Інформація для вдосконалення практики з цього питання та консультування клієнтів

Меланія Сантана Круз
Ветеринарна Дра. Розмноження собак
GPCert (SAR) Європейська школа ветеринарних аспірантур
Ветеринарний центр Канія. Долоні
Зображення надані автором

Допоміжне розмноження починається в 18 столітті, коли Спалланцані описав перше штучне запліднення та народження трьох цуценят в Італії (Fastad, 2000). З цього моменту репродуктивна технологія почала переживати інтенсивний бум, і було проведено численні дослідження з метою визначення та вдосконалення процесів, пов’язаних з контролем самки в теплі, оцінкою сперми та її збереженням за допомогою охолодження та заморожування насінників ., та його подальше застосування через протоколи штучного запліднення. Так з’явилися ветеринарні служби, що спеціалізуються на розмноженні дрібних тварин.

Контроль суки для визначення моменту спаровування/осіменіння

Вагінальна цитологія

репродукції
Малюнок 1. 40-кратна вагінальна цитологія еструсу з фарбуванням Diff Quick.

Рисунок 2. 10X вагінальна цитологія еструсу з фарбуванням RAL діагнострусом.
Рисунок 3. Комплект диференціального фарбування Diagnoestrus RAL.

Прогестерон

Крім того, визначення рівня прогестерону в плазмі дозволяє нам встановити час гестації більш конкретним чином і, отже, кращою точністю у контролі пологів.

Управління собачою спермою та кріоконсервація

Насіннєва технологія надає нам інформацію про те, як правильно поводитись із спермою, а також про можливості її збереження.

Рисунок 5. Екстракція насіннєвої тканини.

Свіжа сперма

Незважаючи на сказане, загалом, сперма собак не повинна зазнавати різких перепадів температури, сильних механічних змін, таких як надмірне збудження, або контакту з речовинами, такими як вода, бактерициди та миючі засоби (Kutzler, 2005). З цієї причини після відповідного збору сперми собачу сперму потрібно зберігати на водяній бані при 37 ºC і температурі навколишнього середовища 20 ºC, уникаючи змін до моменту використання (Lucas X, 2014). За цих умов життєздатність свіжої сперми після збору обмежена, тому її потрібно використовувати негайно або розпочати процедури розведення, консервування та/або транспортування.

Як для безпосереднього використання, так і для того, щоб його піддали кріоконсервації, для визначення якості сперми має важливе значення оцінка сперми шляхом визначення параметрів кольору, об’єму, рухливості сперми, концентрації/кількості загальної сперми та морфоаномалій, таких як мінімальний (Fontbonne 2008a; Root, 2010).

Охолоджена сперма

Після відповідного розведення сперму охолоджують до 4 ° C поступово протягом 1,5-2 годин, а потім зберігають при цій температурі, намагаючись використовувати її протягом перших 24 годин, хоча сперма може підтримувати виживання 2 до 4 днів, навіть 7 днів для хорошої якості сперми (Fontbonne, 2008b).

Для транспортування, як правило, продаються спеціальні м'які ящики, які містять холодний пристрій, такий як крижані блоки та зарезервований регіон, щоб захистити перероблену сперму. Як і у випадку з розріджувачами, існують комерційні контейнери для транспортування охолодженої сперми, які іноді є частиною набору, що включає розріджувачі та транспортний контейнер (рисунок 6).

Рисунок 6. Набір для транспортування сперми в холодильнику.

Відвантаження повинно бути терміновим (менше 24 годин, максимум 48), ідентифікуючи себе як охолоджений біологічний матеріал, що супроводжується щонайменше санітарним сертифікатом тварини та небезпечним документом на товари, що перевозяться. Однак необхідна документація повинна бути підтверджена кур'єрською компанією, оскільки вона може відрізнятися залежно від транзитних та регіональних перевезень.

Заморожена сперма

Процес заморозки насіннєвих порід є досить складним, оскільки вимагає центрифугування, розведення спеціально розробленими для нього розчинниками та поступове зниження температури до заморожування у парах рідкого азоту, щоб пізніше занурити його і зберігати при -196 ºC необмежений час. Цей процес вимагає інструментів та адекватної підготовки, тому його можна проводити лише в певних місцях, таких як довідкові центри та сперми (рис. 7).

Рисунок 7. Заморожена сперма: зберігання у соломці у резервуарі для рідкого азоту.

Змінна здатність сперми та особин протистояти кріоконсервації (Eilts, 2005), так що для заморожування може бути придатна лише свіжа сперма чудової якості.

Низький коефіцієнт родючості та плодовитості, рівень гестації становить близько 60-70%, зумовлений низькою моторикою та підвищеними морфоаномаліями сперми, підданої кріоконсервації та подальшому відтаванню (Корінь 2010; Martí S, 2011).

Труднощі з точки зору доставки, оскільки для цього потрібні спеціальні контейнери з парами рідкого азоту, розроблені спеціально для цієї мети. Через це вважається перевезення небезпечного матеріалу, що тягне за собою певну складність з точки зору необхідних документів, а також високу вартість.

У разі подальшого придбання сперми завжди слід проводити за ретельними ветеринарними порадами, забезпечуючи попередній звіт про якість сперми після розморожування, щоб переконатися, що покупка є вигідною та що кількість проданих доз нашому клієнту є достатньою. . Це є життєво важливим, оскільки встановлено, що мінімальна доза сперми повинна становити 200 мільйонів, щоб репродуктивна самка могла гестаціювати після запліднення замороженою спермою (Martí S, 2011). Тому, якщо продаж не досягає цих мінімумів, його слід відкинути незалежно від використовуваного процесу штучного запліднення.

Штучне запліднення собак

Запліднення вагіноскопом

Рисунок 10. Вагінальний ендоскоп для внутрішньоматкового штучного запліднення.