Дисбіоз бактеріальної популяції травної системи (мікробіота кишечника) у пацієнтів з метаболічним синдромом покращується після двох моделей здорового харчування: дієти, багатої складними вуглеводами та середземноморської дієти. Дослідження Кордіопрева

  • Автори:Кармен Марія Гаро Маріскаль
  • Директори дисертацій:Антоніо Камарго Гарсія (реж. Тес.), Франциско Перес Хіменес (реж. Тес.)
  • Читання: В Університеті Кордови (Іспанія) у 2016 році
  • Ідіома: Іспанська
  • Кваліфікаційний суд дисертації:Maria M. Malagón (голова), Mª Isabel Queipo Ortuño (секретно), Dimitrios Mikhailidis (голос)
  • Предмети:
    • Медичні науки
      • Терапія
        • Кардіологія
  • Повний текст недоступний (Дізнайтеся більше.)
  • Резюме

    • Метаболічний синдром (MetS) є складною та неоднорідною клінічною суттю із сильним генетичним компонентом, і на його вираження впливають фактори навколишнього середовища, соціальні, культурні та економічні фактори [1-3]. Паралельне збільшення частоти MetS та ожиріння є глобальним явищем [4, 5]. Крім того, обидві патології є важливими факторами ризику розвитку діабету 2 типу, серцевих захворювань та інсульту артеріосклерозу [3, 5-8], які є основними причинами смерті в західних країнах. Однак у більшості випадків відсутні стратегії ефективної профілактики, діагностики та лікування. З цих причин MetS та ожиріння стали серйозною проблемою охорони здоров'я.

      популяції

      Генетичні фактори та фактори навколишнього середовища добре характеризуються при розвитку ожиріння та порушення обміну речовин, але обидва вони не пояснюють сукупності високої поширеності цих захворювань. За цим сценарієм нещодавні дані показали, що мікробіота кишечника є новим фактором, що бере участь у розвитку метаболічних розладів [9-13].

      Кишкова мікробіота - це складна і різноманітна мікробна спільнота, що розміщується в кишечнику людини [14, 15] і в сукупності діє як повністю інтегрований орган в метаболізмі господаря, беручи участь у вилученні енергії з поживних речовин, регуляції вродженого та адаптивного імунітету і відіграє ключову роль у контролі енергетичного балансу [16]. В останні роки кілька досліджень припустили, що зміни мікробіоти кишечника можуть спровокувати патогенні механізми, що включають розвиток MetS, ожиріння та резистентність до інсуліну [17,19], що все пов'язано з високим серцево-судинним ризиком [20].

      Через можливу роль мікробіоти кишечника у здоров’ї та захворюваннях людини, конформація мікробіому кишечника в даний час вважається терапевтичною мішенню, оскільки специфічні зміни в мікрофлорі кишечника можуть протидіяти розвитку MetS та ожиріння [21, 22]. Хоча попередні дослідження вказували на те, що мікробіота є специфічною для людини і демонструє велику стабільність та стійкість до порушень з часом [23, 24], останні дослідження на людях показують, що зміна харчових звичок може пояснити до 57% мінливості складу кишкової мікробіоти, тоді як генетичні поліморфізми господаря не можуть пояснити більше 12% схильності страждати MetS [25,28].

      Зміст дослідження Гіпотеза: Гіпотеза полягає в тому, що споживання двох здорових дієт, середземноморської дієти та дієти з низьким вмістом жиру, виправляє дисбіоз кишкової мікробіоти у пацієнтів з метаболічним синдромом після тривалого втручання принаймні одного року. З іншого боку, нульовою гіпотезою є те, що тривале споживання двох здорових дієт, середземноморської та дієти з низьким вмістом жиру, не коригує дисбіоз кишкової мікробіоти, присутній у пацієнтів з метаболічним синдромом.

      Мета: визначити, чи пов’язаний метаболічний синдром з дисбіозом кишкової мікробіоти, і чи може цей дисбіоз модулюватися шляхом тривалого споживання двох здорових дієт, середземноморської дієти та дієти з низьким вмістом жиру. Ця основна мета поділяється на три основні цілі, які відповідають трьом статтям даної дипломної роботи:

      Завдання 1 - Стаття 1: Оцінити зміни у складі кишкової мікробіоти у пацієнтів з метаболічним синдромом порівняно з групою людей без метаболічного синдрому та вивчити ефект тривалого споживання двох здорових дієт: середземноморської дієти та дієта з низьким вмістом жиру для відновлення складу мікробіоти кишечника, аналізуючи склад кишкової мікробіоти за допомогою кількісної полімеразної ланцюгової реакції в режимі реального часу.

