пептид

  • реферат
  • Передумови:
  • методи:
  • результати:
  • висновок:
  • вступ
  • Матеріали і методи
  • звір
  • Шлункове шунтування
  • Вивчати дизайн
  • Гормональні тести
  • Статистичний аналіз
  • результат
  • B&W та споживання їжі
  • Постпрандіальні рівні активних PYY та GLP-1 у плазмі крові
  • Дослідження годівлі
  • Адміністрація PYY3-36
  • Введення екзендіну-4
  • Лікування октреотидом
  • обговорення

реферат

Передумови:

У пацієнтів спостерігається підвищений викид гормонів у кишечнику після їжі після виписки після шлункового шунтування Roux-en-Y. Змінена реакція кишкових гормонів відіграє важливу роль у зниженні апетиту та маси тіла (ШВ) після шлункового шунтування. Пацієнти з недостатньою втратою ЧТ після шлункового шунтування мають ослаблену постпрандіальну реакцію кишкового гормону порівняно з пацієнтами, які втратили адекватну ЧТ. Ефекти подальшого введення кишкового гормону після шунтування шлунка невідомі.

методи:

Ефекти периферичного введення пептиду YY3-36 (PYY3-36; 300 нмоль кг -1), глюкагоноподібного пептиду-1 (GLP-1) аналога екзендіну-4 (20 нмоль кг -1) та аналога соматостатину октреотиду (10 мкг кг -1) під час годування та BW оцінювали у щурів після шунтування шлунка.

результати:

Шлунково-шунтові щури важили (Р 1). Хоча спочатку хірургічна операція була розроблена для того, щоб спричинити втрату ваги через обмеження поживних речовин та порушення всмоктування, хірургічні маніпуляції також змінюють фізіологію метаболізму, шлунково-кишкового тракту, гормонів та нервової системи. 2 Основні механізми втрати ваги хірургічним шляхом вони залишаються неповними 3, але, як видається, спричиняють зниження голоду, посилення ситості, зміни харчових уподобань та витрат енергії.4 Показано, що перші механізми, щонайменше частково, фізіологічно індуковані змінами в шлунково-кишковому та центральному нейроендокринному сигналізації. 6, 7, 8

Після їжі реакції кишкових гормонів глюкагоноподібного пептиду-1 (GLP-1) та пептиду YY3-36 (PYY), що виробляються з L-клітин кишечника, посилюються після шлункового шунтування. 6, 7, 8 Ми та інші показали на моделі гризунів, що ці анорексигенні кишкові гормони зменшують почуття голоду та викликають насичення залежно від дози. 9, 10 Ми також виявили, що пацієнти із втратою неоптимальної маси тіла (ШО) після шлункового шунтування мали послаблені відповіді PYY та GLP-1 після їжі. 6 Інгібування насичувальної шлунково-кишкової гормональної відповіді аналогом соматостатину октреотидом підвищує апетит та споживання їжі у пацієнтів із шлунковим шунтуванням, тоді як специфічний антагонізм PYY збільшує споживання їжі у щурів із шлунковим шунтуванням. 8 Навряд чи один пептид буде відповідальним за всі зареєстровані шлункові шунтування, оскільки одночасно виділяється кілька кишкових гормонів. Показано, що комбінований ефект екзогенного пептиду YY3-36 (PYY3-36) та GLP-1 (посилання 11, 12, 13), а також PYY3-36 та оксинтомодуліну посилює зменшення споживання їжі у неоперованих щурів 11, 12, 13 і люди ... 14

У цьому дослідженні ми досліджували, чи не мав одноразовий периферичний прийом кишкових гормонів PYY3-36 та Exendin-4 у фармакологічних дозах додатковий вплив на споживання їжі та КТ після шлункового шунтування щурів. Ми також вивчали вплив октреотиду на споживання їжі та BW у тієї ж групи щурів.

Матеріали і методи

Міністерство внутрішніх справ Великобританії (PL 70-6669) схвалило всі експерименти цього дослідження. У всіх 22 ожирілих самців щурів Wistar (BW 468, 5 ± 3,4 г) утримувались окремо в циклі світло-темноти 12 год/12 год із включеним світлом о 0700 год. Кімнатна температура становила 21 ± 2 ° C, і щури мали доступ до звичайної їжі (дієта RM1, Special Diet Services Ltd, Ессекс, Великобританія) та водопровідної води, якщо не зазначено інше. BW та споживання їжі вимірювали щодня протягом 60 днів після операції.

