Іспанська асоціація педіатрії має одним з головних завдань розповсюдження суворої та сучасної наукової інформації з різних областей педіатрії. Anales de Pediatría є Науковим висловлювальним органом Асоціації і є засобом, за допомогою якого співробітники спілкуються. У ньому публікуються оригінальні роботи з клінічних досліджень у педіатрії з Іспанії та країн Латинської Америки, а також оглядові статті, підготовлені найкращими професіоналами кожної спеціальності, щорічні повідомлення про конгрес та щоденники Асоціації, а також посібники для дій, підготовлені різними товариствами/спеціалізованими Секції, інтегровані в Іспанську асоціацію педіатрії. Журнал, орієнтир для іспаномовної педіатрії, індексується у найважливіших міжнародних базах даних: Index Medicus/Medline, EMBASE/Excerpta Medica та Index Médico Español.

молока

Індексується у:

Index Medicus/Medline IBECS, IME, SCOPUS, Індекс наукового цитування розширений, Звіт про цитування журналів, Embase/Excerpta, Medica

Слідкуй за нами на:

Фактор впливу вимірює середню кількість цитат, отриманих за рік за твори, опубліковані у виданні протягом попередніх двох років.

CiteScore вимірює середню кількість цитат, отриманих за опубліковану статтю. Читати далі

SJR - це престижна метрика, заснована на ідеї, що всі цитати не рівні. SJR використовує алгоритм, подібний до рейтингу сторінок Google; є кількісним та якісним показником впливу публікації.

SNIP дозволяє порівняти вплив журналів з різних предметних областей, виправляючи відмінності у ймовірності цитування, які існують між журналами різних тем.

Науковий інтерес до молочнокислих бактерій як зміцнювачів здоров’я розпочався в 1908 році Мечникоффом, який спостерігав за тривалістю життя та хорошим здоров’ям болгарських фермерів, які споживали велику кількість йогурту - молочного продукту, ферментованого лактобактеріями 1 Звідси походить термін пребіотик, який визначає живий мікроорганізм, який при попаданні в достатній кількості, робить позитивний вплив на здоров’я. Насправді, їжа, що містить пробіотик, є особливим випадком функціональної їжі 2,3 .

Однак молочні продукти, що містять мертві мікроорганізми, не можна розглядати як функціональну їжу, оскільки вони не можуть надавати свій сприятливий вплив на господаря. Бактерії, що використовуються як пробіотики, призводять до колонізації кишечника господаря, але важливим фактором вибору пробіотика є його здатність виживати в мікросередовищі кишечника, де вони здійснюють свою діяльність. Недавні дослідження зосереджували увагу на лактобактеріях, як тому, що вони є різновидом молочнокислих бактерій (метаболізує лактозу до молочної кислоти), так і тим, що є родом, що присутній у шлунково-кишковому тракті людини, а кінцева клубова кишка і колона є її колонізаційними нішами.

Однією з проблем, з якою стикається галузь, є знання, які штами Lactobacillus spp. Вони повинні включати пробіотики у свої продукти. Це пов’язано з тим, що в одному і тому ж роді і навіть у межах одного виду не всі штами є еквівалентними за своєю корисною діяльністю. Насправді пробіотичні властивості виняткові для меншості штамів. В даний час є небагато продуктів, які можуть за наукової підтримки заявити про їх вміст у пробіотичних штамах, які демонструють конкурентну перевагу в кишковій екосистемі людини.

Завданням нашого дослідження було проаналізувати особливості мікрофлори кишечника у дітей, які отримували у своєму раціоні ферментоване молоко з Lactobacillus casei та Streptococcus thermophilus, та їх вплив на рівень секреторного імуноглобуліну.

Матеріал і методи

Проспективне рандомізоване експериментальне дослідження було розроблено з двома паралельними групами. Всього було включено 35 дітей, з яких 18 відповідали експериментальній групі (А), а 17 - контрольній групі (В). Групу А складали 10 хлопчиків (55,6%) та 8 дівчаток (44,4%) із середнім віком 2 роки (стандартне відхилення [SD]: 0,6 років; діапазон: 1-3 роки). 18 дітей групи А отримували у своєму раціоні ряжанку (500 мл/день) з L. casei та S. thermophilus (My Primer Danone®) протягом 6 тижнів (таблиця 1), а після закінчення цього часу дітей годували протягом 6 більше тижнів на тому самому стандартному коров’ячому молоці, яке вони отримували до вступу в дослідження. 17 дітей групи В годували стандартним нормальним коров’ячим молоком (500 мл/день) протягом усього періоду дослідження.

Рівні секреторного імуноглобуліну А (IgA) у слині групи А оцінювали на початку дослідження та через 6 тижнів після початку годування ферментованим молоком з L. casei та S. thermophilus .

Збір зразків стільця

Фекалії збирали для дослідження кишкової флори на 0, 6 та 12 тижні в обох групах. У кожної дитини було зібрано 2 зразки стільця, один передали в мікробіологічну лабораторію в контейнері з анаеробною атмосферою (Anaerocult Merck) для дослідження анаеробних мікроорганізмів, а інший - в аеробній атмосфері для дослідження аеробних бактерій. Ця передача була проведена протягом перших 12 годин після відбору зразків.

Проведено кількісне бактеріологічне дослідження. З 1 г стільця, розчиненого в 1 мл пептонової води, було зроблено 9 послідовних розведень по 1/10, кожне з яких засіяно, використовуючи калібровану петлю 1/100, у таких культуральних середовищах: Агар для інфузії мозку серця для дослідження загальної анаеробна флора, агар NBGT для Bacteroides spp., агар Beerens для Bifidobacterium spp., агар MRS та Rogosa для Lactobacillus spp.; всі вони інкубували протягом 3 - 5 днів в анаеробній атмосфері при 37 ° С.

Кількісне дослідження ентеробактерій проводили шляхом посіву дев'яти розведень на агар МакКонкі, інкубованого 24 години при 37 ° С в аеробній атмосфері, та посіву на агар Колумбії з 5% крові та налідиксової кислоти, інкубованого при 37 ° С протягом 48 год в аеробному з 5% CO 2 для виявлення грампозитивної флори.

Результати кількісних досліджень виражали як кількість колонієутворюючих одиниць на грам калу (КУО/г). Ця інформація щодо кількості колоній представлена ​​двома різними способами: одна - середня кількість колоній у трьох послідовних розведеннях; а інший - середнє значення останнього розведення з ростом. Порівняння, зроблені на основі першої змінної, були зроблені за логарифмічною шкалою в основі 10, і для останнього розведення з ростом показник безпосередньо враховувався. У цьому випадку не можна вважати, що змінна має нормальний розподіл, тому при порівнянні використовували непараметричний U-тест Манна-Уітні. У випадку Lactobacillus spp. проведено якісний підхід та оцінено частоту дітей, у яких спостерігається ріст зазначених бактерій.

Був проведений описовий аналіз наявної інформації, який включав таблиці частот для категоріальних змінних та розрахунок мір центральної тенденції та дисперсії для неперервних змінних. Для порівняння кількісних змінних між досліджуваними групами був використаний t-тест Стьюдента незалежних зразків після проведення логарифмічного перетворення даних. У випадку з Lactobacillus spp. у фекаліях для порівняння груп використовували тест хі-квадрат.

Для аналізу еволюції пацієнтів з точки зору категоріальних змінних (частота Lactobacillus spp.) Був використаний тест Макнемара.

Ця робота була схвалена Комітетом з етики дитячої лікарні Валь д'Еброн у Барселоні. Крім того, процедури, що застосовуються у пацієнтів та контроль, проводились після отримання поінформованої згоди батьків.

Аеробні грамнегативні палички

У таблиці 2 наведені результати, отримані щодо аеробних грамнегативних бацил. Беручи до уваги середню кількість колоній у трьох послідовних розведеннях, статистично значущі відмінності спостерігаються лише у даних, що відповідають першим 6 тижням після початку дослідження, спостерігаючи, що на той час колонієутворюючі одиниці (КУО)/г калу більше у групі В, ніж у групі А (р = 0,0203), і те саме відбувається при аналізі цих мікроорганізмів з урахуванням останнього розведення калу з ростом бактерій (р = 0,0444).

Грампозитивна аеробна флора

Жодних істотних відмінностей у складі загальної аеробної грампозитивної флори між групами в будь-який час під час дослідження не спостерігалось (таблиця 3).

Загальна анаеробна флора, Bifidobacterium spp. та Bacteroides spp.

Аналізуючи останнє розведення калу з ростом бактерій та порівнюючи ріст Bacteroides spp. У групах A та B протягом перших 6 тижнів після початку дослідження у групі A спостерігали нижчі значення, ніж у B, з показниками, дуже близькими до статистичної значущості (p = 0,0662) (Таблиця 4).

У загальній кількості анаеробної флори та в кількості Bifidobacterium spp. жодних суттєвих відмінностей не спостерігалося між двома групами дітей у будь-який час дослідження (таблиці 5 та 6).

З таблиці 7 видно, що в групі А спостерігається більша частка дітей, у яких Lactobacillus spp. у кишковій флорі, ніж у групі В, ці відмінності стали більш очевидними з шостого тижня дослідження та ставали статистично значущими (р = 0,028) через 12 тижнів.

