Протокол розведення Musca domestica в лабораторії

musca

Джанна Мартірадонна Очіпінті *, Ана Сото Вівас та Хуліо Гонсалес

Центр досліджень ендемічних хвороб та охорони навколишнього середовища. Інститут вищих досліджень автономної служби "Доктор Арнольдо Габальдон/MPPS ? Маракай, штат Арагуа, Венесуела.

Представляємо спосіб розведення Musca domestica У лабораторних умовах при температурі 32 ° С, відносній вологості повітря від 70 до 80% і світловому періоді 12 годин світла біологічний цикл M. domestica триває близько 9 днів. Дієта для дорослих мух складається з 80 г товарного цукру, 250 мл пастеризованого молока та фільтрованої води. Живильне середовище для личинок виготовляють із смужок серветкового паперу, змочених розчином молока та дріжджів, їх розміщують у 5-сантиметрові шари всередині скляної пляшки, поки не заповниться 1/3 її об’єму. Потім відкладається приблизно 250 яєць, поверх яких укладається останній сухий шар паперових смужок. Через п’ять днів лялечок виймають із середовища для вирощування. Їх поміщають у чисту клітку і через чотири дні виходять дорослі.

Ключові слова: Musca domestica, життєвий цикл, личинка, розплод середовища.

Протокол розведення для Musca domestica в лабораторії

Ми представляємо спосіб вирощування Musca domestica в лабораторних умовах. При температурі 32 ºC, відносній вологості повітря від 70 до 80% і фотоперіоді 12 годин світла життєвий цикл M. domestica триває близько 9 днів. Дієта для дорослої мухи складається з 80 грамів цукру, 250 мл пастеризованого молока та фільтрованої води. Живильне середовище для личинок виготовляли із смужок паперових серветок, змочених розчином молока та дріжджів, які розміщували шарами глибиною до 5 см у скляній пляшці, заповненій на 1/3. Близько 250 яєць личинок клали на верхній шар, а потім додавали останній шар сухих смужок паперу. Через п’ять днів лялечок виймали з колби для вирощування. Їх помістили в чисту клітку і через чотири дні вийшли дорослі.

Ключові слова: Musca domestica, біологічний цикл, личинки, поживне середовище.

Отримано 05.02.2009 Прийнято 27.10.2009

Musca domestica це поліфаговий вид, його приваблює корм і відкладання яєць на різні субстрати (Keiding, 1986. WHO/VBC/86.937). Місце відкладення яєць вибирається за допомогою запаху (вуглекислого газу, аміаку та інших газів, що утворюються в результаті гниття органічних речовин), а незрілі етапи його життєвого циклу розвиваються при розкладанні органічних речовин (сміття, кал тощо), з годуванням дорослих з тих самих джерел (OPS, 1962. Науковий опубл. № 61; Кейдінг, 1976. WHO/VBC/76.650). Контакт із цими джерелами забруднення, а згодом і з побутовим посудом та продуктами харчування M. domestica, в ефективному механічному векторі етіологічних агентів у людини та тварин у природних умовах (Greenberg, B. 1971. Мухи та хвороби. Екологія, класифікація та біотичні асоціації. Princeton University Press, США); Грінберг, 1973 рік, Мухи та хвороби. Біологія та передача хвороб. Прінстонська університетська преса, США; ВООЗ 1991. Муха будинку. Вектор управління серії. Навчально-інформаційний посібник).

Вивчення біології виду є дуже широкою та різноманітною галуззю, де базові знання, як правило, отримуються в однорідних лабораторних умовах температури, відносної вологості та фотоперіоду під час розвитку біологічного циклу комах. У природних умовах комахи харчуються природними речовинами, доступними в навколишньому середовищі. У лабораторних умовах необхідно складати штучні дієти, звичайно ця дієта змінюється залежно від стадії розвитку комахи. Штучні дієти для вирощування комах у лабораторії в основному застосовуються у видів, що мають медичне та/або економічне значення, або через їх шкідливу роль для людини, або через їх біологічний контроль, для годівлі інших тварин або для переробки споживчих товарів. . У всіх цих випадках метою є отримання великої кількості зразків конкретного виду для подальших експериментів або експлуатації. Таким чином, метою цієї роботи було надати біологам, екологам та технічному персоналу в галузі охорони здоров'я протокол про розведення та утримання колоній M. domestica в лабораторних умовах.

