Молекулярний біолог Любоміра Тотова з Братиславського університету Карла шукає симптоми слини у своїй слині. Він каже, що пролити в чашку простіше, ніж взяти або взяти мазок. Тому тести слини вигідні не тільки для швидкого тестування на коронавірус, але й для пацієнтів з хронічними захворюваннями.
В інтерв’ю ви також можете прочитати:
- які тести на слину на коронавірус вже використовуються і які тести розробляють словацькі дослідники;
- які переваги та недоліки такого тестування;
- які захворювання ми вже зазвичай можемо виявити зі слини;
- чому перед тестом не потрібно цілуватися чи користуватися помадою.
Ви можете прочитати цю статтю завдяки ESET Science Award - нагороді, яка підтримує виняткову науку в Словаччині.
Що таке слина і які речовини в ній містяться?
Слина - це складна біологічна рідина, яка в основному складається з води, але вона також містить електроліти, муцини та ферменти, що полегшують ковтання та перетравлення їжі, протимікробні засоби для захисту організму, різні низькомолекулярні речовини, а також ДНК. Але є також бактерії, віруси та залишки їжі.
Які переваги діагностики зі слиною, наприклад, перед кров’ю?
Забір крові для багатьох є дуже стресовим, необхідно звернутися в кабінет до лікаря. З іншого боку, збір слини безболісний, його можна повторювати кілька разів протягом дня, це не створює проблем навіть для дітей або пацієнтів похилого віку. Крім того, споживання швидше і дешевше, його можна комфортно здійснювати навіть вдома. Слину можна легко зберігати та транспортувати.
Як працює колекція? Я плюю це в склянку і несу в лабораторію?
Це залежить від типу тесту. Вже є комерційні тести, в яких ви просто плюєте в збірну трубку, в якій зазвичай підходить стабілізатор слини. Потім відправте пробірку в лабораторію, де буде проведена обробка зразка, і ви або ваш лікар отримаєте результати.
За кордоном та у Словаччині триває робота над розробкою тестів на слину коронавірусу, які могли б полегшити тестування. Як і при такому тестуванні, робота зі збору та обробки матеріалів?
Працюючи над розробкою тестів, ви пробуєте кілька варіантів, з яких нарешті вибираєте найбільш підходящий. Саму слину можна зібрати кількома способами: можна використовувати тампон, можна зібрати загальну слину або використовувати спеціальні тампони для смоктання. Кожен із цих варіантів має свої переваги та недоліки. В одному випадку недоліком є отримання невеликої кількості слини, в іншій частині слина занадто водна і біомаркер дуже розріджений в ній. Що стосується нового коронавірусу, то в більшості тестів використовується загальна кількість слини, тому відбір проб - це простий прохід у стерильну пробірку для збору. Для того, щоб цю пробу робити вдома, кілька дослідницьких груп розглядають можливість додавання відповідних стабілізаторів у пробірки для відбору проб.
Тести на швидкість слини можуть змінити боротьбу з пандемією. Вони можуть бути на ринку найближчим часом, каже науковець Чекан
Для чого потрібен стабілізатор?
Це речовина, яка захищає вірусну РНК від деградації. Це триває довше в слині, і вчені мають більше часу в лабораторії, щоб виділити та виявити її.
Як швидко вірус деградує поза організмом?
Це залежить від середовища, в якому він знаходиться. Кілька досліджень стосувались цього питання, але оскільки це новий вірус, ми ще не знаємо всього детально. На різних поверхнях, таких як ручка, може знадобитися кілька годин при правильній температурі та вологості.
Фото N - Томаш Бенедікович
Чому тестування слини з’являється саме зараз, і це не був перший варіант?
Оскільки вірус SARS-CoV-2 переважно заселяє дихальні шляхи, природно, що перші тести були зосереджені на надійному джерелі вірусу. Вважається, що саме тут присутня кількість, придатна для виділення вірусної РНК. У той же час це була стандартизована методологія, яка також працює при респіраторних інфекціях з іншими вірусами, такими як грип. Однак під час пандемії важливі безпека самого тестування, простота, неінвазивність, швидкість збору, а також фінансові вимоги, а тому тестування нового слинного коронавірусу наразі є актуальним.
У конспіративних колах часто згадують, що мазки порушують мембрану на шляху до мозку. Якби це було метою, тоді нові неінвазивні тести, ймовірно, не розроблялися б?
Це справді теорії змови в тому сенсі, що якщо ти хочеш щось знайти, ти знайдеш це. Стерин береться у вашого медичного персоналу. Вони знають, що роблять, їх навчають і тренують для цього. Підписка дратує, і багатьом людям доводиться проходити її неодноразово. Ось чому науковий світ шукає альтернативи, щоб максимально полегшити для нас пандемію. Слина також має величезну перевагу в тому, що якби такий тест був успішним і схваленим, пацієнту теоретично навіть не довелося б приходити на місце збору. Він міг робити це в комфорті свого будинку і ризикувати зараженням інших під час тестування. Або очікування в черзі, якщо він раніше був негативним.
Десь у світі використовується тест на коронавірус слини?
