Дегельмінтизуючий ефект метронідазолу та тинідазолу проти Trichomonas muris у хом'яків

Анабель Ернандес 1 *, Магалі Моліна 1, Густаво Моралес 1, Хуліо Гармендія 2 та Зораїда Нава 2

1 Національний інститут сільськогосподарських досліджень. Національний центр сільськогосподарських досліджень. Секція охорони здоров’я тварин. Поштова скринька 70. Маракай 2101. Арагуа. Венесуела. * Електронна адреса: [email protected]

2 Центральний університет Венесуели. Факультет ветеринарних наук. Маракай. Арагуа. Венесуела.

Ключові слова: Метронідазол, тинідазол, хом'як, Trichomonas muris, найпростіші.

Вплив метронідазолу та тинідазолу Trichomonas muris у хом'яків

Ключові слова : Метронідазол, тинідазол, хом'як, Trichomonas muris, найпростіші.

Отримано: 09.05.2007 Прийнято: 10.09.2007

Експерименти з лабораторними тваринами були важливим фактором прогресу та розвитку біомедичних наук, отже, патології, що генеруються різними мікроорганізмами, особливо паразитичного походження, втручаються переважно у надійність результатів дослідження. Безсимптомні захворювання, які можуть виникати у цих живих субстратах, не повинні залишатися непоміченими дослідником, оскільки ці інфекції можуть стимулювати значні метаболічні зміни та несприятливі явища, які призвели б до суттєвої модифікації отриманих результатів та збільшення витрат, тривалості дослідження з часом та ресурсів. всі види, що надаються науковим співтовариством. На додаток до цього додаються витрати, породжені системами запобігання та переселення колоній тварин. Таких ускладнень можна було б уникнути за допомогою профілактики та вибіркового викорінення патогенних організмів у тварини з віварію (Zúñiga та ін., 2001).

Паразитарні інфекції найпростішими, присутніми в колоніях лабораторних хом'яків, представляють складну проблему для боротьби, і їх потрібно вирішити за допомогою застосування та введення найбільш відповідних хіміотерапевтичних засобів. Метронідазол має надзвичайно широкий спектр антипротозойної та антимікробної активності і широко застосовувався у людей та тварин, діючи проти різних найпростіших, анаеробних паразитів та анаеробних бактерій. Механізм дії нітроімідазолів відображається в їх селективній токсичності щодо анаеробних або мікроаерофільних мікроорганізмів та аноксичними та гіпоксичними клітинами (Брантон та ін., 2006). Після перорального прийому метронідазол швидко всмоктується, принаймні на 80% менш ніж за годину. Пероральна біодоступність становить 100% і не змінюється під час прийому їжі. Отримані концентрації в плазмі як при пероральному, так і при парентеральному введенні пропорційні введеним дозам і дають дуже подібні криві концентрації в залежності від часу. Ректальна абсорбція також хороша (Фернандес, 2002).

Що стосується тинідазолу, як і метронідазол, він є похідним нітроімідазолу (Fernández, 2002). Його можна вводити при інфекціях, спричинених трихомонадами, Гіардіоз та амебіаз, інфекції суворо анаеробними організмами і, крім цього застосування, також застосовуються при запаленні ясен (Феррейру та ін., 2001). Тинідазол є протипаразитарним та протимікробним засобом. Він поділяє той самий спектр дії та ефективності з метронідазолом, але корисний період напіввиведення відрізняє їх, оскільки для тинідазолу більше, ніж для метронідазолу. Цей відновлений 5-нітроімідазол спричиняє втрату спіральної структури ДНК паразита при розриві його ланцюгів (Феррейру та ін., 2001). Нітрат тинідазолу пригнічує біосинтез ергостеролу та інших стеринів, запобігаючи деметилюванню ланостеролу. Це пошкоджує стінку і змінює проникність клітинної мембрани, і в результаті відбувається втрата внутрішньоклітинних елементів, необхідних для життя мікроорганізму. Він також пригнічує біосинтез тригліцеридів та фосфоліпідів та активність окислювальних та окислювальних ферментів, накопичуючи токсичні концентрації перекису водню в органелах.

