Слина як додаткове середовище для дослідження відома ендокринологам понад 40 років. Дослідження слини дозволяє уникнути забору крові з вени та пов’язаного з цим стресу, болю в місці проколу вени, відвідування пацієнта на клінічному робочому місці або навпаки клінічного персоналу в домашньому середовищі пацієнта.
Збір слини легко приймається пацієнтами, неінвазивний і вимагає мінімальних тренувань. Таким чином, це дозволяє збирати безліч зразків для дослідження будь-яких внутрішньо-індивідуальних біологічних змін. Незважаючи на перспективні аналітичні переваги та переваги з точки зору вартості та співпраці пацієнтів, аналізи слини не увійшли до клінічної практики. Єдиним винятком є кортизол при діагностиці синдрому Кушинга.
Збір та аналіз
Існує два основних методи збору слини - пасивний слюнотеча та абсорбент (зазвичай ватний тампон або синтетичний тампон). Методології порівнюються в Таблиці No. 2. У клінічній практиці та в більшості досліджень слина збирається за допомогою абсорбентів, з яких її згодом отримують центрифугуванням. В даний час доступні кілька комерційних труб для збору від декількох виробників. У всіх системах використовуються тампони, які вводяться на точно визначений час (зазвичай 1-2 хвилини) або під язик, або на внутрішню сторону щоки, де вони всмоктуються в слину, а потім вставляють її в контейнер для збору.
Завдяки стабільності в слині стероїди безпосередньо призначені для визначення в слині. Навіть при зберіганні при кімнатній температурі глюкокортикоїди та андрогени в «необробленій» слині стабільні протягом декількох днів, що дозволяє відправляти зразки в лабораторію поштою. Пептиди більш вимогливі до належної доаналітичної обробки зразків - вони більшою мірою адсорбуються на стінках пробірок, а крім того, слина містить протеолітичні ферменти, які спричинюють швидку деградацію пептидних гормонів. Втрати внаслідок адсорбції та деградації можна запобігти, використовуючи спеціальні пробірки (так звані кріотрубки з низьким вмістом білка) та додаючи консерванти (наприклад, ЕДТА). Рекомендується вимірювати трансферрин слини, щоб виключити можливе зараження крові. Важливо, щоб лабораторії, що досліджують зразки слини, перевіряли матрикс слини. Проста заміна слини аналізами, які в основному призначені для вимірювання стероїдів у крові, як правило, призводить до неточностей.
Показання та перспективи для клінічного використання тесту на гормони в слині
Показання для дослідження гормонів у слині наведені в таблиці No. 3.
Скринінг на гіперкортицизм (синдром Кушинга)
Моніторинг фізіологічних та патологічних гормональних змін у спортивній медицині
Наразі сеча та кров є єдиною прийнятою рідиною для антидопінгових досліджень - як повідомляє Всесвітнє антидопінгове агентство. Зразки слини можуть вирішити деякі особливості антидопінгового тестування - вони прості, неінвазивні, нейтральні до статі та безпосередньо контрольовані. І останнє, але не менш важливе: вони мають обмежені можливості фальсифікації, що є основною проблемою при дослідженні зразків сечі. Таким чином, лише питання часу, коли обстеження екзогенно введених стероїдів (або інших заборонених гормональних речовин) у слині розширить можливості антидопінгового моніторингу спортсменів. Примітно, що слина вже широко використовується для контролю за вживанням наркотиків на робочому місці, в клінічній токсикології, кримінальному законодавстві та в програмах боротьби з наркотиками.
Моніторинг стероїдів у хворих на рак адренокортикалу та лікуваних мітотаном
Мітотан є препаратом першого вибору в ад'ювантній терапії у пацієнтів з раком надниркових залоз - чи після повної резекції, рецидиву, чи у випадках непрацездатного та/або метастатичного АКС. Його ефект (прямий цитотоксичний вплив на клітини адренокортикалу та блокада стероїдогенезу шляхом інгібування 20,22-десмолази та 11β-гідроксилази) індукує адренокортикальну недостатність, що вимагає замісної терапії гідрокортизоном. Ні сироватковий кортизол не можна використовувати для моніторингу замісної терапії, оскільки мітотан підвищує рівень кортизолзв’язуючого глобуліну (КБГ) (тому рівень кортизолу в сироватці крові підвищений) або вільного кортизолу в сечі. Мітотан також збільшує кліренс стероїдів, тому рівень вільного кортизолу в сечі підвищується, і пацієнтам потрібні 2-3 рази більші дози гідрокортизону для досягнення адекватної заміни.
Визначення рівнів АКТГ можна використовувати як непрямий показник, але слід мати на увазі, що рівні пацієнтів пульсують і пригнічуються протягом тривалого часу у пацієнтів з АКС із стійким гіперкортицизмом. Кортизол слини не впливає на зміни рівня КБГ, і, корелюючи з рівнем вільного кортизолу в сироватці крові, точніше відображає замісну терапію гідрокортизоном у пацієнтів, які отримують мітотан. Тут слід підкреслити, що обраною методологією є рідинна хроматографія високого тиску (ВЕРХ) із тандемною мас-спектрометрією (LC-MS/MS). Це пояснюється тим, що індуковане мітотаном інгібування стероїдогенезу призводить до накопичення проміжних сполук та структурно подібних стероїдів, які викликають перехресну реактивність (з ендогенними стероїдами, такими як 6β-гідроксикортизол, 21-дезоксикортизол, кортикостерон та кон'юговані похідні кортизолу кортизолу). (електрохімілюмінесцентний імуноаналіз).
Визначення пептидних гормонів
У слині відсутні стандартні стандарти для більшості пептидних гормонів. Цей факт зазвичай використовується для кількісного визначення пептидних гормонів, коли вони служать перспективними маркерами специфічних захворювань порожнини рота і, ймовірно, стануть в нагоді при пухлинах голови, шиї та порожнини рота.
Висновок
Клінічна користь визначення гормонів у слині незаперечна та занижена. Основною та найбільш часто згадуваною перешкодою є відсутність досліджень, стандартизації та еталонних стандартів, але всі ці проблеми є каменем спотикання у визначенні гормонів "загальними" методами у "стандартних" рідинах організму. Я сподіваюся, що визначення гормонів у слині стане звичайною частиною рутинної клінічної ендокринологічної практики.
Література: