діагноз

В
В 		В

Послуги на вимогу

Журнал

  • SciELO Analytics
  • Google Scholar H5M5 ()

Стаття

  • Іспанська (pdf)
  • Стаття у форматі xml
  • Посилання на статті
  • Як цитувати цю статтю
  • SciELO Analytics
  • Автоматичний переклад
  • Надішліть цю статтю електронною поштою

Показники

  • Цитується SciELO
  • Статистика доступу

Пов’язані посилання

  • Подібні в SciELO

Порівняти

Життєва стоматологія

Он-лайн версія В ISSN 1659-0775 Версія для друку Версія ISSN 1659-0775

Стоматологія життєдіяльності В в n. 26 В Сан-Педро, Лурд де Монтес де Ока Січ/Червень 2017

Клінічний діагноз у слині. Огляд

Клінічний діагноз слини. Огляд

1 Латинський університет Коста-Рики, Коста-Рика, [email protected]

Ключові слова: В Біомаркери; фармакотерапія; імуногістохімія; FRET; желатинова зимографія; ДНК мікрочипів

Ключові слова: В Біомаркери; фармакотерапія; імуногістохімія; FRET; желатинова зимографія; Мікрочипи ДНК

Сьогодні відомо, що стан здоров'я та хвороби мають молекулярну основу, і в основі цього лежить міждисциплінарний інструмент: біохімія. Кожен правильний клінічний критерій має біохімічне обґрунтування.

Молекулярна структура, яка представлена ​​у презентації цієї роботи, - це матрична металопротеїназа, ММР 12. Щоб дізнатись про цей тип ферментів, функцію, яку він виконує, і як це пов’язано з двома антагоністичними подіями: ростом та диференціацією клітин, що є доменом життя, а метастазування раку, який є сферою смерті, вимагало великих дослідницьких зусиль.

Рисунок 1В MMP 12, зв’язаний зі своїм інгібітором NNGH через атом цинку в активному центрі ферменту. Кристалографічна структура в PDBВ

NCBI (Національний центр біотехнологічної інформації). Доступно за адресою: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/.

• NLM (Національна медична бібліотека). Доступно за адресою: http://dtd.nlm.nih.gov/.

• EBSCO Health. Доступно за адресою: https://health.ebsco.com/?_ga=1.46795623.1501374684.1472540416.

• Опубліковано. Доступно за адресою: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed.

• IIB-INTECH (Інститут біотехнологічних досліджень-Технологічний інститут ім. Часкома). Доступно за адресою: http://www.iib.unsam.edu.ar/web/papiros.php?a=

• PDB. Банк білкових даних: Доступно за адресою: www.rcsb.org/pdb/

• База даних BRENDA (Інститут біохімії Університету Кельна, Німеччина). Доступно за адресою: www.brenda.uni-koeln.de

• Національна медична бібліотека США NIH. Доступно за адресою: https://www.nlm.nih.gov/

Іншим аспектом, який не сприяє вилученню крові як джерела ДНК, є те, що вона вимагає особливих умов збереження та транспортування.

Крім того, воно може бути заражене гемоглобіном заліза з еритроцитів; який є інгібітором ДНК-полімерази, ферменту, що використовується в ланцюговій реакції полімерази (ПЛР), що впливає на подальший аналіз ДНК. (Герндез, 2012)

У таких країнах, як Канада, його застосовують для вироблення індивідуальних рецептів ліків при лікуванні психічних захворювань.

Ця заявка заснована на використанні геномної ДНК із слини в дослідженнях однонуклеотидного поліморфізму (SNP); які дозволяють встановити варіації в генах, які експресують ферменти типу цитохрому Р-450 (CYP-450). Ці ферменти беруть участь у фазі I печінкового метаболізму антидепресантів та нейролептиків. (Хасан, 2016)

Малюнок 2В CYP3A4. Бере участь у метаболізмі понад 40 препаратів. Кристалографічна структура в PDB.В

Поліморфізми типу SNP можуть породжувати три типи афектацій.

• Збільшення швидкості метаболізму, що робить нормальну дозу препарату неефективною.

• Зменшення здатності ферментного метаболізму, що може призвести до збільшення вільної фракції препарату та негативних наслідків.

• Неекспресія ферменту, через яку людина не може метаболізувати препарат, що породжує гостру інтоксикацію.

Вони застосовують протоколи для відбору проб, збереження та транспортування до місця випробування. Незабруднення вилученої ДНК можна встановити, у першому варіанті, за допомогою УФ/В спектрофотометра. При 280 нм забруднення білками, а при 230 нм неорганічними сполуками. Сигнал ДНК повідомляється при 260 нм з наявністю єдиного спектроскопічного піку.