У лабораторних тварин трихомонади можуть заражати найрізноманітніших хазяїв, найчастіше ідентифікованими видами є Т. вексель впливає на щурів та мишей, Т. microti Y T. criceti хом'як, Т. caviae морська свинка та T. muris щур, миша та хом'як (Куба, 1982). Інфекції T. muris Їх можна діагностувати за клінічними ознаками, такими як ентерит та кахексія, у заражених хом'яків та шляхом демонстрації трофозоїту у свіжому вмісті із сліпої кишки або товстої кишки, виділяючи ці дуже характерні різкі або хитливі рухи. У гістопатологічних зразках, приготовлених гематоксиліном та еозином, із сліпої кишки або товстої кишки господарів, можна спостерігати забарвлені структури, такі як ядро ​​або погано забарвлена ​​клітинна стінка паразита, останній здається складеним на собі (Ліпман та ін., 1999).

У всьому світі проводились дослідження дії антипаразитиків на рід трихомонад, серед яких виділяється аналіз, проведений у Канаді, де метронідазол, тинідазол та диметронідазол використовувались для вивчення елімінації трихомонад у лабораторних мишей. Отримані результати показали стійкість до лікування диметронідазолом при збільшенні концентрації препарату та досягли елімінації трихомонад за допомогою 2,5 мг/мл метронідазолу або тинідазолу, що постачаються таким же способом, досягаючи 100% ефективності (Roach та ін., 1988).

Це дослідження описує результати, отримані під час оцінки впливу метронідазолу та тинідазолу на дегельмінтизуючих хом'яків, природним чином заражених Trichomonas muris.

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ

Початковою популяцією, з якої відібрали вибірку для цього дослідження, було 680 золотих хом'яків (Mesocricetus auratus), вирощений в Біотерії з охорони здоров’я тварин Національного центру сільськогосподарських досліджень, що належить Національному інституту сільськогосподарських досліджень, в Маракаї, Арагуа, Венесуела.

Вибірка популяції виявилася позитивною для 30 самців хом'яків Trichomonas muris і 10 негативів віком 2 місяці та середньою масою 100 г, що зберігаються індивідуально протягом експериментів у клітках з нержавіючої сталі, що містять стерильну рисову лушпину як підстилку, їжу ad libitum на основі концентрованої їжі (Ratarina®) та фільтрованої води. Практикувались гігієнічні заходи, такі як: стерилізація кліток, поїлок та ліжка, раз на тиждень вносили зміни на підстилку тварин.

Оцінка ідентифікації найпростіших тварин для встановлення фізіологічного стану, як на початку, так і під час протоколу дослідження, була досягнута шляхом розтину; проби беруть із сліпої кишки та тонкої кишки для мікроскопічного дослідження з використанням сольового розчину для виявлення наявності T. muris, беручи за посилання те, що описано Ліпманом та ін. (1999).

Таблиця 1. Схематичне зображення методів лікування, що використовуються для викорінення Трихомонади ти помер.

метронідазолу

Паразитологічне обстеження

Спочатку проводили мікроскопічне дослідження для визначення інфекції та відбору позитивних тварин Trichomonas muris. Краплю 0,85% сольового розчину поміщали окремо на предметне скло і покривали предметним склом 22 х 22 мм і спостерігали під мікроскопом з 10-кратною, а потім 40-разовою об'єктивом. Діагноз був поставлений шляхом демонстрації трофозоїтів, які дозволили спостерігати характерну рухливість мікроорганізму та кістозну форму, що свідчить про резистентність.

Для визначення відсотка дегельмінтизації використовували напівкількісні зв’язки між групою, яка отримувала метронідазол, та групою, яка отримувала тинідазол, для визначення відсотка елімінації паразитів, що виробляли препарати. Для цього поле зору мікроскопа було розділено на 4 квадранти, кількість паразитів, присутніх в одному з квадрантів, підраховано і помножено на чотири. Підрахунок трихомонад проводили, щоб визначити відсоток дегельмінтизації та порівняти результати, отримані в групах III з метронідазолом та IV з тинідазолом.

