ДИСЕРТАЦІЯ УНІВЕРСИТЕТСЬКОГО ДОКТОРА (доктор філософії) Дослідження субфракцій ліпопротеїнів при захворюваннях, пов’язаних з порушеннями ліпідного обміну Хайналка Лорінч Науковий керівник: д-р Ілдіко Серес УНІВЕРСИТЕТ ДЕКОРАТИВНОЇ ДОКТОРСЬКОЇ ШКОЛИ ЗДОРОВ'Я 2015 Дебрецен

дослідження

Зміст Скорочення. 4 1. Вступ. 6 2. Огляд літератури. 8 2.1. Ліпопротеїди. 8 2.1.1. Загальна структура ліпопротеїдів плазми. 8 2.1.2. Обмін ліпопротеїнів. 9 2.2. Неоднорідність ліпопротеїдів ЛПНЩ та ЛПВЩ. 13 2.2.1. Структура, функція та ліпопротеїни низької щільності (ЛПНЩ), використовувані для розділення субфракцій ЛПНЩ. 14 2.2.2. Будова та функції ліпопротеїнів високої щільності (ЛПВЩ) та методи, що використовуються для розділення субфракцій ЛПВЩ. 17 2.3. Порушення ліпідів. 21 2.3.1. Адипокіни та ожиріння. 23 2.3.2. Чемерін. 24 2.3.3. Аномалії ліпідів при ожирінні. 27 2.3.4. Синдром Сміта-Лемлі-Опітца. 28 3. Цілі. 31 4. Пацієнти та методи. 32 4.1. Відбір пацієнтів із ожирінням. 32 4.2. Відбір пацієнтів із синдромом Сміта-Лемлі-Опітца. 32 4.3. Забір крові та вимірювання лабораторних показників. 33 4.4. Поділ підфракцій ЛПНЩ і ЛПВЩ. 34 4.5. Визначення рівня чемерину в сироватці крові. 39 4.6. Визначення рівня 7-дегідрохолестерину та активності параоксонази-1. 39 2

4.7. Статистичний аналіз. 40 5. Результати. 41 5.1. Взаємозв'язок між концентрацією хемерину в сироватці крові та субфракціями ліпопротеїнів у осіб із ожирінням, не діабетом та нормальною вагою. 41 5.2. Розподіл субфракцій ліпопротеїнів у SLOS та контроль дітей. 49 5.3. Зв'язок між активністю параоксонази та арилестерази PON1 у сироватці крові та активністю арилестерази PON1 та параметрами ліпопротеїнів у SLOS та контрольних дітей. 54 6. Обговорення. 56 7. Короткий зміст. 63 8. Короткий зміст. 65 9. Список літератури. 66 10. Доповіді, на яких базується дисертація. 77 Додаток 11. 79 3

Абревіатури 7DHC ABCAI ABCGI apo BMI CETP CMKLR1 ІФА 7-дегідрохолестерин АТФ-зв'язуюча касета білок AI ATP-зв'язуюча касета білок GI аполіпопротеїн Індекс маси тіла холестерин ефір переносний білок до хемокіноподібних рецепторів модель гомеостазу ліпопротеїнів високої щільності оцінка інсулінорезистентності рідинна хроматографія високого тиску високочутлива С-реактивний білок сульфат гепаран протеоглікан проміжний фактор ядро ​​інтерлінійний ліпопротеїн 6 -b інгібітор кінази c-jun N-кіназна кіназа ліпопротеїдів низької щільності моноцит хемоаттрактант білок-1 4

MTP NF-κB ЯМР OGTT PON1 мікросомний білок для переносу тригліцеридів білок ядерний фактор kappa-b ядерний магнітний резонанс пероральний тест на толерантність до глюкози людський параоксоназа-1 RBP4 білок, що зв'язує ретинол 4 SLOS SR-BI TNFα VLDL синдром Сміта-Лемлі-Опіца фактор поглинання пухлини дуже пухлина пухлина дуже пухлина ліпопротеїди низької щільності 5

Таблиця 1: Класифікація ліпопротеїдів за щільністю (на основі Jonas, 2002) Кіломікрон ЛПОНЩ ЛПНЩ ЛПВЩ Щільність ЛПВЩ (г/мл) в 1000 разів, а в ряді випадків можна виявити надзвичайно низький рівень загального холестерину (Tint et al., 1995a) . ацетил коа (C 2) + ацетоацетил коа (C 4) 3-гідрокси-3-метилглутарил CoA мевалонат ланостерол зимостерол холестерин-8 (9) -ен-3ß-ол холеста-7,24-дієн-3ß-ол латостерол 7- дегідродезодостерол 7-дегідрохолестерин SLOS 7DHCR 7DHCR SLOS десмостерол холестерин Рисунок 3: Дефект у процесі біосинтезу холестерину при синдромі Сміта-Лемлі-Опітца (SLOS), спричинений ферментом 7-дегідрохолестерин-редуктаза (частковий або 7DHCR) 29

(b) (a) (c) Рисунок 4: (a) Схематичний малюнок смуг субфракції ЛПНЩ після електрофорезу: перша смуга - ЛПОНЩ, нижче якої 3 смуги середньої смуги, що містять залишки ЛПНЩ і ЛПНЩ, а потім великі субфракції ЛПНЩ (ЛПНЩ) -1, -2), слідують субфракції ЛПНЩ малої щільності (ЛПНЩ-3, -4, -5, -6, -7) і смуга ЛПВЩ. На панелі (b) показано денситометричне зображення здорової людини з переважно великими субфракціями ЛПНЩ (середній розмір ЛПНЩ 27,18 нм; позначений жовтим кольором), тоді як на панелі (с) показано репрезентативне аномальне денситометричне зображення пацієнта, що відображає субфракцію ЛПНЩ малої щільності ( середній розмір ЛПНЩ 26,40 нм (позначений червоним). 36

(b) (a) (c) Рисунок 5: (a) Схематичний малюнок смуг субфракції ЛПВЩ після електрофорезу: верхня, повільна фракція - це смуга VLDL + LDL, яка є основною ЛПВЩ (HDL-1, -2, -3), а потім середні ЛПВЩ (ЛПВЩ-4, -5, -6, -7) і невеликі субфракції ЛПВЩ (ЛПВЩ-8, -9, -10). Фракція, що найшвидше рухається, - це альбумін. Панель (b) показує денситометричне зображення здорової людини, тоді як панель (c) показує репрезентативне денситометричне зображення пацієнта. 38