Критерієм якості ДНК є співвідношення А260/А280 між 1,8-2,0.

Застосування гелевого електрофорезу полягає в підвищенні чистоти ДНК, перевірці, що не відбулося процесів деградації, та визначенні розміру фракції за допомогою маркерів молекулярної маси. Нарешті, функціональність ДНК перевіряється за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР), що дозволяє отримати за кілька годин велику кількість копій раніше обраної послідовності ДНК.

Рисунок 3В Етапи отримання геномної ДНК із слини.

Малюнок 4В Хемотаксис лейкоцитів лейкотаксиномВ

Існує кілька пунктів згоди між грудним молоком та слиною, оскільки обидва вони містять:

• Обидві рідини мають середній рН нижче, ніж плазма крові. У випадку з грудним молоком близько 6,6 та слиною між 6,5-7,5; в нестимульованому, хоча рН стимульованої слини може бути трохи вищим через збільшення секреції HCO3.

Рисунок 5В Основні компоненти MECВ

Протеоглікани пов'язують лінійні (нерозгалужені) високомолекулярні глюкани з повторюваними дисахаридними одиницями. Вони є макронесучими структурами для сполучної тканини та хряща.

У процесі росту та диференціювання клітин ремоделювання відбувається в ECM за допомогою матричних металопротеїназ (MMP), які, розкладаючи білки ECM, дозволяють міграцію клітин. Ці зміни в матриці необхідні, але повинні регулюватися складними процесами активації-гальмування; Коли ці процеси змінюються, ECM втрачає свою функцію стримування, що трапляється при певних формах раку та артеріосклерозі. (Stryer, 2015)

Ці делеції підтверджують важливу роль ММР 3 у нейрозапаленні. (Крістіансон, 2012)

Рисунок 6В Схема сполучної тканини позаклітинного матриксу, що лежить в основі базальної пластинки, яка підтримує епітеліальний шарВ

Рисунок 7В Інгібітор NNGH. Він відображається у структурі MMP 12, показаної на малюнку 1.В

використовує флуоресцентні хромофорні групи (флуорофори).

Імуногістохімія має широкий спектр застосування в гістопатологічних дослідженнях для діагностики та класифікації пухлин з наявністю метастазів або без них. За допомогою моноклональних антитіл можна встановити прогнози та прогнози щодо пухлин; робити дослідження вірусних або пухлинних антигенів; виявляти тканинні білки та виявляти імунні комплекси, досягаючи більш ефективних методів лікування.

Активне розщеплення каспази-3 відщеплює білок Bid від комплексу апоптозу Bcl-2. Активація Bid збільшує проникність мітохондріальної мембрани, спричиняючи витік цитохрому c, внутрішньоклітинного ефектора, який посилює апоптоз. Таким чином, імуногістохімія дозволяє встановити відмінності в апоптотичній реакції в ураженій тканині рота. (Нельсон і Кокс, 2014)

Аналіз мікрочипів ДНК

Рисунок 8В Зліва: поверхня мікрочипа з тисячами мікропорожнин. Правильно; мікропорожнину мікрочипа із вставленими копіями конкретного гена.

Рисунок 9В Етапи аналізу ДНК мікрочипів

Завдання, яке представляють ці дослідження, полягає у досягненні високого рівня відповідності донорства пацієнтів та ефективної та дешевої системи збору, збереження та транспортування зразків, що дозволяє створювати банки геномних ДНК для підтримки масштабних досліджень.

У цьому сенсі очевидна низка переваг відбору проб слини.

• Уникайте пункції вени та пов'язаних з нею ризиків інфекції як для пацієнтів, так і для медичного персоналу.

• Транспортування зразків здійснюється при кімнатній температурі, і для цього може використовуватися поштова служба.

• На збір проб не впливають особливі стани пацієнтів, таких як літні люди, новонароджені та недоношені діти або люди з судинними порушеннями.

• Забір зразків можна робити стільки разів, скільки потрібно за згодою пацієнтів.

• Дозволяє проводити велику кількість визначень, на додаток до використання геномної ДНК, завдяки великому технологічному розвитку в галузі клінічного та токсикологічного аналізу.

Хоча зразки слини мають деякі недоліки щодо зразків крові, вони в основному були вирішені, не впливаючи на їх переваги.

• Ферментативна активність деяких ротових бактерій може впливати на деякі тести.

• Наявність залишків їжі та слизу у зразках протидіє збільшенню обсягу зразків та процесів фільтрації.

