Текст завершено

(1) ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO НАУКОВИЙ ФАКУЛЬТЕТ ШКОЛА БІОХІМІЇ ТА ФАРМАЦІЇ. "ПЕРЕВІРКА ЕФЕКТУ ВИСУШЕННЯ НАСТАНОВКИ ГВАЮСИ (Ilex guayusa) НА МИШАХ (Mus musculus) З ІНДУКЦІЄЮТЬСЬ НАДАНОЮ ВАГОЮ". СТУПЕНЬ ТЕЗІВ ПЕРШИЙ ДО ОТРИМАННЯ СТУПЕНЮ. ФАРМАЦЕВТИЧНА БІОХІМІЧНА ПРЕДСТАВЛЕНА:. АНА ГАБРІЕЛА ПАЧА ДЖАРА РІОБАМБА - ЕКВАДОР. 2012 рік.

схуднення

(2) ПОСВІТЛЕННЯ Богові та моїм батькам Луїсу та Елізі з великою любов’ю та прихильністю, оскільки вони були основою мого життя та моєю безумовною підтримкою у будь-який час для досягнення всіх моїх цілей. Моїй мамі Флорі за те, що я була частиною мого життя і за те, що піклується про мене. Моїм братам, Даріо, Евелін, Дженет, Маурі та Густаво, за те, що вони постійно підтримували мене. буття. мій. друзі,. Ю. радники. Моєму племіннику Едісону за те, що він моя радість . моя.

(3) ДЯКУЄМО Богові за те, що Він дав мені існування і є моєю силою. в. . моменти. плюс. важко,. тим самим дозволяючи мені дійти до кінця гонки. До. Школу. Вища. Політехнічний. з. Чимборасо за академічну підготовку, яку він мені дав. Дра. Сусана Абдо та Бкф. Фаусто Контеро, який постійно керував проведенням цього дослідження. Аль Бкф. Дієго Вінуеса та доктора Карлоса Піламунги за їх цінні співпраці та поради у виконанні цієї дипломної роботи. Усій моїй родині за безумовну підтримку. Моїм друзям за те, що вони завжди підтримували мене і пропонували щиру дружбу.

(4) ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO НАУКОВИЙ ФАКУЛЬТЕТ ШКОЛА БІОХІМІЇ І ФАРМАЦІЇ Дисертаційна комісія засвідчує, що: Дослідницька робота: „ПЕРЕВІРКА ВПЛИВУ ЕФЕКТУ ТИНКТУРИ ГВАЮСА” (Ilex guayusa). МИШИ. (Mus. Musculus). З. ПЕРЕВАГА. ІНДУКЦІЙНИЙ,. з. відповідальність випускниці Ана Габріели Пача Хара, була ретельно розглянута членами дипломного трибуналу, і його подання дозволено. Доктор Сільвіо Альварес. ДАТА. __________________. _______________. __________________. _______________. __________________. _______________. __________________. _______________. __________________. _______________. ДЕКАН ФАЦ. НАУКИ. Д-р Іван Рамос ДИРЕКТОР ШКОЛИ. Дра. Сусана Абдо ДИРЕКТОР РОБОТИ. Bqf. Fausto Contero ЧЛЕН СУДУ. Atty. Карлос Родрігес ДИРЕКТОР ЦЕНТРУ ДОКУМЕНТАЦІЇ. НАПИСАНА ПРИМІТКА ДО РОБОТИ. ______________________.

(5) Я, Ана Габріела Пача Джара, відповідаю за ідеї, доктрини та результати, представлені в цій дипломній роботі; а інтелектуальна спадщина дипломної роботи належить ПОЛІТЕХНІЦІЙ ВИЩІЙ ШКОЛІ ЧИМБОРАЗО. ________________________________________ АНА ГАБРІЕЛА ПАЧА ДЖАРА.

(6) ПОКАЗНИК СКОРОЧЕНЬ *. Статистично значуща різниця. ° С Градуси Цельсія. мкг мікрограм. мкл. мікролітр. Б . Бацила. см. сантиметр. LD50 Середня летальна доза Е . Ешерихія. ЄС. Бульйон від кишкової палички. g. грам Високоефективна хроматографія ВЕРХ, кг, кілограм. Л. Літр. ФУНТ. Ліберманн-Бухард. м.сн.м метрів над рівнем моря хв. хвилини. мг міліграм. мл. мілілітр. Н.А. Не застосовується. нм. нанометр. MPN Найімовірніше число проміле. Частка на мільйон. Пр. А. Тест на гіркі принципи УФ. Ультрафіолет. i.

