ВООЗ визначила тестування на віруси як один з головних інструментів боротьби з новим коронавірусом, який викликає пандемію. Відповідна діагностична процедура дозволяє швидше виявити наявність інфекції та забезпечити належний догляд за пацієнтом. Існує кілька діагностичних тестів на ГРВІ-CoV-2. Однак не має значення, який із них коли робиться, і не має значення, що ми хочемо знати: чи ми вже були заражені раніше, чи зараз ми заражені. Наші фахівці з лабораторної діагностики допоможуть вам знайти дорогу.

знати

Високо заразний вірус SARS-Co-V-2, який в першу чергу важкий із гострими респіраторними симптомами, належить до сімейства коронавірусів. Новий коронавірус поширився з китайського міста Ухань, спричинивши пандемію у всьому світі. ВООЗ назвала хворобу ГРВІ-CoV-2 COVID-19 у лютому 2020 року.

Які лабораторні дослідження можна використовувати для виявлення інфекції?

Чи хтось причетний до інфекції, можна визначити кількома лабораторними методами:

  • шляхом виявлення вірусної РНК: спадковий матеріал вірусу (РНК) виявляється за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) у зразку, відібраному зі слизової оболонки носової або ротової порожнини
  • вірусоспецифічний антиген (и) шляхом швидкого флуоресцентного імунологічного аналізу з респіраторного зразка
  • і це антитіла шляхом виявлення антитіл, що виробляються організмом, проти збудника в крові.

Результати цих методів тестування надають різну інформацію лікарям, і тому їх роль у діагностиці ГРВІ-CoV-2 інша.

Переваги та недоліки методів

ПЛР-тест (RT-PCR: ланцюгова реакція полімеразної зворотної транскрипції)

Найкращий і найчутливіший метод тестування - це оцінка наявної інфекції. Він виявляє спадковий матеріал (РНК) хвороботворного вірусу з досліджуваного зразка, підтверджуючи наявність вірусу в дихальних шляхах. Під час тесту відбирається проба слизової оболонки носоглотки, і тест повинен проводитись від 24 до 48 годин. Тест, який в даний час застосовується нашою компанією, вивчає 3 стадії генетичного запасу вірусу, тому реакцію ПЛР, яку ми використовуємо, можна вважати дуже чутливою.

Найкращим методом підтвердження присутності вірусу в дихальних шляхах вважається золотий стандарт. Характеризується чудовою чутливістю та надійністю. Він майже на 100% здатний ідентифікувати інфікованих.

Оскільки відбір проб вимагає спеціального обладнання для відбору зразків та досвіду, він повинен проводитись лише кваліфікованою та досвідченою особою в захисному обладнанні після належної підготовки. Само обстеження та оцінка також вимагає більш високих знань, тому їх можна проводити лише в спеціально обладнаній лабораторії молекулярної діагностики. Дослідження складається з багатоетапного процесу, що перекривається, кожен етап якого може зайняти до декількох годин. Через все це RT-PCR є найдорожчим тестом серед варіантів діагностики COVID-19.

Швидкий тест на антиген (швидкий флуоресцентний імуноаналіз)

Він виявляє білок S вірусу. Метод дешевшого аналізу, ніж ПЛР, але менша чутливість. Отже, у разі негативного результату для підтвердження потрібна RT-PCR. Відбір проб проводиться з носової або глоткової порожнини, час тесту становить приблизно. 15 хвилин.

Він може швидко підтвердити наявність вірусу, тому його можна застосовувати в першу чергу там, де кількість захворювань та кількість позитивних результатів будуть високими, а ізоляція заражених повинна бути вирішена якомога швидше. Спеціальний пристрій зчитування (флуоресцентний зчитувач) допомагає прочитати швидкий тест.

Відбір проб вимагає спеціального обладнання для відбору зразків та досвіду, і його може виконувати кваліфікована та досвідчена особа, яка має захисне обладнання. Для оцінки також необхідний досвід лабораторії. Слід бути обережним під час відбору проб (ні занадто рано, на ранніх стадіях захворювання, ні занадто пізно на етапі одужання із зменшенням вірусів), оскільки це може призвести до помилково негативного результату. Оскільки поточна інфекція не виключається негативним результатом, її слід підтвердити методом RT-PCR.

