Мікробіологічна діагностика ГРВІ-CoV-2 - вірусу, що викликає COVID-19 - є важливою для лікування окремого захворювання, а також для його передачі в умовах пандемії.

Вказівки щодо охорони здоров’я вказують, що всі підозри на випадки зараження ГРВІ-CoV-2 зазнають ПЛР (або інший метод молекулярної діагностики, який визнано доцільним) протягом перших 24 годин. Однак також необхідні швидкі, прості та ідеально високі тести чутливості та точності, які можна проводити у великих масштабах. Метою є рання діагностика для кращого ведення та моніторингу пацієнтів, а також застосування заходів профілактики та епідеміологічного нагляду.

Підозрюваним випадком зараження ГРВІ-CoV-2 вважається будь-яка людина з клінічною картиною раптової гострої респіраторної інфекції будь-якого ступеня тяжкості, що протікає з температурою, кашлем або задишкою. Слід також враховувати пацієнтів із тяжкими захворюваннями нижніх дихальних шляхів без чітких причин. Інші підозрілі симптоми включають міалгію, діарею та нюхові або смакові відхилення.

Вам потрібно пройти діагностичний тест для виявлення Covid-19? Ви можете записатися на зустріч вже зараз у найкращих центрах.

Ви сумніваєтесь? Зареєструйтесь зараз у Савії та безкоштовно спілкуйтеся з нашими медичними спеціалістами за допомогою чату чи відеоконсультації.

covid-19

RT-PCR

RT-PCR або ПЛР - полімеразна ланцюгова реакція (для її абревіатури англійською мовою) - на сьогоднішній день є основним методом діагностики COVID-19.

Це найбільш чутливий і надійний тест з доступних методів. Щоб отримати результат, потрібно 2-4 години. Це може бути позитивним (наявність вірусу у зразку) або негативним (відсутність вірусу).

З чого воно складається

Ця лабораторна процедура дозволяє копіювати невелику кількість ДНК мільйони разів, щоб було достатньо її виявити.

Однак вірус SARS-CoV-2 не містить дволанцюжкової ДНК як генетичного матеріалу, а навпаки одноцепочкову РНК. Оскільки тести ПЛР можуть зробити лише копії ДНК, спочатку РНК потрібно перетворити на ДНК. Ця дія здійснюється за допомогою ферменту, званого зворотною транскриптазою (RT), який перетворює одноланцюгову РНК у дволанцюгову ДНК. Вірусну ДНК додають у пробірку разом із необхідними реагентами, такими як праймери (короткі ділянки ДНК, призначені для зв’язування з вірусом), і нуклеотиди (молекули, що складають генетичний матеріал), і фермент, що утворює ДНК. Нарешті, флуоресцентні барвники, додані в пробірку, зв’язуються із скопійованою ДНК, збільшуючи її флуоресценцію, що дозволяє підтвердити наявність вірусу в зразку і, отже, зараження людини.

Коли вірусу немає у зразку, барвники не збільшують його флуоресценцію, і тест буде негативним.

Біологічні зразки для випробувань

Найбільш часто використовувані зразки для діагностики COVID-19 - це зразки носоглотки, які забезпечують більш високий урожай, та орофарингеальні. Відбір проби у вигляді мазка або ексудату проводять тампоном. Однак також вдалося отримати позитивні результати щодо ГРВІ-CoV-2 у недихальних зразках: сечі, калі та крові.

Обмеження тесту

Хоча тести ПЛР є найнадійнішим способом перевірити наявність вірусу SARS-CoV-2, вони також мають обмеження.

Перш за все, RT-PCR проводиться в лабораторіях клінічної мікробіології та вимагає спеціалістів з питань молекулярної мікробіології та заходів з біобезпеки.

З іншого боку, для отримання результатів потрібно кілька годин. Це обмежує кількість випробувань, які може провести лабораторія. Тому впроваджуються швидкі ПЛР-тести, які дозволяють проводити до 1200 тестів на день за допомогою автоматизованої процедури.

Іншим обмеженням є наявність необхідних реагентів, особливо в ті часи, коли глобальний попит на ці випробування викликав дефіцит.

Забруднення або деградація також може спричинити проблеми з помилковими спрацьовуваннями (коли у вас немає вірусу, але тест є позитивним) або помилковими негативними результатами (коли у вас є вірус, але тест негативний).

Іншим основним обмеженням цього типу тесту є те, що він може свідчити лише про наявність вірусу під час тесту. Це не вказує, чи був вірус уже перенесений і чи вже відновлений, а також наскільки заразним може бути пацієнт.

Нарешті, негативний результат тесту не виключає можливості зараження ГРВІ-CoV-2.

Вам потрібно пройти діагностичний тест для виявлення Covid-19? Ви можете записатися на зустріч вже зараз у найкращих центрах.

Ви сумніваєтесь? Зареєструйтесь зараз у Савії та безкоштовно спілкуйтеся з нашими медичними спеціалістами за допомогою чату чи відеоконсультації.

Тест на основі реакції антиген-антитіло

В даний час існує кілька тестів, заснованих на реакції антиген-антитіло. В основному є два типи: такі, які виявляють антигени вірусу або білки (тест антигенний) та ті, які виявляють антитіла - такі як імуноглобулін IgM або IgG - у людини (серологічний тест).