(7) ПОКАЗНИКИ. ПОКАЗНИК СКОРОЧЕНЬ. x ЗАГАЛЬНИЙ ПОКАЗНИК. xivi ПОКАЗНИК ТАБЛИЦ. xiii ПОКАЗНИК ТАБЛИЦ. xiv ПОКАЗНИК ФІГУР. xx ПОКАЗНИК ФІГУР. xxi ПОКАЗНИК ФОТОГРАФІЙ. xivii ПОКАЗНИК ДОДАТКІВ. xxiii ВСТУП. РОЗДІЛ I. 1 1 . ТЕОРЕТИЧНА КАДР. 1. 1.1. Надмірна вага та ожиріння. 1. 1.1.1. Визначення. 1. 1.1.2. Класифікація. 2. 1.1.2.1. За надлишковою масою тіла. 2. 1.1.2.2. За розподілом маси тіла. 2. 1.1.3. Фактори ризику . 3. 1.1.4. Фактори супутньої захворюваності, пов'язані з ожирінням. 4. 1.1.5. Механізми контролю апетиту та маси тіла. 5 ii.

(8) 1.1.6. Лікування ожиріння та надмірної ваги. 5. 1.1.6.1. Основне лікування. 5. 1.1.6.2. Фармакотерапія. 5. 1.1.6.2.1 Препарати, що пригнічують апетит. 7 1.1.6.2.2 Препарати, що регулюють поглинання поживних речовин. 8 1.1.6.2.3 Препарати, що стимулюють термогенез. 10 1.1.6.3. Хірургічне лікування ожиріння. 11. 1.2. Рослини для схуднення. 12. 1.2.1. Концепція. 12. 1.2.2. Рослини з термогенною активністю. 12. 1.2.2.1. Зелений чай (Camellia sinensis). 12. 1.2.2.2. Мате (Ilex paraguariensis). 13. 1.2.2.3. Гуарана (Paullinia cupana). 14. 1.2.3. Лікарські рослини, що знижують апетит. 14. 1.2.3.1. Худія (Hoodia gordinii та Hoodia pilifera). 14. 1.2.3.2. Гіркий апельсин (Citrus aurantium). 15. 1.2.4. Рослини з діуретичною активністю. 15. 1.2.4.1. Ортосифон (Ortosiphon stamineus). 15. 1.2.4.2. Хвощ (Equisetum arvense). 16. 1.2.4.3. Артишок (Cynaras colimus). 16. 1.2.5. Рослини, що стримують ліпогенез. 17. 1.2.5.1. Гарцинія (Garcinia cambogia). 17. 1.2.6. Насичувальні та поглинаючі рослини. 17. 1.2.6.1. Глюкоманнан. 17. 1.2.6.2. Плантаго (Plantago spp.) ………………… . ……………… . ………………. 18. 1.2.6.3. Фуко (Fucus spp.). 18 iii.

(9) 1.2.6.4. Квасоля (Phaseolus vulgaris). 19. 1.2.6.5. Гімнема (Gymnema sylvestre). 19. 1.3. Гуаюса. 19. 1.3.1. Концепція. 19. 1.3.2. Ботанічний опис. 20. 1.3.3. Таксономічні дані. 20. 1.3.4. Морфологічні дані. 20. 1.3.4.1. Звичайне ім'я . 20. 1.3.4.2. Середовище існування. 20. 1.3.4.3. Розмір виду. 20. 1.3.4.4. Стовбур. 20. 1.3.4.5. Листя. 21. 1.3.4.6. Квітка 21. 1.3.4.7. Фрукти 21. 1.3.5. Медичне використання. 22. 1.3.6. Основні компоненти Ilex guayusa. 22. 1.3.7. Культура та традиції. 24. 1.4. Кофеїн 24. 1.4.1. Концепція. 25. 1.4.2. Історія. 27. 1.4.3. У природі і синтетичні вироби. 30. 1.4.4. Хімічні властивості. 31. 1.4.5. Фармакологія. 31. 1.4.6. Метаболізм та період напіввиведення. 33. 1.4.7. Механізм дії. 35. 1.4.8. Цілющі властивості кофеїну. 37 iv.