Серологічні тести (виявлення SARS-CoV-2-специфічних антитіл)

Серологічні тести насправді не підходять для виявлення гострої інфекції. Наявність антитіл дає відповідь на те, чи ми вже стикалися з вірусом і чи реагувала імунна система, тобто вже заражена. Це пов’язано з тим, що серологічні тести виявляють антитіла до вірусу SARS-CoV-2 із зразка крові, тобто вони дають уявлення про імунну відповідь суб’єкта на інфекцію. На додаток до допомоги в повній діагностиці захворювання, ці тести можуть також допомогти виявити безсимптомно інфікованих осіб або тих, хто вже переніс інфекцію та став імунітетом.

Відомі дві основні групи серологічних тестів:
Швидкі тести на антитіла

Ці тести використовуються для швидкого виявлення антитіл раннього (IgM) та пізнього (IgG) типу SARS-CoV-2 у крові суб'єкта. Результат завершується до 15 хвилин. Таких випробувань на ринку також є в Угорщині, але питання полягає в тому, які дані тестів виробника доступні для них, яка їх чутливість та точність, і наскільки професійна лабораторія може їх довести на практиці?.

Доступне лабораторне дослідження можна провести швидко навіть біля ліжка, оскільки для зчитування результатів не потрібен спеціальний пристрій, тест можна оцінити неозброєним оком.

Як швидкий тест, швидкий тест на антитіла характеризується тим, що отримується набагато більше хибних результатів, ніж у випадку автоматизованих аналізів на антитіла (ІФА, хемілюмінесцентні аналізи тощо), і недотримання часу зчитування може призвести до помилкових результати. Якщо відбір проб проводиться на ранніх стадіях захворювання, результат може бути помилково негативним. В даний час кілька тестів на ринку можуть бути використані лише для дослідницьких цілей і не підлягають діагностиці! Досвід також показав, що виявлення антитіл у крові пальців є менш точним і чутливим, ніж серологічне тестування сироватки крові в професійних лабораторних умовах після забору крові.

З усіх цих причин настійно рекомендується вимагати таких тестів у професійного постачальника лабораторних послуг, де є доступна експертиза для інтерпретації результатів.

Автоматизовані тести на антитіла (ІФА та інші імуноаналізи)

Ці тести виявляють наявність та кількість антитіл раннього (IgM, можливо IgA) або пізнього (IgG) типу проти ГРВІ-CoV-2 у крові. Час тесту - 1-3 години. Вони підтримують діагностику інфекції, доповнюють методи прямого виявлення, а також можуть використовуватися для збору епідеміологічних даних. Як і при всіх інфекціях, правило виявлення антитіл полягає у тестуванні двох зразків пацієнтів (одна з 1 тижня захворювання, а інша через 2-3 тижні пізніше) на правильний результат.

Ці перевірені якісні, автоматизовані тести також підходять для скринінгу великої маси. Кращі тести якості показують, що антитіло продукується проти білка S1 вірусу. Більш чутливі та надійні, ніж швидкі тести на антитіла, даючи значно меншу кількість хибнопозитивних чи помилково негативних результатів.

Наразі ці тести впроваджуються та тестуються в Угорщині і незабаром будуть доступні на діагностичній палітрі SYNLAB.

Помилково негативний забір зразків на ранніх стадіях захворювання може дати помилково негативний результат, але надійність можна підвищити, протестувавши кілька антитіл разом (наприклад, IgA/IgM та IgG) для відбору проб на пізніх стадіях захворювання. Крім того, не має значення, до якого антигену вірусу антитіло тестується та наскільки воно специфічне для вірусу SARS-CoV-2.

Жоден із наявних на сьогодні серологічних тестів не підходить для доказування гострої інфекції. Жоден із методів дослідження крові не може чітко продемонструвати або виключити можливу інфекцію з будь-якого зразка крові. Тест на ПЛР має важливе значення для визначення поточної заразності. Тому сукупна безпека RT-PCR та скринінгу антитіл забезпечує найбільшу впевненість у виявленні інфекції.