Декілька тестів на коронарний вірус слини вже затверджені FDA, один з яких можна замовити приблизно за 120 доларів.
Тест слини настільки ж чутливий до коронавірусу, як і мазок?
Цей затверджений тест базується на тому ж методі ПЛР, що і мазки, тому по суті так. Питання в тому, коли в слині достатньо вірусного матеріалу. З новим коронавірусом ви тривалий час були безсимптомними, і тоді кількість частинок вірусу може бути недостатньою. Тому потрібно знати, в який період найкраще робити тест.
Аналізи слини приємніші для пацієнта, ніж мазки з горла та носа. Фото - TASR/AP
Як швидко ми можемо отримати результати цих тестів порівняно з мазками?
Використовуючи той самий метод, час залишається таким же, як і для поточних мазків, тобто кілька годин. Однак вже є нові дослідження, які перевіряють так званий метод LAMP. У цьому методі зразок слини можна використовувати безпосередньо для аналізу, не виділяючи вірусну РНК. Якби такий тест можна було перевірити та затвердити, ми знали б результат протягом тридцяти хвилин.
У Словаччині вже розробляються випробування за методом LAMP?
Так, кілька колег та студентів під керівництвом доцента Целеки працюють над ними в нашому інституті у співпраці з доктором Клемпом та професором Пасторековою з Біомедичного центру Словацької академії наук. Тож нам слід дійти до цього і в Словаччині.
Скільки слини потрібно для такого тесту?
Якщо ми хочемо виділити РНК вірусу, скажімо мілілітр. Якщо можна ввести новий метод LAMP, це ще менша кількість - кілька мікролітрів. Це приємно, адже ні у дитини, ні у літньої людини такої проблеми немає. Лише пацієнти, що не співпрацюють, мають проблеми з цим вчинком.
Таким чином, у чому переваги методу LAMP перед ПЛР, що застосовувався до цього часу?
Окрім скорочення часу та меншої кількості слини, це також метод оцінки, для якого вам не потрібно таке дороге обладнання, як при самому методі ПЛР. Тож це, мабуть, було б доступнішим, дешевшим та швидшим.
Які недоліки тестування слини?
До недоліків можна віднести обробку самої проби, що може бути складніше порівняно з кров’ю. Наприклад, лише рН слини може дати вам хибнопозитивний або негативний результат. Або вміст слини, наприклад, різних ферментів, які можуть погіршити вірус тощо. Створення надійного тесту непросте, тому воно все ще перебуває на стадії тестування.
Коли такі тести можуть бути доступні у Словаччині?
Окрім Словаччини, над цим працює весь світ, дослідження та інформація про новий коронавірус швидко розвиваються. Я думаю, що це питання дуже короткого часу.
Загальноприйнятим явищем є пошук вірусів у слині поза пандеміями?
В основному так. Хоча речовини, які ми контролюємо, перебувають у слині в дуже низьких концентраціях, завдяки технічному прогресу цього вже достатньо для аналізу. Тому тести слини для аналізу на ВІЛ або ВПЛ зараз є у продажу.
Omubomíra Tóthová в лабораторії. Джерело - архів Ľ. Т.
Як можна забруднити такий тест? Думаю, не доречно буде їсти, чистити зуби чи цілувати щось прямо перед ним.
Обмеження пов'язані з тим, що ми тестуємо в слині. Зазвичай ми рекомендуємо не їсти, не пити, не палити, не цілувати тощо, принаймні за годину до збору. Що ми також зрозуміли, наприклад, пізніше, це те, що помада також може забруднити зразок або наявність крові в слині. Зокрема, помада та кров слини не є проблемою для коронавірусу, але для інших біомаркерів це може бути проблемою.
Я можу робити такі тести на слину вдома, коли я можу зіпсувати це стільки речей?
Так, тести, які мають високу оцінку, містять класичну брошуру, в якій ви маєте покрокове пояснення щодо подальших дій. Якщо ви дотримуєтеся цього, ви можете зробити колекцію самостійно вдома. В іншому, крім тестів ДНК, які виявляють генетичні варіанти, пов’язані з ризиком захворювання, комерційно доступні також тести на наявність різних препаратів. Вони також легко оцінюються в результаті тесту, і їх може прочитати батько або поліцейський.
Ви в основному маєте справу з діагностикою розладів нирок. Які хвороби тут належать?
В принципі, сюди входять дві великі групи - гостра ниркова недостатність, коли функція нирок раптово порушується з різних причин, або хронічна ниркова недостатність, коли функція нирок також поступово погіршується з різних причин. Спільною рисою обох груп захворювань є підвищення рівня креатиніну та сечовини в крові. Оскільки часті забори крові пов’язані із серйозними ускладненнями для здоров’я, такими як інфекції або пошкодження судин, підходящою альтернативою є проста неінвазивна діагностика слини. Тому ми розпочали це дослідження з повною віддачею.
Він досліджує використання слини для діагностики захворювань. Ми хочемо, щоб пацієнт уникав болісних обстежень, каже вчений
Чим ви зараз займаєтесь у дослідженнях?
