостерігали міатосаркому з лівої матки, паратуморальну у зв’язку матки та віддалені метастази у вісцеральну очеревину та легені. Ознаки дисемінованої внутрішньосудинної коагулопатії (ДВЗ-синдром, мікротромбоз) також спостерігались у ожирілої тварини.

ДВЗ - це системний тромбогеморагічний синдром, який завжди є вторинним захворюванням. Клінічно можна виділити його гостру та хронічну форми. Під час ДВЗ-синдрому утворюються мікро- та макротромби, які спричиняють серйозне ураження органів. Тригери ДВЗ можуть бути інфекційного та неінфекційного походження. Останні включають ДВЗ, індукований раковими ураженнями (12). Повідомлялося про ДВЗ-інфекцію (переважно хронічну, компенсовану форму) у людей при великих злоякісних пухлинах (рак легенів, нирок, передміхурової залози, молочної залози та шлунково-кишкового тракту), при цьому гематологічні злоякісні пухлини, пов’язані переважно з гострими промієлоцитарними та мієломоноцитарними лейкозами (1). 3, 18).

У своїх дослідженнях Маруяма та співавт. Виявили ДВЗ у 12,2% з 164 собак із солідними злоякісними новоутвореннями. У 35% випадків гемангойсаркомічної хвороби, у 20% собак карциноми молочної залози, у 10% тварин аденокарциноми легенів та носа, у пацієнтів з плоскоклітинним раком, остеосаркомою, карциномою шлунка, гранульозно-клітинною пухлиною та корою надниркових залоз 5% (13).

У нашому випадку мікротромботизація, що спостерігається переважно в легенях, могла розвинутися при міксосаркомі матки та внаслідок великих кровотеч, некрозу та дифузного ліпонекрозу в ослабленій краплі, спричиненої вторинними пухлинами в її метастатичній популяції. При кровотечах у первинній та вторинній міксосаркомі кролика аденозиндифосфат, що виділяється з еритроцитів і мембранні фосфоліпіди еритроцитів активізують як тромбоцити, так і внутрішньосудинну коагуляцію. Хімічні медіатори, що виділяються з гетерофільних гранулоцитів у зоні мертвої пухлини та жирової тканини, цитокіни (наприклад, інтерлейкін-6, фактор некрозу пухлини-альфа), також можуть мати підвищену сприйнятливість до ДВЗ у ракових кроликів. Більшість пухлин продукують білок, який активізує систему згортання, що призводить до схильності до тромбозів та утилізованої коагулопатії, що є особливістю ДВЗ-інфекції (1, 3, 18). Існує гіпотеза, що в нашому випадку патологічні білки, що продукуються клітинами саркоми у кроликів міксосаркоми матки, також збільшували схильність до ДВЗ.

Nakano et al. Досвідний ДВЗ-синдром, пов’язаний з панкреатитом, кетозом, кетоацидозом у 49-річного чоловіка (14). Петтерсен та співавт. Виявили мікротромбоз тонкої кишки у хворого на кетоз діабетика (15). За відсутності клінічних та лабораторних даних ми можемо лише припустити, що важкий патологічний стеатоз печінки у кроликів із ожирінням був наслідком кетозу і що останній міг збільшити схильність тварини до тромбозу.

Основним питанням у нашому випадку є спонтанна пухлина чи вірусне ураження. В останньому випадку можна припустити октологічну роль вірусу лепоріпокси. Для того, щоб відповісти на питання, ми плануємо подальші дослідження, деякі з яких мають вірусологічний характер (ПЛР) відповідно. електронно-мікроскопічні аналізи.

Автори висловлюють подяку відомому гістотехніку Ренаті Попу за її роботу над гравюрою.