Рисунок 11В Застосування діагностики у слині

Але переваг кілька: використання людського потенціалу, який закінчують університети, розробка баз даних, придатних для епідеміологічних досліджень, та вдосконалення діагностики та лікування. Розробка політики в цьому сенсі матиме вплив на стоматологію як на рівні навчальних програм, так і на клінічній практиці.

Авраам, Дж. та ін. (2012). Зразки слини є життєздатною альтернативою зразкам крові як джерело ДНК для високопродуктивного генотипування. [В Посилання]

Бахло М. та Гл. (2010). ДНК, отримана із слини, добре працює у широкомасштабних дослідженнях мікрочипів з однонуклеотидним поліморфізмом високої щільності. Біомаркери та профілактика епідеміолу раку. 19 (3): 794-798. [В Посилання]

Barriga, A.G, and HernГndez, S.E. (2016). Корисність зразків слини при лабораторній діагностиці. Преподобний Latinoam Patol Clin Med Lab.63 (1): 13-18. Електронна версія доступна за адресою: http://www.medigraphic.org.mx/ [В Посилання]

Байс, Дієго Л. та Гл. (2007). Основна інтерпретація імуногістохімії. Загальна характеристика різних антитіл та їх клітинне та субклітинне розташування. Патологія. Латиноамериканський журнал. 45 (3): 126-140. [В Посилання]

К. А. Крістіансон, Б. Л. Фіцсіммонс, Дж. Х. Шим та ін. (2012). Металопротеїназа 3 спінальної матриці опосередковує запальну гіпералгезію за допомогою механізму, що залежить від TNF. Неврологія 200 199-210. [В Посилання]

CastrillÃn LE, Palma A, MacÃn S. (2011). Роль лактоферину при захворюваннях пародонту. Мексиканський одонтологічний журнал; 15 (4): 231 - 238. [В ПосиланняВ]

Девлін, М. Т. (2015). Біохімія. Т. I та II. 4-е видання. Редакційний Reverte. [В Посилання]

Гансен, Т.В. та ін. (2007). Збір зразків крові, слини та щічних клітин у пілотному дослідженні на датській когорті медсестер: порівняння рівня відповіді та якості геномної ДНК. Біомаркери та профілактика епідеміолу раку. 2072-2076. [В Посилання]

Хасан М, Зігмунд та В. Освальд С. (2016). Швидкий LC-MS/MS: метод визначення співвідношення 4-гідроксихолестерину/холестерину в сироватці крові як ендогенний біомаркер для активності CYP3A у людини та лошат. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 5 серпня; 1033-1034: 193-199. [В Посилання]

Герндез, А. А. та Аранзаз, Г. С. (2012). Характеристика та фізико-хімічні властивості слини: огляд. Преподобний UstaSalud. 11 (101-111). [В Посилання]

Джеймс, С та ін. (2011). Вміст геномної ДНК людини у зразках слини, зібраних за допомогою набору для самостійного збору Oragene®. ДНК Генотек. PD-WP-011 Випуск 4/11. [В Посилання]

Лейте, А. Ф. та Г Гl. (2016). Імуноекспресія розщепленої каспази-3 показує нижчі показники апоптотичної площі при карциномах губ, ніж при внутрішньоротовому раку. J Appl Oral Sci. Липень-серпень. 24 (4): 359-365. [В Посилання]

Метьюз, К. К. та Гл. (2013). Біохімія. 4-е видання. Редакційний Пірсон. [В Посилання]

Мюррей, Р. К. та співавт. (2015). ГАРПЕР. Ілюстрована біохімія. 29-е видання. Макгроу Хілл. [В Посилання]

Нельсон, Д. Л. та М. М. Кокс (2014). Ленінгер. Принципи біохімії. 6-е видання. Редакційна Омега. [В Посилання]

Новоа-Херн, Сандра С. (2011). IGF-II стимулює активність MMP-9 та MMP-2 в моделі трофобластів людини. Acta Biologica Colombiana 16 (1): 121-132. [В Посилання]

СЕБІЯ (2015). Електрофорез в агарозному гелі. Білок Hydragel 7 (E). Посилання 4100 [В ПосиланняВ]

Stryer, Lubert (2015). Біохімія з клінічним застосуванням. Т. I та II. 7-е видання. Редакційний Reverte. [В Посилання]

Тодорович, Дозіч I та ін. (2006). Ферменти слини та захворювання пародонту. Med Oral Patol Oral Cir Bucal 2012; 11: 115 - 119. [В Посилання]

Отримано: 03 вересня 2016 р .; Затверджено: 14 жовтня 2016 року

В Це стаття, опублікована у відкритому доступі під ліцензією Creative Commons