(10) 1.4.9. Обмін кофеїну та жиру. 37. 1.4.10. Метаболізм кофеїну. 38. 1.4.11. Чутливість до кофеїну 39. 1.4.12. Негайні наслідки кофеїну. 39. 1.4.13. Кофеїн і здоров'я. 39. 1.4.14. Безпечне дозування. 40. 1.4.15. Побічні ефекти кофеїну та запобіжні заходи. 40. 1,5. Дослідні тварини. 41. 1.5.1. Миша (Mus musculus). 41. 1.5.1.1. Таксономія. 41. 1.5.1.2. Переваги використання його як лабораторної тварини. 41. 1.5.1.3. Недоліки. 41. 1.5.1.4. Загальна характеристика. 42. 1.5.1.5. Поведінка миші. 43. 1.6. Настоянка 45. РОЗДІЛ II. 45 2 . ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА ЧАСТИНА. 45. 2.1. Місце дослідження. 45. 2.2. Матеріали, обладнання та реактиви. 47. 2.2.1. Біологічний матеріал. 47. 2.2.2. Лабораторні матеріали. 49. 2.2.3. Обладнання. 49. 2.2.4. Реагенти 49. 2.3. Прийоми та методи. 49. 2.3.1. Контроль якості сировини. 50. 2.3.1.1. Визначення вмісту вологи. 52v.

(11) 2.3.1.2. Визначення загальної золи. 52. 2.3.1.3. Визначення водорозчинної золи. 52. 2.3.1.4. Визначення золи, нерозчинної у соляній кислоті. 53. 2.3.1.5. Фітохімічний скринінг. 54. 2.3.1.5.1 Судовий процес. 54 2.3.1.5.2 Випробування Балджета. 55 2.3.1.5.3 Тест Лібермана-Бухарта. 55 2.3.1.5.4 Тест Драгендорфа. 56 2.3.1.5.5 Тест Майєра. 56 2.3.1.5.6 Тест Вагнера. 56 2.3.1.5.7 Випробування смоли. 56 2.3.1.5.8 Тест Фелінга. 56 2.3.1.5.9 Випробування пінопласту. 57 2.3.1.5.10 Аналіз хлориду заліза (FeCl3). 57 2.3.1.5.11 Аналіз нінгідрину. 57 2.3.1.5.12 Аналіз Борнтрейгера. 58 2.3.1.5.13 Тест на Шиноду. 58 2.3.1.5.14 Тест Кедде. 58 2.3.1.5.15 Аналіз антоціанідину. 59 2.3.1.5.16 Аналіз слизу. 59 2.3.1.5.17 Аналіз катехіну. 59 2.3.1.5.18 Перевірка гірких принципів. 59 2.3.2. Приготування настоянки гуаюси (Ilex guayusa). 60. 2.3.3. Контроль якості настоянки гуаюса. 60. 2.3.3.1. Органолептичне визначення гідроалкогольного екстракту. 60. 2.3.3.2. Визначення фізико-хімічних показників фарбування. 60 пила.

(12) 2.3.3.2.1 Визначення показника заломлення. 61 2.3.3.2.2 Визначення відносної щільності. 62 2.3.3.2.3 Визначення рН. 63 2.3.3.3. Визначення забруднюючих мікроорганізмів. 63. 2.3.3.3.1 Метод підрахунку загальних мезофільних аеробів на пластині. 63 2.3.3.3.2 Визначення загальної кількості коліформ. 65 2.3.3.3.3 Визначення калічних коліформ. 65 2.3.3.3.4 Метод підрахунку форми для пластин. 66 2.3.4. Екстракція кофеїну. 67. 2.3.5. Вилучення загальних алкалоїдів. 68. 2.3.6. Аналіз. хроматографічний. з. високий. ефективність. (ВЕРХ). кофеїну. видобуто ……………………………………………………………………… .69 2.3.7. УФ-спектрофотометричний аналіз вилученого кофеїну. 70. 2.3.8. Тонкошаровий хроматографічний аналіз вилученого кофеїну (ТШХ). 71. 2.3.9. Діяльність гуаюси для схуднення (Ilex guayusa). 71. РОЗДІЛ III. 73 3 . Результати та обговорення. 73. 3.1. Контроль якості сировини. 73. 3.1.1. Визначення вологості. 74. 3.1.2. Визначення загальної золи. 75. 3.1.3. Визначення водорозчинної золи. 75. 3.1.4. Визначення золи, нерозчинної у соляній кислоті. 75. 3.1.5. Фітохімічний скринінг. 76. 3.2. Контроль якості настоянки гуаюси (Ilex guayusa). 76. 3.2.1. Органолептичне визначення гідроалкогольного екстракту. 76. 3.2.2. Визначення фізико-хімічних показників фарбування. 77 vii.