РЕЗУЛЬТАТИ І ОБГОВОРЕННЯ

Тест розпочався з введення терапевтичної дози 2,5 мг/мл метронідазолу та тинідазолу III та IV групам відповідно, як показано у Таблиця 2. Дані, отримані після цього дозування, дозволяють визначити, що в жодному із застосовуваних методів лікування не було зменшення навантаження на паразитів. Такий результат контрастує з результатом, про який повідомив Роуч та ін. (1988), який продемонстрував, що використання метронідазолу та тинідазолу, введених у питну воду, у концентрації 2,5 мг/мл, було ефективним для усунення Т. ти помер у лабораторних мишей.

Таблиця 2. Протипаразитарний ефект дегельмінтизації проти T. muris метронідазол та тинідазол у різних концентраціях.

З огляду на це, було застосовано другу обробку із застосуванням більшої дози препарату. Протокол повторювали, змінюючи концентрацію препарату від 2,5 до 3,75 мг/мл. Результати були подібними, оскільки при цій концентрації не спостерігалося зменшення навантаження від паразитів. Знову ж таки, робочий протокол повторювали, збільшуючи концентрацію до 5,0 мг/мл, спостерігаючи повільні та ослаблені рухи паразитів, але без усунення таких для тварин, яким дозували метронідазол. З іншого боку, у хом'яків, які отримували тинідазол, було виявлено стан латентності та нерухомості трофозоїта паразита, але без його усунення. Ще раз протокол роботи був повторений із збільшенням концентрації двох препаратів до 6,25 мг/мл. З тинідазолом спостерігалося зменшення паразитозу на 20%. Однак для метронідазолу зменшення або усунення паразитозу не спостерігалось.

Продовжуючи тест і шукаючи дозу для усунення T. muris Концентрація двох препаратів була змінена до 7,5 мг/мл, введення добового прийому та ще один тест з тією ж концентрацією 7,5 мг/мл, але з двома прийомами на день, один вранці 75 та інший вдень . Відсоток дегельмінтизації був таким: У класичній оцінці спостерігали 40% елімінацію паразитозу у хом'яків, які отримували тинідазол, і 20% у тих, хто отримував метронідазол, як показано в Фігура 1. Однак у тварин, які отримували 2 добові дози ліків, було виявлено повне виведення паразита для тих, хто отримував тинідазол, і лише 50% дегельмінтизацію для групи, яка отримувала метронідазол.

Стійкість до метронідазолу широко вивчалася у трихомонад у лабораторних ізольованих штамах. У Канаді Кадмор та ін. (2004) провели дослідження з лікування інфекцій, викликаних Трихомонада вагінальна стійкий до метронідазолу. Що стосується лікування, пероральне або внутрішньовенне введення було ефективним на 85-95%. Повторне зараження та інші фактори необхідно враховувати, коли лікування не дає результату.

Ці автори також повідомляють, що 5% випадків є наслідком штамів трихомонад, стійких до метронідазолу. Ступінь стійкості до лікарських засобів може бути корисною для оцінки дозування, яке може бути ефективним за рахунок збільшення дози або комбінування декількох препаратів. Обмежена інформація про дію цих препаратів робить сумнівним, чи є ці методи лікування лікувальними чи ні. Мері та ін. (2000) провели дослідження щодо стійкості трихомонад до метронідазолу та описали стійкі штами. Метаболічні механізми резистентності виявлені при культивуванні цих трихомонад як при аеробіозі, так і при анаеробіозі.

Анаеробна стійкість до метронідазолу спостерігається лише при лабораторних дослідженнях штамів Т . вагінальний Y Т. плід піддаються підвищенню концентрації препарату в культурі. На відміну від них, існують штами, які виявляють тип стійкості до метронідазолу, коли їх виділяють та культивують в аеробних умовах.