Пошук нових маркерів захворювання нирок, цього разу більше з метою ранньої діагностики. Іншими словами, ми хотіли б знайти біомаркер, який повідомляє нам, що нирки не працюють до того, як креатинін і сечовина почнуть підніматися в крові.
Чи вплинув ваш ішемічний криза на ваші дослідження як-небудь? Вам довелося призупинити або перенаправити деякі проекти?
Насправді ми втратили більшість студентів, які беруть участь у наших проектах. Тож ми були змушені вибрати найважливіші напрямки, які ми будемо розглядати. Перш за все, я продовжив планові дослідження на тваринах, щоб експериментальні тварини жодним чином не постраждали від коронарної кризи. Але кілька колег з інституту з самого початку інтенсивно займаються більш детальними дослідженнями ГРВІ-CoV-2, включаючи діагностику слини.
Минулого року ви отримали наукову премію Eset за свої дослідження, оскільки з того часу ваші дослідження рухаються?
Я б, мабуть, відповів вам інакше, якби не було коронарної кризи. В основному, ми намагалися наздогнати те, що планували. Потім ми писали публікації, щоб продовжувати наші основні дослідження. Після публікації компанії можуть зловити його та отримати такий неінвазивний тест на ринку.
Це допоможе вченому просунути таку нагороду, щоб трохи швидше просунути свої дослідження?
Кожна нагорода за вашу роботу певним чином рухатиме вас вперед. У нашій країні не настільки звично, що наукові роботи якимось чином висвітлюються чи оцінюються. Ось чому я думаю, що для кожного вченого, включаючи мене самого, це «удар» та підкріплення для подальшої наукової роботи. Приємно, що відбудеться ще один рік нагородження, і організатори продовжать цей проект, незважаючи на коронарну кризу.
Ви були лауреатом категорії Видатний молодий вчений до 35 років. Що робить цю категорію цікавою?
Для мене було винятково, коли я зміг об’єднати молодих вчених із абсолютно різних тем дослідження. Я їх навіть не знав, бо деякі наукові дисципліни вже не вкладаються в моє видошукач. Але коли ми познайомились, ми, природно, заговорили про наші дослідження, і навіть звернулись до кількох із них для співпраці. Він був відкладений через коронарну кризу, але я вірю, що ми знову його вдаримо, тому що в галузі наукових досліджень співпраця - це найважливіше.
Omubomíra Tóthová в лабораторії. Джерело - архів Ľ. Т.
У цінах переважали чоловіки - чому вчені були в меншості?
Це хороше питання, тому що я думаю, що у Словаччині у нас немає принципового дефіциту жінок у науці. Ймовірно, це також пов'язано з фінансовою оцінкою. Багато чоловіків можуть здатися і вибрати краще оплачувану роботу. Навіть у нашій конституції переважна більшість жінок є такими. Важко сказати, чому серед номінантів небагато жінок. Можливо, тут мало застосування, можливо, не всі відповідають критеріям, можливо, це ще й тому, що у віці 35 років жінки часто зосереджуються на сім’ї. Я вірю, що з часом їх буде більше.
У яких аспектах жінки, що займаються науковою кар'єрою, перебувають у невигідному положенні порівняно з чоловіками?
Незалежно від статі, професія вченого займає багато часу. Навіть якщо ви перебуваєте не безпосередньо в лабораторії, ваша робота на цьому не закінчується. Потрібно багато читати, в ідеалі постійно вчитися, їздити на конференції, стажування за кордон тощо. Поєднати ці речі з сім’єю дуже важко. Ми, жінки, настільки чутливіші до цього, і я, мабуть, сприймаю це як найбільший недолік. Особисто я все ще відчуваю, що нічого не можу зробити. Крім того, у нашій країні досі поширено, що жінка перебуває у батьківській відпустці, порівняно, наприклад, зі Швецією, де батько часто проводить на ній рік. Але інакше я не бачу в цьому великої різниці між Словаччиною та закордоном. У Словаччині ми маємо інші проблеми в науці.
Що, на вашу думку, є найбільшою проблемою?
Ми вже давно переживаємо надзвичайний бюрократичний тягар. Це незрівнянно із зарубіжними країнами і позбавляє нас часу, який ми могли б присвятити науковим дослідженням. Навіть під час цієї коронарної кризи стає ясно, наскільки вирішальним є час. Це нас стримує, і ми говоримо про це роками.
Ці процеси можна певним чином пришвидшити або, що є звичною практикою за кордоном?
Я можу порівняти це зі США та Швецією. Якщо вам потрібні були якісь хімікати там, ви купили їх того дня. Тому що ви вирішуєте за гроші, які отримуєте за дослідження. Важливе значення мають самі наукові дослідження та їх якісні результати.
Вона - молекулярний біолог. Працює в Інституті молекулярної біомедицини медичного факультету Університету Коменського в Братиславі. Торік вона отримала наукову премію ESET у категорії «Видатний молодий вчений до 35 років». Він займається використанням слини для діагностики та моніторингу ряду захворювань, особливо захворювань нирок та ротової порожнини. Пройшла стажування в Лундському університеті та Вашингтонському університеті в Санкт-Петербурзі. Луї.