Використання звичайного гістологічного фарбування проти спеціального фарбування в університетській лікарні Сан-Ігнасіо
Мік, Б. Еугеніо А., де Штіфкен, Паула Р., Харамільо, Луїс Фернандо
Резюме
Хронічний мультифокальний атрофічний гастрит з кишковою метаплазією вважається еволюційним кроком у розвитку карциноми шлунка, головним чином у географічних районах високого ризику, де він має характер ендемічного захворювання.
Вони поділяються на повну кишкову метаплазію та неповну кишкову метаплазію; остання - така, що має більшу тенденцію до диспластичних змін та еволюції до злоякісних новоутворень.
Розрізнення цих двох типів проводиться на основі морфологічного вигляду епітелію; Однак, враховуючи прогностичні та терапевтичні наслідки цієї знахідки, бажано використовувати спеціальні методики, що дають патологоанатому більшу точність для компрометації надійного діагнозу.
У цій роботі ми порівнюємо узгодженість класифікації кишкової метаплазії в тканинах, отриманих шляхом біопсії та пофарбованих гематоксиліном та еозином, та спеціальне фарбування тієї самої тканини HID (високий залізний діамін), який виявляє продукцію сульфомуцинів за допомогою імуноферментної реакції., відмітна ознака неповної кишкової метаплазії.
Коефіцієнт Каппи продемонстрував помірний збіг, нижчий, ніж очікувалося через випадковість, тому ми вважаємо, що цей метод слід застосовувати для відповідної типізації цього розладу або, принаймні, резервувати його для випадків більшої діагностичної складності.
Вступ
З огляду на великий бум і помітний розвиток, який ендоскопічні методи мали в останні роки, вдалося виявити та описати початкові або початкові неопластичні зміни на слизовій оболонці шлунка, маючи можливість діагностувати їх ще за роки до їх появи відверто розвиненої карциноми (1).
З епідеміологічної та біологічної точки зору описано значну взаємозв'язок між кишковою метаплазією шлунка та розвитком карциноми шлунка (2), ризик, який пропорційний масштабу метапластичного процесу та його фенотипу (2).
Коли метаплазія кишечника є фенотипом товстої кишки, ризик еволюції до злоякісного процесу більший, ніж коли фенотип подібний до фенотипу тонкої кишки (2-3).
Кишкова метаплазія визначається як наявність епітелію, подібного до епітелію слизової оболонки кишечника, в іншому місці, крім кишечника. Ці зміни також можна спостерігати в стравоході, але частіше в слизовій оболонці шлунка (5).
Генезис процесу не зовсім зрозумілий; Спочатку вважалося, що причиною стала "неповноцінна регенерація" епітеліальних клітин, втрачених внаслідок дії різних подразників, постулюючи тим самим існування екологічного фактора, відповідального за цей дефект; інші дослідники інтерпретують цю зміну як справжню мутацію в структурі ДНК (2).
Доктор Пелайо Корреа:
На підставі його досліджень, проведених в ендемічних районах раку шлунка як у Колумбії (департамент Наріньо та нагір'я Кундібояцен), так і в інших країнах, де поширеність і частота цієї неоплазії надзвичайно висока (Чилі та Японія).
Сформулював послідовність або біологічний континуум, згідно з яким в зонах ризику існують різні фактори (генетичні, екологічні, дієтичні та ін.), Які сприяють еволюції пацієнтів від поверхневого до дифузного хронічного гастриту, а потім до хронічного атрофічного гастриту, мультифокального зі змінами кишкової метаплазії, спочатку повного типу або тонкої кишки, а пізніше неповного типу або товстої кишки, що може мати диспластичні зміни зростаючої тяжкості, і, нарешті, розвивається кишковий варіант шлункової карциноми (2).
Гістологічно типи метаплазії розрізняють відповідно до їх морфологічних аспектів.
При повній метаплазії кишкового або тонкого кишечника залозисті склепи мають тенденцію бути прямими і покритими зрілими поглинаючими келихоподібними клітинами з чітко визначеною межею кисті та клітинами Панета в основі крипт.
Келихоподібні клітини продукують сіаломуцини та/або сульфомуцини, але секреція сульфомуцинів стовпчастими клітинами відсутня (2-5, 8) (фото 1).
При неповній або товстій кишкової метаплазії кишечника:
Крипти зазвичай звивисті або розгалужені в основі, що дає їм горезвісний аспект дезорганізації їхньої архітектури; крім того, спостерігається втрата межі кисті та відсутність клітин Панета. При цьому типі метаплазії келихоподібні клітини можуть виділяти сиало та/або сульфомуцини, а стовпчасті клітини характерно виділяють сульфомуцини (2-5, 8) (Фото 2). Тобто основна відмінність, з гістохімічної точки зору, полягає у виробництві чи ні сульфомуцинів цими стовпчастими клітинами, залежно від типу існуючої метаплазії.