Ці лікарсько-стійкі штами містять нижчий рівень фередоксину, білка, який каталізує відновлення метронідазолу в цих мікроорганізмах. Той факт, що значення фередоксину зменшуються, але не зникаючи повністю, можливо, пояснює, чому інфекції вищезазначеними штамами, як правило, реагують на більші та довші дози метронідазолу (Брантон та ін до ., 2006).

ВИСНОВКИ ТА РЕКОМЕНДАЦІЇ

Застосування метронідазолу як вибору протипаразитного засобу для елімінації трихомонад у хом'яків було неефективним, оскільки лише отримало 50% зменшення паразитів у концентрації 7,5 мг/мл, вводячи його 2 рази на день протягом 5 днів.

Рекомендується альтернативне лікування із застосуванням тинідазолу протягом періоду менше 7 днів у концентрації 7,5 мг/мл, призначаючи його 2 рази на день протягом п’яти днів.

Невизначення 100% ефективної дози в цій експериментальній моделі для усунення цього паразитозу у природніх умовах дає можливість рекомендувати ці тести обом у природніх умовах Що в пробірці для того, щоб визначити наявність або відсутність опору проти Trichomonas muris під дією азоміцинів (2-нітроімідазол).

Запропоновано продовжити встановлення ряду досліджень, заснованих на заходах, спрямованих на визначення схеми протипаразитарного введення проти Трихомонади ти помер це адекватно та ефективно, залежно від включення та порівняння у зазначених роботах, а саме: видів тварин, терапевтичної дози. шлях введення та час дозування.

1. Ботеро Д. та М. Рестрепо. 1998. Паразитоз людини. 3-е вид. CIB. Медельїн Колумбія. [Посилання]

2. Куба А. 1982. Посібник з лабораторної патології тварин. Ред. Панамерикана де Салуд. [Посилання]

3. Кадмор С., К. Делгаті, Ш. Хейворд-Макклелланд, Д. Петрін та Е. Гері. 2004. Лікування інфекцій, спричинених стійкістю до метронідазолу Трихомонади вагінальний. Преподобний Клін. Мікробіол., 17 (4): 783-793. [Посилання]

4. Фернандес І. 2002. Метронідазол. Національний університет Уругваю. Доступно за адресою: http://www.infecto.edu.uy/terapeutica/atbfa/metro/METRONIDAZOL.htm [Посилання]

5. Феррейру Г., Л. Бадіас, Е. Гонсалес та Ж. Агірре. 2001. Тинідазол: протимікробний препарат з генотоксичною активністю. Преподобний Куб. Інв. Біомед., 20 (1): 54-58. [Посилання]

6. Брантон Л.Л., Дж. Лазо та К.Л. Паркер. 2006. Гудмен і Гілман. Фармакологічні основи терапії. 10-е видання Інтерамерікана, Мексика. [Посилання]

7. Ліпман Н.С., Н.Лампен і Х.Т. Нгуєн. 1999. Ідентифікація псевдокіст Тритріхомонада ти помер у вірменських хом'яків та їх передача мишам. Лабораторія. Anim. Наук, 49 (3): 313-315 [Посилання]

8. Мері Т., Т.С. Джокіранта, Л. Сухонен та С. Мері. 2000. Опір Трихомонада вагінальна до метронідазолу: звіт про перші три випадки з Фінляндії та оптимізація тесту чутливості in vitro при різних концентраціях кисню. Дж. Клін. Мікробіол., 38 (2). 763-767 [Посилання]

9. Роуч П.Д., П.М. Уолліс та М. Олсон. 1988. Застосування метронідазолу, тинідазолу та диметридазолу для елімінації трихомонад від лабораторних мишей. Лабораторія. Anim., 22 (4): 361-364. [Посилання]

10. Zúñiga M., J. Turmari, S. Milocco і R. Piñeiro. 2001. Наука і техніка в галузі захисту тварин та експериментів. McGraw-Hill/Interamericana з Іспанії. Мадрид, Іспанія. [Посилання]