Шлункове шунтування

Після 1 тижня акліматизації щурів рандомізували і робили шлунковий шунтування або моделювали операцію згідно встановленого протоколу, як описано вище. Коротко кажучи, проксимальна частина тонкої кишки розподілена на 15 см дистальніше пілоруса, утворюючи біліопанкреатичну кінцівку. Після ідентифікації апендикса, клубової кишки спостерігали проксимально, щоб сформувати загальний 25-сантиметровий канал. Тут була проведена бічна еюноеєюностомія між біліопанкреатичною кінцівкою та загальним каналом. Шлункова капсула та шлунково-кишкові кінцівки були анастомозовані з одного боку на інший, а залишки шлунку були закриті. Помилкові операції полягали в 7-мм гастростомії на передній стінці шлунка з наступною оклюзією та 7-мм еюностомії з подальшим закриттям.

Вивчати дизайн

Дослідження проводили рандомізованим, перехресно контрольованим фізіологічним розчином, причому кожну тварину одноразово обробляли трьома різними сполуками: PYY3-36 (300 нмоль кг-1, Bachem Ltd, Сент-Хеленс, Великобританія), Exendin-4 (20 нмоль кг-1, Bachem (Великобританія) Ltd, Мерсисайд, Великобританія) та октреотид (10 мкг кг -1, Сандостатин, Sun Pharmaceuticals, Йоркшир, Великобританія) з 2-денним вимиванням між переходом пептиду та фізіологічним розчином та 1 тижневим вимиванням між кожною сполукою -36, Exendin-4 або октреотид). За 1 тиждень до лікування всім щурам обробляли щодня і робили інтраперитонеально змодельовані ін’єкції носія (0,1 мл ізотонічного сольового розчину), щоб мінімізувати будь-яку реакцію на стрес протягом досліджуваних днів. У день дослідження обхідні та немодельовані щури голодували протягом 0700 годин від початку світлового циклу і випадковим чином розподіляли на дві групи, які отримували або носій (ізотонічний сольовий розчин, Bayer, Ньюбері, Великобританія) або одну з трьох сполуки. Всі ін’єкції робили внутрішньочеревно за 1 годину до початку темного циклу. На початку 1900-годинного темного циклу тваринам було надано доступ до їжі, і сумарне споживання їжі вимірювали через 1, 2, 4, 8 та 12 годин, а потім.

Гормональні тести

Кров збирали у всіх щурів у день закінчення дослідження. Тварини мали доступ до їжі ad libitum напередодні ввечері і були обезголовлені на початку світлового циклу в післяопераційний день 60. Кров отримували і центрифугували негайно при 3000 об/хв. Їх аналізували в двох примірниках за один цикл протягом 10 хвилин при 4 ° С і зберігали при -20 ° С до отримання зразка. Імунореактивність, подібну до PYY, вимірювали за допомогою специфічного та чутливого радіоімуноаналізу, який вимірює як повну довжину (PYY1-36), так і фрагмент (PYY3-36). 16, 17 GLP-1 вимірювали за допомогою встановлених саморадіоімуноаналізів. 18, 19

Статистичний аналіз

Усі дані виражаються як середнє значення ± sem. Двосторонній метод лікування (між випробовуваними) × часовий (у випробовуваних) дисперсійний аналіз з пост-hoc тестом бонферроні для кожного часового моменту використовувався для тестування на значущі відмінності. Для незалежних зразків використовували спарений t-тест Стьюдента. P

a ) зміни маси тіла всіх штучно оперованих (- □ -; n = 12) та шлункових шунтуючих щурів (- & D-; n = 10), і b ) середнього спонтанного щоденного споживання їжі обома групами протягом усього періоду спостереження 60 днів. Дані представлені як середні значення ± sem (** P *** P -1, P -1, P

Кумулятивне споживання їжі у підставних щурів (n = 12, ліва колонка) та у щурів із шлунковим шунтуванням (n = 10, права колонка) після обробки PYY3-36 ( a, b ), Exendin-4 ( c, d ) і октреотид ( e, f ) порівняно з сольовими ін’єкціями; дані представлені у вигляді середніх значень ± sem. Тест Post hoc Bonferroni був використаний для аналізу часу між двома групами лікування (* P ** P *** P 6, 8 Короткочасне, 20, 21 та тривале введення з 9, 10, 22, 23 екзогенний PYY3-36 зменшує споживання їжі та збільшення ЧБ у гризунів та людей Подібні висновки щодо втрати ЧБ спостерігались після хронічного лікування Ексендіном-4 у щурів 21, 24, 25 та людей.