      Завдання 2 - Стаття 2: Проаналізуйте зміни у складі кишкової мікробіоти у популяції ожиріння після тривалого споживання середземноморської дієти та дієти з низьким вмістом жиру за допомогою послідовності нового покоління.

      Завдання 3 - Стаття 3: Визначити диференціальні характеристики кишкової мікробіоти при ожирінні на основі статі та змін індексу маси тіла шляхом послідовного розподілу нового покоління.

      1. Охарактеризувати дисбіоз кишкової мікробіоти, пов’язаний з метаболічним синдромом, аналізуючи функціональну здатність на видовому рівні, та оцінити ефект тривалого споживання середземноморської дієти та дієти з низьким вмістом жиру.

      2. Вивчити вплив споживання здорової дієти, середземноморської дієти та дієти з низьким вмістом жиру протягом року на взаємозв’язок між конкретними бактеріями та метаболомом калу та плазми.

      3. Оцінити внесок складу мікробіоти кишечника в індивідуальну дисперсію індексу маси тіла та рівня ліпідів у плазмі крові.

      Предмети, дизайн та методологія: Ця дипломна робота була проведена у пацієнтів дослідження CORDIOPREV (Clinical Trials.gov.Identifier kliniчна: NCT00924937), проспективного, рандомізованого, відкритого та контрольованого дослідження у пацієнтів із ішемічною хворобою, у яких останній епізод був коронарним принаймні за 6 місяців до вступу в дослідження. У дослідженні CORDIOPREV учасникам було довільно призначено отримувати два різні режими харчування, середземноморську дієту та дієту з низьким вмістом жиру, протягом 5 років, на додаток до звичайного лікування ішемічної хвороби серця. Усі учасники дали письмову інформовану згоду на участь у дослідженні. Протокол випробування та всі його модифікації були затверджені місцевим комітетом з етики відповідно до Гельсінкської декларації та належної клінічної практики.

      Стаття 1: ця робота була проведена у 239 пацієнтів, які були розділені на дві групи: першу групу склали 138 пацієнтів з метаболічним синдромом та іншу групу, складену з 101 пацієнта без метаболічного синдрому. Половина пацієнтів у кожній групі дотримувалась середземноморської дієти, а друга половина - дієти з низьким вмістом жиру. Ця публікація була довгим дослідженням; біохімічні визначення та аналіз мікробіоти кишечника проводили на початку дослідження та через рік та два роки дотримання дієти. Аналіз мікробіоти кишечника проводили за допомогою кількісної ланцюгової реакції полімерази в реальному часі із застосуванням специфічних праймерів для гена 16S рибосомної РНК різних бактеріальних таксонів.

      Стаття 2: це дослідження було проведено у 20 пацієнтів із ожирінням (чоловіків), 10 пацієнтів дотримувались середземноморської дієти, а 10 пацієнтів дотримувались дієти з низьким вмістом жиру. Ця робота є поздовжнім дослідженням; біохімічні визначення та аналіз мікробіоти кишечника проводили на початку дослідження та після одного року контролю раціону. Аналіз мікробіоти кишечника проводили шляхом секвенування з використанням платформи 454 Life Sciences (Roche), згідно зі стандартними протоколами для зазначеної платформи. Крім того, ми оцінили бактеріальний склад та його взаємозв’язок з усім метаболомом калу та плазми.

      Стаття 3: ця робота являє собою поперечне дослідження, яке було проведено у 75 пацієнтів, 39 чоловіків та 36 жінок, які, в свою чергу, були розділені на три групи відповідно до їх індексу маси тіла: 13 чоловіків та 13 жінок з тілом індекс маси 33. Біохімічні визначення та аналіз мікробіоти кишечника проводили на початку дослідження. Мікробіоту кишечника аналізували шляхом секвенування варіабельної області V4 мікробного гена 16S рибосомної РНК на платформі Illumina MiSeq.

      Стаття 1: на початку дослідження ми спостерігали, що чисельність родів Bacteroides, Eubacterium і Lactobacillus більша в контрольній групі, ніж у пацієнтів з метаболічним синдромом, тоді як бактерії Bacteroides fragilis, Parabacteroides distasonis, Bacteroides thetaiotaomicron, Faecalibacterium prausnitzii, Fusobacterium nucleatum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium adolescentis, підгрупа Ruminococcus flavefaciens і Eubacterium rectole знижені у пацієнтів з метаболічним синдромом (усі значення Р