БІОЛОГІЧНИЙ МАТЕРІАЛ

Збір батьків для створення колоній

Налагодити розведення M. domestica в лабораторії для експериментальних цілей слід зробити колекцію дорослих особин. Кількість дорослих, яких потрібно зібрати, визначатиметься під час проведення дослідження. Улюблені місця мух - це місця, які забезпечують їх водою, їжею та притулком, такі як скотарки, загони для свиней, курники, смітники у годівницях для домашніх тварин, на ринках тощо. Збір може бути здійснений вручну, для чого використовується ентомологічна сітка, що робить кілька проходів сітки, над поверхнею грунту або біля місця, де мухи відпочивають або харчуються, також можуть використовуватися пастки.

Зібрані зразки поміщають у визначену клітку (дату, місце та час збору) з білої тканини (доппіо-фата), розмірами 26x36x26 см. Ці клітки будуть розміщені в аніме-підвалах і заклеєні тиррою (креповий папір марки CELOVEN®).

Пізніше каву переміщують туди, де буде утримуватися розведення. Варто зазначити, що перед початком колонізації зібрані зразки повинні бути ідентифіковані за допомогою наявного коду Diptera (Кова-Гарсія, 1974. Загальні принципи ентомології. FVPSE. Каракас, Венесуела).

Кількість їжі прямо пропорційно кількості особин у клітці; Для 400 дорослих особин його поміщають у чашку Петрі з 80 гр комерційного цукру та дві пластикові ємності місткістю 250 мл, в обидві ємності поміщають достатню кількість бавовни, щоб вона покривала ємність контейнера (без ущільнення). Один з контейнерів змочують фільтрованою водою, а другий пастеризованим молоком, щоб мухи могли без труднощів отримати доступ до рідини.

Отримання яєць

У ємності з бавовною та пастеризованим молоком самки яйцекладки. У цьому сенсі контейнер слід помістити першим ділом вранці і вийняти через п’ять годин для збору яєць дня, вони негайно переносяться в середовище для вирощування.

Рослинне середовище для личинок M. domestica

Смужки виготовляються серветками промислового типу, сірими або світло-коричневими (торгова марка Maracay®), і розміщуються шарами товщиною 5 сантиметрів всередині 3-літрової скляної пляшки із широким горлом, після чого за допомогою піцети кожен шар паперу змочується розчин молока і дріжджів (2г гранульованих дріжджів Saccharomyces cerevisiae Hansen, торгова марка FLEISCHMANN® у 200 мл пастеризованого молока кімнатної температури, перемішують із середньою швидкістю до повного розчинення дріжджів) до заповнення третини ємності пляшки та осідання приблизно 250 яєць, на них кладуть останній шар не змоченого паперу. Закрийте горловину скляної пляшки шматочком полотна типу полотна (не використовуйте тюль або доппіо-фату) і закріпіть її на горловині пляшки щільною гумовою стрічкою. Він ідентифікується з назвою штаму (місце, звідки походять батьки), датою виробництва врожаю та поколінням нитки.

Через п’ять днів лялечок виймають із середовища для вирощування, поміщають їх у тканинну клітку (описану вище), через чотири дні з’являються дорослі особини, яким забезпечують вже описаний раціон.

Було показано, що якість дієти, пропонованої для мух, сильно впливає на її розвиток, родючість і плодючість. Коли мухи харчуються виключно цукром і водою, без додавання білка, це не впливає на статеве дозрівання самців, але яєчники самок впливають (Dethier, 1961. Біол. Бик. 121: 456-470). Годування самок яєчним альбуміном, гідролізованими дріжджами або знежиреним молоком забезпечує хороший розвиток яєчників і, як наслідок, фертильність є оптимальною (Monroe & Lamb, 1968. Енн Ентом. Соц. Америка. 61: 456-459).

Тепер переваги методу, запропонованого в цій роботі, щодо опублікованих в основному полягають у тому, що це простий метод, легко застосовний, швидкий, не вимагає великої кількості входів, життєздатні яйця отримують постійно, особин можна отримати Дорослі з однорідними характеристики, матеріали та запаси, необхідні для утримання та створення колонії, легко набуваються. Загальні інгредієнти (молоко, пивні дріжджі та цукор) використовуються як джерело їжі, що забезпечує необхідні поживні речовини для росту, розвитку та розмноження здорового мухова колонія.