(Собачий бруцельоз та перше виявлення Brucella canis в Угорщині

Хвороба, спричинена Brucella canis у собак, може завдати значної економічної шкоди породам. На часто безсимптомну інфекцію вказують аборти в стаді, безпліддя обох статей, запалення, набряки або іноді атрофія статевих органів. B. canis також може заражати людей, зооноз. Присутність B. canis в Угорщині не вдалося підтвердити до 2009 року. Під час обстеження, проведеного між 2001 та 2002 роками, серологічне дослідження зразків крові 1153 собак з різних куточків Угорщини закінчилося з негативним результатом (10).

Власник породи собак в Угорщині переживає низку викиднів у своєму стаді з жовтня 2008 року. У липні 2009 р. Два перервані плоди та одна оболонка плода були направлені на інституційне обстеження, з якого виведено B. canis (18). У нашій статті ми надаємо огляд літератури про собачий бруцельоз та коротко представляємо першу вітчизняну епідемію B. canis.

Бруцельоз собаки

Випадковість

Бруцельоз собак зустрічається у всьому світі. Усі види сімейства Canidae можуть бути водоймами B. canis. Епідемічні аборти у собак вперше спостерігались у 1963 р. (37), але збудник був виділений лише в 1966 р. (5). Збудник хвороби зустрічається в Європі; Це також було виявлено у Німеччині (41), Іспанії (29), Італії (9), колишній Чехословаччині (30), Польщі (27) та Франції (12).

Патологія

В даний час в роду Brucella налічується десять різних видів: B. melitensis (кози та вівці), B. abortus (велика рогата худоба та зубри), B. suis (переважно свині, але також гризуни, зайці та північні олені), B. ovis (вівці), B. canis (собака), B. neotomae (пустельна щур), B. ceti (китоподібні), B. pinnipediales (тюлень, морж), B. microti (польові полівки) (23), B. inopinata (хвороба людини ) ізольовані під час). У межах кожного виду розглядається ряд біотипів, які відрізняються своїми фенотиповими характеристиками, такими як потреба у СО2, вироблення H2S, чутливість до барвників та фагів (1, 24).

З представників роду Brucella, наскільки нам відомо, собака може заразитися лише чотирма видами (B. canis, B. suis, B. melitensis, B. abortus), але з них лише B. canis має епідеміологічне значення (22, 37).

B. canis, як і інші види бруцел, є грамнегативним, коккоїдним паличкоподібним, помірно кислото- та алкогольно стійким фарбуючим (Кьостер-позитивним) внутрішньоклітинним збудником. Він утворює колонії з сірувато-жовтою, горбистою (R) морфологією діаметром 0,5–2 мм на середовищі, що містить кров, після 48 годин посіву (рис. 1). Позитивні до каталази, оксидази та уреази, не потребує СО2, не виробляє H2S (1, 3). Його стійкість середня, він виживає в навколишньому середовищі кілька днів.

Епідеміологія

Собаки можуть заразитися B. canis у будь-якому віці. Найпоширенішим способом передачі статевих шляхів є (19, 37). Збудник виводиться із вагінального секрету сук під час еструсу та вагітності. Після народження B. canis також можна виявити у нащадків, абортів, плаценти та оболонок плода при концентрації до 1010 колонієутворюючих одиниць (TFE)/мл (6). У собак-самців інфекція поширюється переважно через сперму. Секрети простати та епідидиму можуть містити велику кількість збудника, особливо протягом перших двох місяців зараження. Виведення бактерій, хоча і до знижуваного ступеня, може тривати роками, не проявляючи симптомів у собаки. Самці та жінки через 4-8 днів після зараження. починаючи з тижня бактерія також може виділятися із сечею, яка може становити від 103 до 106 TFE/мл із сечею чоловіків (33). Молоко зараженої суки також може містити велику кількість збудника. Деякі вважають, що цуценята вже інфіковані в утробі матері (6), тоді як інші вважають зараження цуценят молоком первинною (39). Бактерія також була виділена зі слини, носового та очного секрету та фекалій, але вони мають незначне значення для розповсюдження захворювання (39).

Розвиток хвороби

Бактерії потрапляють в організм через слизові оболонки або кон’юнктиву статевих органів, рота та носа. Потім збудник потрапляє в організм макрофагами, які потрапляють у лімфоїдні органи (лімфовузли, селезінка), тканини стероїдно-залежних статевих органів (простати, яєчок та придатків яєць у собак-самців та вагітної матки, плаценти та плоду у сук), де множиться. Бактеріємія - через 1 - 4 дні після зараження. розвивається приблизно за тиждень, триває близько півроку, але періодична бактеріємія може зберігатися роками (19, 37). Бактерія може оселитися в оці і навіть у хрящі між хребцями (6).

Симптоми, ураження

Хоча бактерія присутня в організмі і розмножується, інфекція часто протікає безсимптомно або проявляється лише як слабкі симптоми. Смертність низька, здебільшого у живих, але заражених цуценят. Власники інколи повідомляють лише про помірні, невизначені ознаки, такі як втрата ваги, погіршення якості волосся, байдужість, втома, біль у спині, кульгавість, збільшення лімфатичних вузлів (особливо в області за пахом та глоткою). Класичним симптомом є викидень у сук, який зазвичай припадає на 30–57-й день вагітності (19, 37). Викидні часто частково автолізуються. Коричневі, зеленувато-сірі виділення можуть виділятися з піхви абортованої суки протягом тривалого періоду часу (8). Підстилка також може народитися там, де цуценята слабкі і гинуть протягом декількох годин. У багатьох випадках потомство вже вбито і поглинається в ембріональному віці, тому випадок вважається невдалим спаровуванням.

У собак-самців у разі гострої інфекції придатки яєчка збільшуються і стають болючими через запалення. Запалення мошонки та набрякла інфільтрація є загальними явищами. Через біль біль у цих тварин знижується, а запалену ділянку часто вилизують. У хронічній фазі захворювання придатки в’януть. Гнійне запалення яєчка та мошонки зустрічається рідше (19, 37). Бактерії, які розмножуються в яєчку, можуть пошкодити тамтешні клітини та кров’яно-яєчковий бар’єр, що призводить до 11-14 днів після зараження. тиждень організм виробляє антитіла проти сперми. Це спричинює посилення місцевого запалення, аномальних сперматозоїдів та аутоаглютинацію їх голови (31).

Аномалії можуть також розвинутися в інших частинах тіла. На додаток до генералізованого запалення лімфатичних вузлів внаслідок дифузної проліферації лімфоїдних та ретикулоендотеліальних клітин спостерігали також збільшення селезінки та печінки. У більш важких випадках може виникнути скутість, кульгавість, односторонній або навіть повний параліч через можливий дискоспондиліт. Ендофтальміт може також розвинутися внаслідок виникнення імунних комплексів (19, 37).

Діагностика

B. canis можна культивувати із сперми, а також із вагінальних виділень під час еструсу та після абортів (19, 37). Збудник присутній у великій кількості в оболонці плода, але також може бути виявлений в сечі (32) і може бути культивований за зразками, отриманими з лімфатичних вузлів, простати, селезінки, кісткового мозку, іноді печінки, яєчок (40). Дослідження крові в закритій системі, яка забороняє згортання, дає лише результати під час бактеріємії. У разі негативного бактеріологічного тесту не можна з повною впевненістю виключити зараження тварини (19, 37). Біохімічні зонди та молекулярні методи [звичайна полімеразна ланцюгова реакція в реальному часі (ПЛР)] використовуються для розділення окремих видів і біотипів бруцел (13, 23).

Серологічні тести можуть виявити антитіла до клітинної стінки та/або цитоплазматичних білків у бруцелах. Антитіла з’являються у помітних кількостях через 3–4 тижні після зараження, але часто не виявляються в хронічній фазі захворювання (21, 40). Найбільш поширеними серологічними зондами є тест на слайд-аглютинацію (7, 14), тест на аглютинацію в трубці, [як з додаванням 2-меркаптоетанолу, так і без нього (підвищує специфічність, зменшує чутливість)], осадження агарового гелю (42), Використовується ІФА (2), 26, 36) та непряма імунофлюоресценція (19). Перелічені тести, хоча і відрізняються за чутливістю та специфічністю, добре доповнюють одне одного.
Точний діагноз можна отримати шляхом культивування бактерії та серологічного тестування двох зразків крові, взятих з інтервалом у 4 тижні. Для бактеріологічного дослідження перерваний плід і оболонка плода, у випадку сук вагінальний мазок і зразок крові (закрита система, інгібітована антикоагуляція), а у собак-самців - сперма та кров (взяті в закритій системі, інгібіровані антикоагулянт) необхідно направити на лабораторне дослідження.

Відмітна хвороба

Зараження собак вірусом герпесу, Mycoplasma spp., Ureaplasma spp., Escherichia coli, Streptomyces spp., Salmonella Enterica, Campylobacter spp., Coxiella burnetii, Leptospira spp., Neospora caninum, Toxoplasma gondii.

Профілактика та контроль

Інфекція B. canis у собак є хворобою, яку потрібно повідомити в Угорщині [12/2008. (II. 14.) Указ про ПВРД]. Якщо наявність інфекції B. canis у собаки в племінному стаді підтверджено лабораторним дослідженням, слід встановити обмеження руху для зараженої породи. Зняти обмеження руху можна лише в тому випадку, якщо стадо було ліквідовано власником та продезінфіковано або якщо стадо очищено від B. canis. Розплідник може бути оголошений безкоштовним, якщо клінічні ознаки собачого бруцельозу не проявилися протягом року до класифікації, а серологічні тести, проведені двічі у нестеризованих собак старше року з інтервалом не менше трьох місяців, були негативними.

Аспекти охорони здоров'я

У людей захворювання зазвичай викликає неспецифічні симптоми, такі як тривала температура, збільшення лімфатичних вузлів (34), біль у горлі (35), біль у суглобах (16), озноб та втрата ваги (25). Інфекційні агенти та тісний контакт із зараженими тваринами відіграють певну роль у передачі інфекції (20).

Перший вітчизняний діагноз B. canis (18)

Під час бактеріологічного дослідження крові, вагінальних та горлових мазків, відібраних у 31 тварини в кінці липня, B. canis був виведений з 3 тварин (10%): з вагінальної та зразків крові перерваної суки (номер 1) збудника та з крові племінного кабана (номер 2) та піврічної суки (номер 3) (таблиця 2). Зразки горла та додаткових зразків крові були негативними. Під час повторного відбору проб наприкінці серпня, за винятком собаки № 3, посів крові на зразки крові закінчився з негативним результатом. З шести тварин, знеболених в кінці серпня та підданих великим діагностичним тестам (виявлено позитивним у трьох бактеріологічних тестах (випадки з 1 по 3) та ще у трьох підозрах на зараження (випадки з 4 по 6)), 2 та у собак № 3, збудник може культивуватися з паренхіматозних органів та лімфатичних вузлів.

У липні тест на специфічну слайд-аглютинацію B. canis був позитивним для собак 1–4 та 7–8. Після обробки 2-меркаптоетанолом позитивні були лише зразки 1–3 та 7. Наприкінці серпня зразки собак 1, 3 та 9 дали позитивну реакцію на тест на аглютинацію (як після, так і без осадження 2-меркаптоетанолу).

спричинена

Патологоанатомічне дослідження плодів, плаценти та знеболених тварин не виявило макроскопічних уражень. При гістологічному дослідженні виявлено дифузний лімфогістіоцитарний інтерстиціальний гепатит у одного плода (рис. 2). Мультифокальна загибель коагуляційної тканини при помірному макрофагу та сильній інфільтрації нейтрофільних гранулоцитів спостерігалася в оболонках плода, а велика кількість B. canis виявлялася в клітинах трофобластів (рис. 3). У всіх шести патологічно обстежених собак мигдалини та лімфатичні вузли виявляли лімфоїдну гіперплазію. Крім того, у окремих осіб також були виявлені легкий мультифокальний лімфогістіоцитарний менінгіт, інтерстиціальна пневмонія та запалення молочної залози, ендометрит та двосторонній дифузний лімфогістіоцитарний епідидиміт та простатит (рис. 4). ПЛР-аналіз тканинних гомогенатів шести тварин виявив збудника лише з тканин собаки №3, тоді як при ІГ лише B. canis виявлений у цитоплазмі макрофагів та гігантських клітин мигдаликів та лімфатичних вузлів собаки №1.

Ми припустили, що інфекція B. canis була інтродукована в культуру вагітними суками № 6 невідомого походження. Оскільки спорадичні репродуктивні розлади в першу чергу підозрювали в неінфекційності, власник вперше надіслав зразок для лабораторних досліджень лише через 8 місяців. У нещодавно зареєстрованому випадку аналогічно тривалий час (1 рік) минув між появою репродуктивних розладів у розпліднику та першим надсиланням лабораторних зразків (4). Обидва випадки звертають увагу ветеринарів та заводчиків, які працюють на практиці, на необхідність пошуку інфекційних захворювань на тлі спорадичних репродуктивних розладів.

Серед перевірених собак тест на аглютинацію слайдів дав найвищий позитивний результат. Подібно до інших, субклінічну інфекцію виявили у 57% тварин, які виявили позитивні (19, 37).

Враховуючи, що антитіла, що виявляються за допомогою поточних серологічних тестів, з’являються лише через 3 - 4 тижні після зараження, але можуть опускатися нижче рівня, що піддається виявленню, у хронічній фазі захворювання (21), не дивно, що деякі зразки сироватки мають негативний результат за допомогою тесту аглютинації слайдів. вольт. Незважаючи на успішну бактеріальну культуру, самець собаки 2 також виявився серонегативним. Серологічний статус, за винятком двох особин, з часом змінювався. Один був сукою викидня №1, другий - 5-місячним цуценям, який вижив після частково мертвого посліду №3. Бактеріємія зберігалася лише у цього цуценя. Наскільки нам відомо, це перший випадок, який, мабуть, підтвердив появу стійкої бактеріємії B. canis у молодої собаки, яка заразилася навколо народження і в іншому випадку виявилася абсолютно здоровою. Цей результат звертає увагу на той факт, що молоді тварини із зараженого розплідника, які ще не були виведені, як у домашніх тварин, так і в якості племінних тварин, можуть становити серйозний ризик для людей або тварин. до інших розплідників.

Менше половині серологічно позитивних тварин вдалося культивувати B. canis, що можна пояснити періодичною бактеріємією. Гістологічні ураження у собак та оболонки плода, а також результати ІГ були подібними до тих, що описані в попередніх звітах (4, 15, 17, 19). У двох собак (цифри 5 і 6) лише анамнез та гістологічні зміни вказували на зараження. Всі інші тести були негативними.

Через описані діагностичні труднощі звільнення великого стада не обіцяло певного успіху, тому господар ліквідував стадо.

На основі наших досліджень ми виявили, що зараження B. canis у собак також трапляється в Угорщині. Тому рекомендується проводити бактеріологічний та серологічний тест для виключення інфекції B. canis у собак, які роблять аборти.