Загалом, це якісні тести, які дають лише позитивні чи негативні результати.

Основними методиками, на яких базується виявлення антигенів та антитіл, є:

  • Методи непрямої аглютинації
  • Імунофлюоресценція.
  • Імуноферментний аналіз.
  • Контрімуноелектрофорез.
  • Люмінометричні методи.
  • Імунохроматографія.

З них найпоширенішими в діагностиці вірусу SARS-CoV-2 є імунохроматографія (для швидких тестів) та імуноферментні аналізи (ІФА) для багатолабораторних аналізів.

Антигенний тест

З чого воно складається

Тест полягає у виявленні білків (антигенів) на поверхні вірусу.

При антигенних тестах позитивний результат означає, як і при ПЛР, наявність вірусу у зразку. Як ПЛР, так і антигенний тест дають конкретний діагноз на початковій фазі спалаху.

Біологічні зразки для випробувань

Обмеження тесту

Серологічний тест

З чого воно складається

Він складається з виявлення антитіла які виробляють захисні сили організму. Імуноглобулін М (IgM) першим з’являється при будь-якій інфекції. Вони виникають приблизно через сім днів, тому такий тип діагностики не настільки ефективний на початку зараження.

На додаток до IgM, в зразку крові, сироватки або плазми крові також виявляється наявність іншого антитіла, IgG проти SARS-CoV-2.

У випадку ІФА (імуноферментний аналіз) він виявляє антитіла, що утворюються в крові пацієнта внаслідок зараження ГРВІ-CoV-2. Для проведення тесту біологічний зразок осідає разом з реагентами (антитілами, антигенами та ферментами), які змінюють колір від реакції, що виробляється.

Час проведення цього типу тестів зазвичай займає від 1 до 3 годин.

Зазвичай такі типи тестів рекомендуються як доповнення до ПЛР, але в ситуаціях, коли необхідний масовий розподіл тестів, вони дуже допомагають виявити безсимптомні або легкі випадки.

Біологічні зразки для випробувань

Тест проводиться на зразку крові.

Обмеження тесту

Антитіла ще не були вироблені на початку зараження, тому це не є ефективним тестом на цій стадії.

Вам потрібно пройти діагностичний тест для виявлення Covid-19? Ви можете записатися на зустріч вже зараз у найкращих центрах.

Ви сумніваєтесь? Зареєструйтесь зараз у Савії та безкоштовно спілкуйтеся з нашими медичними спеціалістами за допомогою чату чи відеоконсультації.

Швидкі тести

З чого воно складається

Він складається з невеликої поверхні, яка містить або антитіла, що розпізнають вірусні білки, у випадку антигенів, або молекули вірусів, які розпізнають антитіла, що генеруються нашим організмом, щоб захищати себе, у випадку серологічних.

Найбільш поширеними є імунологічні аналізи з бічним потоком на імунохроматографічні паперові смужки Вони працюють, розпізнаючи антитіла. Для цього у пацієнта беруть краплю крові, проколюючи палець, і поміщають у отвір приладу. Антитіла проти ГРВІ-CoV-2, які присутні у зразку, будуть захоплені. Це спричиняє зміну кольору в різних лініях, залежно від типу наявних антитіл (IgM, IgG або обох).

Біологічні зразки для випробувань

Крапля крові.

Обмеження тесту

Незважаючи на свою швидкість, цей тип тесту є менш надійним, ніж ПЛР, тому він доповнюється цією методикою, якщо результат негативний або сумнівний.

Бібліографія

  • Менделл, Дуглас і Беннет. Інфекційні захворювання. Респіраторні та серцево-судинні інфекції. Elsevier, 2015 рік.
  • Діагностика, нагляд та стратегія контролю на перехідній фазі пандемії COVID-19. Показники моніторингу. Інститут охорони здоров’я імені Карлоса III. Міністерство охорони здоров'я. Оновлено 12 травня 2020 р.
  • Інтерпретація діагностичних тестів на ГРВІ-CoV-2. Інститут охорони здоров’я імені Карлоса III. Міністерство охорони здоров'я. 24 квітня 2020 р. Версія 2.
  • Група експертів SEIMC для аналізу мікробіологічної діагностики COVID-19. Позиційний документ SEIMC щодо мікробіологічного діагнозу CIVID-19.
  • Carter LC та співавт. Методи аналізу та розробка тестів для діагностики COVID-19. ACS Central Science Article ASAP. DOI: 10.1021/acscentsci.0c00501.
  • Всесвітня організація охорони здоров'я. Лабораторне тестування на випадки захворювання на віруси корнавірусу (COVID-19). Тимчасове керівництво 19 березня 2020 р.
  • Іспанська федерація компаній з охорони здоров'я. COVID-19: типи тестів для діагностики та скринінгу. https://www.fenin.es/. Відвідано 15.05.2020

Ви сумніваєтесь? Зареєструйтесь зараз у Савії та безкоштовно спілкуйтеся з нашими медичними спеціалістами за допомогою чату чи відеоконсультації.


Завантажте інфографіку Covid-19 Test


Завантажте інфографіку Результати та рекомендації тесту Covid-19

Тест Ковіда
Тест на коронавірус
Серологічний тест Covid
ПЛР-тест Covid