(13) 3.2.3. Кількісне визначення кофеїну в барвнику методом хроматографічного аналізу ефективності (ВЕРХ). 78. 3.2.4. Визначення забруднюючих мікроорганізмів. 79. 3.3. Екстракція кофеїну. 79. 3.3.1. Тонкошаровий хроматографічний аналіз вилученого кофеїну (ТШХ). 80. 3.3.2. УФ-спектрофотометричний аналіз вилученого кофеїну. 81. 3.3.3. Аналіз високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) вилученого кофеїну ……………………………………………………………………… .82. 3.4. Активність настоянки гуаюси для схуднення (Ilex guayusa). 83. РОЗДІЛ IV. 89 4 . Висновки. 89. ГЛАВА V. 91 5 . Рекомендації. 91. РОЗДІЛ VI. 92 6 . Короткий зміст та підсумок. 92. РОЗДІЛ VII. 94 7 . Бібліографія. 94. РОЗДІЛ VIII. 104 8 . Додатки ……………………………. ………………………………………… .104. viii.

(15) ПОКАЗНИК ТАБЛИЦ. ТАБЛИЦЯ № 1. Клінічна класифікація ожиріння ……………………. ……… . 2. ТАБЛИЦЯ № 2. Обхват талії/ризик метаболічної патології….…. 3. ТАБЛИЦЯ № 3. Основні захворювання, пов’язані з ожирінням ………………. 4. ТАБЛИЦЯ № 4. Ідеальні характеристики препарату для лікування ожиріння …………………………… . ………………… . ………… . 6. ТАБЛИЦЯ № 5. Вміст кофеїну в деяких продуктах харчування та наркотиках…. …… .…. 29. ТАБЛИЦЯ № 6. Таксономія експериментальних тварин, що використовуються у фармакологічному дослідженні ……………………………………… . …… . 46. ТАБЛИЦЯ № 7. Анатомічний опис ……… …… . ……………………………. 46. ​​ТАБЛИЦЯ № 8. Детальна інформація про умови обслуговування ………… . ……………. 46. ​​ТАБЛИЦЯ № 9. Інтерпретація МПН для визначення загальної кількості коліформ ................................. ………. 64. ТАБЛИЦЯ № 10. Опис експериментальної конструкції ……………………………. 71. ТАБЛИЦЯ № 11. Правила контролю якості вологості ………….…. 73. ТАБЛИЦЯ № 12. Нормативи контролю загальної якості золи ……………. 74. х.

(16) ПОКАЗНИК ГРАФІКІВ. ГРАФІК № 1. Крива абсорбції порівняно зі стандартною концентрацією кофеїну для кількісного визначення кофеїну, вилученого з рослини гуаюса та комерційного чаю гуаюса… . ………………. ………… . ………… . ГРАФІК № 2. 81. Крива варіації ваги у порівнянні з часом під час введення процедур …………………………… . …………… ……. 87. xi.

(17) ПОКАЗНИК ФІГУР. РИСУНОК № 1. Структура кофеїну. ……………………… . ……… . …………. 30. РИСУНОК № 2. Обмін кофеїну….… . ……………………… . …………. 31. РИСУНОК № 4. Фітохімічний скринінг ……………………………………………………. 53. xii.