Секреторний IgA у групі А оцінювали протягом двох моментів, на початку та через 6 тижнів прийому ферментованого молока. Зафіксовано статистично значуще збільшення (р = 0,0063) від середнього базового значення 2,5 мг/дл на вихідному рівні до середнього 3,4 мг/дл через 6 тижнів. Середнє вихідне значення IgA для контрольної групи становило 2,47 мг/дл.

Протягом останнього десятиліття були проведені різні дослідження, щоб оцінити наслідки для здоров'я, які може мати споживання кисломолочних продуктів (йогуртів), збагачених живими бактеріями. Важливою перешкодою, з якою можуть зіткнутися молочнокислі бактерії після прийому всередину, є кислотна секреція шлунково-кишкового тракту, яка є найважливішим захисним механізмом організму від більшості патогенних мікроорганізмів, які потрапляють всередину.

У дослідженні, проведеному Djouzi та співавт. 6, було показано, що виживання бактерій під час шлунково-кишкового транзиту залежить від виду бактерій та комбінації молочнокислих бактерій у продукті. Вони також показують, що L. casei виживає при проходженні через шлунковий бар'єр, потрапляючи в організм з дієтичним ферментом, виявляючи велику кількість життєздатних клітин у калі. Ця бактерія стійка до шлункової кислоти та жовчі і залишається життєздатною в діапазоні рН 3,0-7,0 7. Різні штами цього мікроорганізму виживають під час шлунково-кишкового транзиту і досягають кінцевої кишки в достатній кількості, щоб розвинути їх фізіологічну дію.

Недавні дослідження також показують, що регулярне вживання ферментованого молока L. casei захищає від діареї ротавірусу у дітей. У кишечнику ця бактерія відновлює цілісність слизової і зменшує інфекцію на рівні мікроворсинок слизової оболонки кишечника 8 .

Мікробіологічні дані, отримані в цьому дослідженні, показують, що між 6-12 тижнями після прийому молока, збродженого L. casei та S. thermophilus у групі A, спостерігається більша частка дітей, у яких L. casei виділяється у кишковій флорі, ніж у група контрольних дітей. З цієї причини ми можемо перевірити виживання цих молочних бактерій у шлунково-кишковому тракті та колонізацію кишечника. Інші дослідження також виявили значне збільшення ізоляції L. casei у фекаліях дітей, яких годували молоком, збродженим цим мікроорганізмом 9-12. Крім того, інші автори показують, що L. casei може знаходитися в калі до 2 і до 4 тижнів після переривання прийому молока, доповненого зазначеними бактеріями, як це також відбувається в нашому дослідженні 9,12,13. Інші автори, навпаки, виявляють зниження вмісту лактобактерій у калі після прийому молочної суміші 14,15 .

У фекаліях дітей, що належать до експериментальної групи цього дослідження, ми виявили зменшення кількості аеробних грамнегативних паличок і Bacteroides spp., Ефект, який може бути обумовлений блокуванням місць адгезії цих мікроорганізмів до слизової оболонки кишечника L. casei .

Можливість викликати імунну відповідь через травний тракт відома близько століття. Існують мільйони взаємодій між бактеріями, епітелієм та підлягаючою імунною тканиною, які потроху програмують та модулюють дуже потужну та складну захисну систему 16,17. Насправді нормальна мікрофлора кишечника є найважливішим ендогенним стимулом для розвитку та дозрівання нормальної імунної системи як за її системної відповіді, так і на місцевому (слизовому) рівні 18 .

У цьому дослідженні у групі дітей, які годували молоком, збродженим L. casei, було продемонстровано значне збільшення (р = 0,0063) секреторних значень IgA через 6 тижнів після прийому, що показало б ефект на корисну імунну систему, спричинену бактерії від їх колонізації в кишечнику. Vitiñi та співавт. 19 показують, що L. casei здатний викликати збільшення кількості клітин, що продукують IgA, у власній пластинці тонкої кишки, цей ефект залежить від дози. Ці автори також показують, що ця імуностимулююча здатність не може бути узагальнена для всіх родів або видів молочнокислих бактерій, але що ця властивість обмежена деякими штамами, і тому не всі молочнокислі бактерії можуть використовуватися для стимуляції імунної системи кишечника.

На закінчення це дослідження наводить докази виживання L. casei в кишковому тракті та його імуностимулюючого ефекту на значне збільшення секреторного IgA.

Листування: д-р Р. Тормо Карнісер.
Лікарня для матері та дитини міста Валь д'Еброн.
Дитячий відділ гастроентерології та харчування.
П.º Валл д'Еброн, 119-129. 08035 Барселона. Іспанія.
Електронна адреса: [email protected]

Отримано в серпні 2005. Прийнято до друку в липні 2006 року.