Новим результатом цього дослідження є те, що прийом їжі після шлункового шунтування може бути змінений фармакологічними дозами кишкових гормонів або аналогів кишкових гормонів. Це свідчить про те, що підвищений рівень ендогенних PYY та GLP-1 після шлункового шунтування може бути не на піку кривої доза-відповідь. Вплив на споживання їжі був явним після введення Ексендіну-4 і навіть призвів до короткочасного зниження ЧД.

Наші висновки можуть мати клінічні наслідки. Рівні PYY3-36 та GLP-1 після їжі також збільшуються після шлункового шунтування у людей 8, але величина відповіді може варіюватися у пацієнтів і може бути пов'язана з різницею в післяопераційній втраті ЧБ. 6 Пацієнтам з нижчою післяопераційною реакцією на кишковий гормон було досягнуто нижчих втрат ЧЖ після шлункового шунтування порівняно з пацієнтами з більш сильною реакцією PYY та GLP-1 після їжі. 6

Пацієнти з поганою втратою ЧБ або значним відновленням ЧБ після операції 28, 29 в даний час мають обмежені терапевтичні можливості. Хірургічний перегляд, включаючи зменшення розміру кишені або розгинання кінцівки Ру, 30 часто використовується, незважаючи на відсутність підтверджуючих даних у літературі. Крім того, реорганізації пов'язані з вищими показниками захворюваності та смертності. 31 Ефективна та безпечна медична терапія може стати цінним варіантом для пацієнтів із втратою ваги або навіть відновленням БТ після баріатричної операції.

Спочатку потрібно буде продемонструвати профіль безпеки супрафізіологічних рівнів насичених кишкових гормонів. Потенційні ризики включають гіперінсулінемічну гіпоглікемію, а також нудоту та блювоту, які є найпоширенішими побічними ефектами, що спостерігаються при застосуванні високих доз аналогів GLP-1. 32, 33

Основні механізми, що спричиняють панкреатичний незидіобластоз після шлункового шунтування 34, 35, 36, наразі невідомі, і за останні 5 років було зареєстровано дуже мало випадків, що свідчить про те, що це рідкісне ускладнення шунтування шлунка. Однак випадки гіперінсулінемічної гіпоглікемії свідчать про потенційний ризик довготривалої стимуляції сигналізації GLP-1, що слід враховувати перед тривалим вживанням високих доз GLP-1.

Наше дослідження має деякі обмеження. По-перше, октреотидна частина дослідження не досліджувала селективне інгібування окремих пептидів у регулюванні споживання їжі. Однак ми раніше показували, що специфічний антагонізм PYY3-36 із використанням очищених кролячих антитіл PYY збільшує споживання їжі у шлункових шунтуючих щурів. По-друге, рівні кишкових гормонів у плазмі крові після лікування октреотидом не вимірювали, хоча було показано, що октреотид раніше пригнічував PYY та GLP-1. 6, 37, 38 По-третє, хоча синергетичний ефект аналогів PYY3-36 та GLP-1 на зменшення споживання їжі був продемонстрований раніше, було б цікаво вивчити той самий ефект після шунтування. По-четверте, хоча після трьох випробувань лікування тварини не виявляли клінічних ознак нездужання або страху, це дослідження не виходило за межі оцінки відрази до умовного смаку, що теоретично може сприяти зменшенню споживання їжі, яке спостерігалося після PYY3-36 та Exendin -4. 40, 41 Нарешті, ми не проводили реакцію на дозу або експеримент для дослідження хронічних наслідків введення PYY3-36 та/або введення Exendin-4 на споживання їжі та BW.

На закінчення, одноразове введення PYY3-36 та екзендіну-4 у фармакологічних дозах ще більше зменшило короткочасне споживання їжі на шлунковому шунтуванні щурів. Це втручання також ефективно у випадку перебільшених анорексигенних периферичних сигналів після цієї форми ожиріння. Ці висновки потрібно буде перетворити на клінічне дослідження, щоб оцінити, чи є периферична кишкова гормональна терапія безпечним та ефективним терапевтичним варіантом у пацієнтів з недостатньою втратою ЧБ або відновленням ваги після шлункового шунтування.