(18) ПОКАЗНИК ФОТОГРАФІЙ. ФОТОГРАФІЯ № 1. Тонкошарова хроматографія гуаюси (Ilex guayusa) . 80. ФОТОГРАФІЯ № 2. Екстракція хлороформу в роторному випарнику ……………….…. 104. ФОТОГРАФІЯ № 3. Кристали кофеїну ………. …………………………….…. 104. ФОТОГРАФІЯ № 4. Аналіз для ідентифікації алкалоїдів ……. ………. … . 105. ФОТОГРАФІЯ № 5. Тест на ідентифікацію загальних цукрів ……………. 105. ФОТОГРАФІЯ № 6. Тест на ідентифікацію загальних цукрів ……………. 105. ФОТОГРАФІЯ N ° 7. Приглушити …………………. ……………. ……………. ………… . 106. ФОТОГРАФІЯ № 8. Ексикатор ………………………………… .…. ………………. 106. ФОТОГРАФІЯ N ° 9. pH-метр ……………………………. ………………………… . 106. ФОТОГРАФІЯ № 10 Спектрофотометр ……………………… … ………………. 106. ФОТОГРАФІЯ № 11 Біла група …………………………………………………. 107. ФОТОГРАФІЯ № 12 Вішалка з різними навчальними групами …………… .…. 107. ФОТОГРАФІЯ № 13 Позитивна контрольна група ………………………………. ………. 107. xiii.

(19) ІНДЕКС ДОДАТКІВ. ДОДАТОК № 1. Екстракція кофеїну ……… . ………………… . ………. 104. ДОДАТОК № 2. Фітохімічний скринінг …………… . ………………. …… . 105. ДОДАТОК № 3. Використовуване обладнання ……. …………………. ………….…. 106. ДОДАТОК № 4. Дослідні тварини …………………………….…. 107. ДОДАТОК № 5. Дані про вагу мишей на етапі відгодівлі…. 108. ДОДАТОК № 6. Дані про вагу мишей на етапі проріджування. …………………………………………………. ДОДАТОК № 7. Доза введення різних процедур для схуднення ………………………… . ……………………… . ДОДАТОК № 8. ДОДАТОК № 9. 109. 110 Обсяги введення різних процедур для схуднення ………………………………………………………. 111. Хроматограми ВЕРХ з кофеїном ………………………. 112. xiv.

(22) Завданнями було перевірити ефект схуднення настоянки гуаюси (Ilex guayusa) на мишах (Mus musculus) з індукованою надмірною вагою, на додаток до спостереження цього ефекту під впливом екстракту, багатого алкалоїдами гуаюса. З цієї причини знання про те, що кофеїн є активним інгредієнтом, який допомагає схуднути, було включено і що він присутній майже у всіх продуктах, які використовуються для цієї мети. Дослідження проводилось у місті Ріобамба, на факультеті наук Вищої політехнічної школи Чимборасо. Наступною метою було проведення контролю якості сировини та препарату гуаюса (Ilex guayusa) з метою перевірки що рослина була належним чином зібрана та забезпечила її безпеку для споживання. І як останню мету було проведено кількісне визначення кофеїну чаю та рослини гуаюса, а також було визначено ефект схуднення настоянки гуаюси при введенні мишам із надмірною вагою, індукованих різними дозами протягом трьох тижнів.

(23) -1-. ГЛАВА I. 1. ТЕОРЕТИЧНА КАДР. 1.1 Надмірна вага та ожиріння. 1.1.1 ВИЗНАЧЕННЯ. Надмірна вага та ожиріння визначаються як ненормальне або надмірне накопичення жиру, яке може завдати шкоди здоров’ю. (54). Надмірна вага - це збільшення маси тіла; Ожиріння - це збільшення розміру або кількості жирових клітин, достатнє для шкоди здоров’ю людини. З епідеміологічної точки зору використовується розрахунок індексу маси тіла (ІМТ) або індексу Кветле, який є відношенням між вагою (кг), поділеною на зріст (у метрах) у квадраті (кг/м2). Цей показник дуже добре корелює з кількістю жиру в організмі, хоча він має певні обмеження, такі як ті, які не враховують вік, стать та зріст як змінні, які слід враховувати. Однак у всьому світі цей показник використовується як найбільш підходящий для порівняння різних груп населення або клінічних досліджень. Поточна класифікація ожиріння завжди посилається на ІМТ, де ми можемо легко відрізнити осіб із нормальною вагою від тих, хто має надлишкову вагу та має різний ступінь ожиріння. (16), (62).