Університет Веракруса
Стаття дослідження
Жаклін Морено-Фіц 1, Ідалія Медіна-Салазар 1, Вірідіана Чавес-Ернандес 1, Девід Елас-Віяс 2 і Летиція Вердуго-Даз 1
Резюме
Анотація
Ключові слова: хвороба Паркінсона, магнітна стимуляція, тирозингідроксилаза, баланс, тест на відкритому полі.
1. Вступ
2.1. Щури
Було використано 58 самців щурів штаму Wistar вагою 180-200 г на початку експерименту, розподілених по групах по 2 тварини на акрилову коробку (16x37x18 см), за однакових температурних умов (20-22 ° С), легкі цикли: темрява (12:12), їжа та вода на вимогу. Всіх тварин обробляли згідно з принципами, викладеними в керівних принципах щодо догляду та використання дослідних тварин. 9
2.2. Експериментальний дизайн
2.3. Травми та оперативні втручання
Вплив на КМ проводили дві години на день протягом двох місяців дослідження відповідним підгрупам. Акрилова коробка, де зазвичай жили тварини, без її металевої кришки, була вставлена в середину пари котушок під час періодів стимуляції (рис. 1). Температура всередині коробок становила 23,4 ± 0,4 ° С, цей параметр залишався постійним протягом 2 годин стимуляції.
2.5. Тести поведінки
2.5.1. Індуковані амфетаміном повороти
2.5.2. Оцінка пози для завивки
У цьому тесті В гризун останньої третини хвоста утримується і піднімається у вертикальному положенні від 1 до 2 см протягом 1 хвилини. Це реєструється, якщо спостерігається відхилення тіла на 10 0 В або більше в напрямку того чи іншого напрямку (ліворуч або праворуч), беручи за орієнтир вертикальну вісь тіла тварини. Якщо він не виявляє переваги нахиляти голову вліво або вправо, це зараховується як нуль.
2.5.3. Балансова балка
Гризуна кладуть на дерев’яний брусок товщиною 1 см і довжиною 100 см, піднятий на 80 см від підлоги. Перед початком випробування гризунів потрібно навчити, взявши їх за хвіст і вперше поклавши на 25 см від акрилової коробки, і закликаючи пройти вздовж бруса, поки вони не дійдуть до акрилової коробки з тирсою, яку вони визначать безпечній зоні, він згодом тренується на відстанях 50 см, 75 см і, нарешті, 1 метр. Згодом тест починається, залишаючи тварину в кінці дистальніше ящика, і секундоміром береться час, необхідний для досягнення іншого кінця та доторкання до ящика. Після навчання тест проводиться 5 разів. Якщо щур не закінчує екскурсію або не торкається ящика, це записується як 120 секунд (максимальний час бігу).
2.5.4. Відкрите поле
2.6. Гістологія та імуногістохімія проти TH
2.7. Статистичний аналіз
3.1. Індукований амфетаміном рух
3.2. Оцінка пози для завивки
У цьому тесті, метою якого є вимірювання постави, а також схильності до того чи іншого напрямку щодо головної осі тіла, не було виявлено суттєвих відмінностей між жодною з досліджуваних груп (дані не наведені).
3.3. Оцінка балансу
3.4. Оцінка поведінки у відкритому полі
Параметри тесту на відкритому полі (загальна пройдена відстань, час нерухомості та кількість дотиків) наведені в таблицях 1, 2 і 3. Загальна відстань, пройдена за 15 хвилин випробування (табл. 1), показує, що поранені тварини подорожували менша відстань від початку, ніж цілі тварини та помилково поранені тварини. У всіх експериментальних групах загальна подолана відстань зменшилась у двох оцінках після стимуляції (30 та 60 днів). Однак зменшення було значним лише у інтактних тварин при другому оцінюванні (F (2,15) = 6,898; p = 0,0075)
Групи (n)
базальний
30 днів
60 днів
IВ В (12)
I + CMВ (6)
Фіктивний (6)
Sham + CMВ (6)
LxВ (14)
Lx + CMВ (14)
Групи (n)
базальний
30 днів
60 днів
IV (12)
I + CMВ (6)
Фіктивний (6)
Sham + CMВ (6)
LxВ (14)
Lx + CMВ (14)
Кількість випадків, коли тварини вставали, торкаючись стін поля двома передніми ногами, показано в таблиці 3. У цьому параметрі, який відображає інформацію про рухову активність та пошук втечі (тривоги), спостерігались суттєві відмінності між групами. Травмовані тварини в базовому тесті показали найнижчі показники порівняно з цілими та помилково пораненими тваринами. За 60 днів експерименту інтактні тварини суттєво зменшили це значення (F (2,15) = 9,604; p = 0,0021), на відміну від поранених тварин, які значно його збільшилиВ (F (2,36) = 4,475; p = 0,00184 ). Застосування СМ індукує диференціальні зміни кількості дотиків залежно від експериментальної групи. У цілих тварин стимуляція запобігає зменшенню дотиків до стін.
Нарешті, тварини, поранені СМ, збільшили кількість дотиків до стінок через 30 днів (не суттєва різниця), хоча пізніше ця величина знову зменшилася через 60 днів стимуляції, подібно до величини, яку вони представили в базовому тесті.
СЕНСОРІ НА СТІНАХ
Групи (n)
IV (12)
I + CMВ (6)
Фіктивний (6)
Sham + CMВ (6)
LxВ (14)
Lx + CMВ (14)
3.5. Імуногістохімія
На рисунку 4 представлені репрезентативні мікрофотографії тварин з трьох експериментальних груп (цілі, поранені та поранені, що зазнали впливу СМ протягом двох місяців). Показано, що обидві поранені групи не мають імунореакції TH на постраждалій стороні.
Малюнок 4. Мікрофотографії зрізів на рівні смугастого тіла з імунореакційною здатністю до тирозингідроксилази (ТГ). А) цілий зріз тварин. Б) репрезентативна ділянка тварини з ураженням з правого боку (відсутність імунореакції) та С) ділянка щура з помилковим ураженням (ін’єкція сольового розчину). Чорна смужка на малюнку А відповідає 1,5 мм.
4. Обговорення
4.1. Поведінкові ефекти
4.1.1. Індуковані амфетаміном обертання
4.1.2. Оцінка постави
4.1.3. Баланс і рух
4.2. Відмінності та подібності тваринної моделі, використаної у цьому дослідженні з ПД у людей.
4.3. Можливе застосування у пацієнтів з ПД
5. Висновок
6. Подяки
Проект фінансується PAPIIT IN 217812. Ми дякуємо пані Антонії Рохас Террасас за велику допомогу в утриманні та догляді за тваринами.
7. Конфлікт інтересів
Автори заявляють, що не існує конфлікту інтересів.