Загальновідомо, що гемодіалізовані пацієнти більш сприйнятливі до парентерально переданих вірусів, частково через імунодефіцит та порушення регуляції імунної системи. Однією з найважливіших інфекцій є віруси ВІЛ та гепататропні віруси, які мають важливий вплив на перспективу життя пацієнта. Хоча ми знаємо все більше і більше про вплив вірусу гепатиту С на імунну систему, ми не знаємо багато про гепатит G та нещодавно описаний вірус ТТ. Відповідно до нашої роботи, коінфекція ВГС та ВГС + ТТВ спричиняє значні зміни в імунній регуляції, тоді як сама по собі інфекція ТТГ та ВПГ не сприяє.
Ключові слова: HCV, TTV, HGV, імунорегуляція
Вступ
Давно відомо, що пацієнти на гемодіалізі мають клінічні ознаки імунної недостатності внаслідок порушення імунної регуляції, створюючи хорошу основу для інфекцій, які можуть передаватися при цьому переливанні та контактній інфекції. Сьогоднішні дослідження підтверджують, що ВІЛ та гепатотрофні вірусні інфекції відіграють ключову роль у обмеженні тривалості життя пацієнтів. (1,2) Поширення цих вірусів найчастіше відбувається парентерально, наприклад із зараженою кров’ю та продуктами крові.
У минулому столітті вірус гепатиту В був основною причиною більшості захворювань на гепатит після трансплантації. Наприкінці 1980-х років стало зрозуміло, що вірус гепатиту С (ВГС) був нещодавно виявленим збудником на тлі раніше зареєстрованих гепатитів, що не стосуються А, не В. (3,4) У 90-х роках сімейство гепатотрофних вірусів розмножилося з визнанням нових представників, серед яких вірус гепатиту G (HGV) сьогодні є центром досліджень у цьому напрямку. (5,6) HGV пов'язаний з HCV, але є філогенетично та біохімічно відмінним РНК-містить флавівірусом. (7) Тепер стає ясно, що вірус, раніше зареєстрований як HGBV/C, є таким самим, що і збудник HGV. Поширеність цього вірусу серед популяції здорових американців становить приблизно 1,5%. Цей коефіцієнт може бути вдвічі більшим у пацієнтів, які переливають трансфузію. (8,9) Незважаючи на той факт, що було виявлено декількох хворих на гепатит, клінічне значення HGV досі незрозуміле. (10,11,12)
У 1997 р. Перший у світі японський дослідник описав ще один гепатоспецифічний антиген - одновірусний вірус ТТ. (13,14) Цей вірус є збудником сімейства парвовіридових. В даний час відомо два серотипи. У здорових замках його поширеність становить 1,9%. (15,16,17) У пацієнтів, які постійно потребують крові та аналізу крові, ця частка може досягати до 50%. Цей патоген також був виявлений у кількох пацієнтів з гепатитом, але його практичне значення менш відоме, ніж значення HGV. Визнання нових патогенів стимулювало практиків отримувати все більше і більше інформації про спосіб передачі, вірулентність та клінічне значення цих вірусів. З огляду на те, що пацієнти на гемодіалізі є пацієнтами номер один, які потребують регулярного переливання крові та крові, було вбачається необхідним більш ефективно розглянути вплив цих вірусів на імунорегуляцію HD в Угорщині.
Пацієнти та методи:
У наших дослідженнях брали участь 435 пацієнтів, які лікувались звичайним гемодіалізом (HD) на діалізній станції FMC в країні. Спочатку пацієнтів перевіряли на периферичну кров з виявленням антитіл до HCV за допомогою аналізів ІФА третього покоління (DiaSorin). З 437 пацієнтів 33 були анти-HCV позитивними (8%). Згодом ці пацієнти брали участь у наших дослідженнях. Ми вибрали 27 негативних на HCV пацієнтів як негативні контролі, беручи до уваги вік, а не основні фактори впливу (тривалість лікування HD та ін.). Значення, отримані з антигенів клітинної поверхні, а також з аналізів на цитокіни, також порівнювали з результатами, виміряними у здоровій популяції. Клінічних ознак інших інфекцій у пацієнтів на момент досліджень не спостерігалось. Для експериментів використовували периферичну кров, яку отримували шляхом проколу АВ-фістули перед початком діалізного лікування. Рідна кров використовувалася для вивчення клінічної хімії. яку зберігали при -20 ° C до центрифугування після обробки. Визначення внутрішньоцитоплазматичних цитокінів проводили з крові в пробірках BD Vacutainer, що містять Na-гепарин.
Були проведені такі тести: сечовина-N, креатинін, білок, ALP, білірубін, гаммаGT, GOT, GPT, ELFO, IgG, IgA, IgM, Waaler-Rose, ANF, ANCA, антикардіоліпін, байт-2, AMA, SMA, LKM, CD3, CD4, CD8, CD19, CD6, HLA-DR CD69, розчинний: IL-2, IL-6, гамма-IFN, IL-4, 1L-10, IL-13, TNF-альфа, TGF -β, внутрішньоклітинний: гамма-IFN, IL-4, IL10.
Клініко-хімічні аналізи проводили із стандартними реагентами для клінічної хімії за методом IFCC із застосуванням хімічного аналізатора ILab 300. Рівні імуноглобуліну визначали нефелометричним методом. Тести ELFO проводили із системою Sebia Hydrasys. Для серологічних аналізів та вимірювання рівня розчинних цитокінів застосовували сендвіч-метод ELISA згідно з протоколами, наданими виробниками. Виявлення антинуклеарного фактора (ANF) проводили шляхом непрямої імунофлуоресценції в культурі клітин Hep2. Додаткове виявлення аутоантитіл проводили в тканинах щурів та нирок шляхом непрямої імунофлуоресценції. Ідентифікація антигенів CD клітинної поверхні та внутрішньоклітинних цитокінів проти моноклональних
матеріалів проводили методом прямої імунофлюоресценції. Випробування оцінювали за допомогою проточного циртометра EPICS Coulter.
Статистичний аналіз результатів тесту проводили за допомогою подвійного зразка Стьюдента Т.
Результати
На основі віремії ми розділили наших пацієнтів на кілька груп. Контроль (негативний) включав пацієнтів із ЗН, у яких жоден з вірусів не був виявлений за допомогою ПЛР. Співвідношення між віком, кількістю гемотрансфузій та часом, проведеним на гемодіалізі з типом віремії, показано в таблиці 1.