Частота кишкової метаплазії у шлункових біопсіях, що вивчались з різних причин, становила від 23 до 25%, при цьому повний тип частіше спостерігався у 66%, ніж неповний тип з 12% (6).
Незважаючи на те, що теоретично правильна класифікація типу кишкової метаплазії не повинна представляти великих труднощів, у повсякденній практиці патологоанатома це справжня проблема, особливо через тенденцію до спільного існування різних фенотипів зразок та спотворення тонких цитологічних деталей під час обробки його.
Враховуючи прогностичні та терапевтичні наслідки, правильне визначення типу кишкової метаплазії, присутньої при біопсії шлунка, має життєво важливе значення (2-4).
Цю типізацію слід встановлювати більш об'єктивно на основі визначення слизових речовин та ферментів, що присутні в метапластичній тканині, а не лише з простою морфологічною оцінкою тканини, забарвленої гематоксиліном та еозином (4).
Матеріали і методи
Для того, щоб продемонструвати переваги додаткових гістохімічних методів та їх значення при типізації типу метаплазії шлункової кишки, у нашому відділенні було проведено конкордантне дослідження, де двоє навчених спостерігачів повинні класифікувати біоптати шлунка з метапластичними змінами, спочатку досліджуючи тканину, забарвлену рутинна техніка (гематоксилін та еозин) і, згодом, проведення спеціального HID фарбування на одній і тій же тканині; це фарбування вважається золотим стандартом для імуноферментної класифікації різних типів метаплазії кишечника (1-2, 4, 7-8).
Це спостереження виконувалось незалежно та з «замаскованими» табличками, щоб уникнути упереджень, залежних від спостерігача.
Сукупність досліджень була відібрана з наявних матеріалів справи у відділенні патології університетської лікарні Сан-Ігнасіо протягом першого періоду. з січня 1997 року по 31 грудня того ж року.
За допомогою гістохімічної методики IDH розглядали повну метаплазію кишкового або тонкого кишечника, якщо там є позитив або негатив у келихоподібних клітинах і негатив у стовпчастих клітинах, а неповна метаплазія кишкового або товстого кишечника вважається такою, коли позитивність або негативність у келихоподібних клітинах та позитивність у стовпчастих клітинах, надаючи коричневе або чорне забарвлення і, таким чином, відображаючи вироблення сульфомуцинів.
Досліджені біоптати шлунка
Для включення в дослідження були розглянуті всі біопсії шлунка, обстежені в нашому відділенні за зазначений період часу, і там, де спостерігались однозначні зміни кишкової метаплазії без супутньої присутності новоутворень; Виключались випадки, коли парафіновий блок виснажувався і не дозволяв проводити HID-фарбування, а також ті випадки, коли метапластичні зміни були вогнищевими, що не можна розглядати в контексті мультифокального хронічного атрофічного гастриту.
З урахуванням цих міркувань із 81 зразка, який відповідав критеріям включення, остаточно для дослідження було залишено 60 оптимальних зразків.
Для оцінки узгодженості використовували простий статистичний тест Каппи для дихотомічних змінних з рівнем значимості 5% (P ФОТОГРАФІЯ 1. Морфологічний аспект повної кишкової метаплазії з наявністю регулярних залозистих структур, збереженням кутикулярної або киткової межі та наявністю клітин з еозинофільною зернистою цитоплазмою або клітинами Панета на рівні фовеолярної основи, ВІН, 10x.
ФОТОГРАФІЯ 2. Повна метаплазія кишечника з HID фарбуванням, що показує наявність сіаломуцинів (синій колір) та сульфомуцинів (коричнево-чорний колір) лише в келихоподібних клітинах. У стовпчастих клітинах є лише сліди сіаломуцинів, HID 10x.
ФОТОГРАФІЯ 3. Морфологічний аспект неповної кишкової метаплазії з наявністю неправильних звивистих залозистих структур із тенденцією до розгалуження та явною архітектурною дезорганізацією. Відсутність клітин Панета, ВІН, 10x.
ФОТОГРАФІЯ 4. Неповна кишкова метаплазія з HID фарбуванням, що свідчить про наявність сиаломуцинів (синій колір) та сульфомуцинів (коричнево-чорний колір) у келихоподібних клітинах та клітинках стовпців, HID 10x.
Аналіз даних проводили за допомогою таблиці 2 х 2, де вони розташовувались наступним чином: