Вплив споживання лободи на біохімічні показники та гістоморфометрію кишечника у щурів із ожирінням

Мета

. Визначити вплив споживання трьох сортів лободи на біохімічні показники та кишкову гістоморфометрію у щурів із ожирінням.

scielo

Матеріали і методи

. Було використано 42 пачки щурів Гольцмана, що страждали ожирінням, розподілених за семи процедур по шість тварин, котрих годували протягом 23 днів однією із семи дієт: контрольна обезогенна, а інші також містять 20% обробленої кіноа Altiplano, Pasankalla та Negra Collana шляхом варіння або смаження. В кінці періоду годування брали проби крові для визначення рівня глюкози, тригліцеридів та ЛПВЩ; пізніше тварин приносили в жертву і зважували печінку, тонкий кишечник (ІД) та нирки; Зразки ID були вилучені для кишкової гістоморфометрії. Дані піддавали ANOVA з використанням GLM за повністю рандомізованою конструкцією з факториальним розташуванням 3x2 плюс контроль та порівняння засобів за допомогою тесту Фішера.

Результати

. Рівні глюкози, тригліцеридів та ЛПВЩ не мали різниці порівняно з контрольною групою; крім того, експериментальні дієти не впливали на вагу нирок. Однак ІД показав більшу вагу в контрольній групі порівняно з тими, що містять перероблену лободу. На гістоморфометрію ІД експериментальні дієти суттєво не впливали.

Висновки.

Годування щурів, що страждають ожирінням, дієтами, що містять різновиди переробленої лободи, не змінює біохімічні параметри і не впливає на кишкову гістоморфометрію; однак це зменшує вагу тонкої кишки у ожирілих щурів.

Ключові слова:
Chenopodium quinoa; Дієта з високим вмістом жиру; Ожиріння; Щури

Об’єктивна

. Визначити вплив споживання трьох сортів лободи на біохімічні показники та кишкову гістоморфометрію у щурів із ожирінням.

Матеріали і методи

. Всього було використано 42 ожирілих щурів Гольцмана, організованих за сім процедур по шість тварин, кожна годувалась протягом 23 днів однією із семи дієт: обезогенним контролем, а інші шість містять 20% кіноа Альтіплано, Пасанкалла або Негра Коллана оброблений варінням або запіканням. В кінці періоду годування брали зразки крові для визначення рівня глюкози, тригліцеридів та рівня С-ЛПВЩ; пізніше тварин приносили в жертву, а печінку, тонкий кишечник і нирки зважували. Зразки тонкої кишки витягували для кишкової гістоморфометрії. Дані аналізували за допомогою ANOVA з використанням GLM за повністю рандомізованим дизайном із 3x2 плюс контрольним факторіальним розташуванням та порівнянням засобів за допомогою тесту Фішера.

Результати

. Рівні глюкози, тригліцеридів та С-ЛПВЩ не відрізнялись у порівнянні з контрольною групою; крім того, на вагу нирок експериментальні дієти не впливали. Однак тонкий кишечник мав більшу вагу в контрольній групі порівняно з тими, що містять перероблену лободу. Експериментальні дієти істотно не впливали на гістоморфометрію тонкої кишки.

Висновки.

Годування щурів, що страждають ожирінням, дієтами, що містять перероблені сорти кіноа, не змінює біохімічні параметри і не впливає на кишкову гістоморфометрію; однак це зменшує вагу тонкої кишки у ожирілих щурів.

Ключові слова:
Chenopodium quinoa; Дієта з високим вмістом жиру; Ожиріння; Щури

Ожиріння - це захворювання, пов’язане із хронічним запальним процесом низької ступеня тяжкості, що спричиняє зміну метаболічної та ендокринної функції жирової тканини 1 1. Бастос Д.Х., Рогеро М.М., Ареас ЯГ. Механізми дії біоактивного компосту двох продуктів не є контекстом запальних процесів, пов'язаних з ожирінням. Arq Bras Endocrinol Metab. 2009; 53 (5): 646-56.; це в свою чергу породжує більший викид жирних кислот, гормонів та прозапальних молекул 2 2. Рейес Дж. Запальні характеристики ожиріння. Преподобний Чіл Нутр. 2010; 37 (4): 498-504. . Є кілька факторів, що спричиняють ожиріння, і всі вони, хоча і в різному ступені, сприяють дисбалансу між споживанням їжі та витратою калорій 3 3. Савіно П. Ожиріння та неінфекційні захворювання, пов’язані з харчуванням. Преподобний Коломб Cir. 2011; 26: 180-95. .

Серед стратегій боротьби з ожирінням є модифікація харчових звичок, яка полягає у підтримці здорового та збалансованого харчування, що включає всі групи продуктів харчування 4 4. Izquierdo A, Armenteros M, Lances L, Martin I. Здорове харчування. Преподобний Кубана Енфермер. 2004; 20 (1): 1-1.; особливо ті, що розглядаються як функціональні продукти харчування, які, крім забезпечення поживними речовинами, сприяють зміцненню здоров’я та запобігання захворюванням 5 5. Дуран Р, Валенсуела А. Японський досвід використання продуктів харчування Фошу. Справжні функціональні продукти харчування. Преподобний Чіл Нутр. 2010; 37 (2): 224-33. . Функціональні харчові продукти містять біоактивні сполуки, які діють на сигнальні шляхи, що беруть участь у запальній реакції, і мають позитивні ефекти при лікуванні та профілактиці незаразних захворювань 6 6. Widlansky ME, Hamburg NM, Anter E, Holbrook M, Kahn DF, Elliott JG, та ін. Гострі добавки EGCG усувають дисфункцію ендотелію у пацієнтів з ішемічною хворобою серця. J Am Coll Nutr. 2007; 26 (2): 95-102.

7. BonfiliL, CecariniV, AmiciM, Cuccioloni M, Angeletti M, Keller JN, et al. Природні поліфеноли як модулятори протеасом та їх роль як протиракові сполуки. FEBS J. 2008; 275 (22): 5512-26. - 8 8. Mandel S, Youdim B. Поліфеноли катехіну: нейродегенерація та нейрозахист при нейродегенеративних захворюваннях. Free Radic Biol Med.2004; 37 (3): 304-17. .

У цьому сенсі метою цього дослідження було визначити біохімічні параметри та кишкову гістоморфометрію щурів із ожирінням, яких годували дієтами, що сприяють ожирінню, та які містили лободу, зварену або смажену, трьох різних сортів (Altiplano, Pasankalla та Negra Collana).

Мотивація проведення дослідження. Ожиріння характеризується надлишком жирової тканини в організмі, і одним із способів боротьби з нею є прийом функціональних продуктів харчування, таких як лобода, яка містить біоактивні сполуки, які містяться у більших концентраціях у кольорових сортах.

Основні висновки. Було встановлено, що споживання вареної або смаженої лободи сортів Пасканкала та Негра Коллана у пацуків із ожирінням зменшує вагу тонкої кишки у пацуків із ожирінням, збільшення яких спричинене тривалим споживанням дієти з високим вмістом жиру.

Наслідки. Вживання лободи може бути доступною альтернативою для зменшення запалення тонкої кишки у людей із ожирінням.

ТВАРИНИ ЕКСПЕРИМЕНТАЦІЇ

Були включені сорок два 60-денних щури з ожирінням Гольцмана із ферми тварин зоотехнічного факультету Національного аграрного університету Ла Моліна, які отримували дієти з високим вмістом жиру до класифікації ожиріння відповідно до встановлених рекомендацій 13 13. Novelli EL, Diniz YS, Galhardi CM, Ebaid GMX, Rodrigues HG, Mani F, et al. Антропометричні параметри та маркери ожиріння у щурів. Лабораторія Anim. 2007; 41 (1): 111-9. . Дослідних тварин поміщали в окремі клітини, розділені на сім груп по шість щурів на групу, яка отримувала обезогенні дієти, включаючи перероблену лободу, протягом 23 днів (з жовтня по грудень 2016 року), на додаток до контролю.

Всі процедури проводились відповідно до рекомендацій Міждисциплінарного центру з вивчення біоетики Університету Чилі щодо догляду та використання лабораторних тварин 14 14. Cardozo CA, Mrad A, Martínez C, Rodríguez E, Lolas F. предмет експерименту: технічні та етичні аспекти [Інтернет]. Чилі: Міждисциплінарний центр досліджень з біоетики Університету Чилі, 2007 [цитовано 14 червня 2017]. Доступно за адресою: https: // www. healthresearchweb.org/files/libroani-males.pdf .

КВІНОА

Сорти лободи (Chenopodium quinoa) оцінювали: Altiplano, Pasankalla та Negra Collana. Їх придбали на місцевому ринку, щоб потім видалити домішки та промити їх вручну для переробки. Для варіння зерна додавали в киплячу дистильовану воду 1:10, зливаючи через 20 хвилин 15 15. Dini I, Tenore G, Dini A. Вміст антиоксидантної сполуки та антиоксидантна активність до і після варіння в солодкому і гіркому Chenopodium quinoa насіння. LWT - Food Sci Technol. 2010; 43 (3): 447-51. . При цьому обсмажування проводилося на прямому вогні до отримання темного кольору при 120 ° С. Оброблену кіноа сушили при 60 ° C протягом трьох годин, щоб її подрібнити, а пізніше включення 20% кіноа в обесогенні дієти здійснювали наступним чином: контрольна дієта без кіноа (T1), підсмажений Altiplano (T2), варений Altiplano (T3), підсмажена пасанкалла (T4), варена пасанкалла (T5), підсмажена негра Коллана (T6) та варена негра Collana (T7).

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНІ ДІЄТИ

Дієта з високим вмістом жиру вважається найкращою моделлю індукції ожиріння, оскільки вона дозволяє отримати більші накопичення жирової тканини 16 16. Woods SC, Seeley RJ, Rushing PA, D'Alessio D, Tso P. A Controlled High-Fat Diet Induces синдром ожиріння у щурів. J Nutr. 2003; 133: 1081-87., дія якого схожа на ожиріння у людей шляхом відкладення черевної, підшкірної, внутрішньочеревної та заочеревинної жирової тканини; та на більш запущених стадіях у м’язах, печінці та підшлунковій залозі 17 17. Малафая А.Б., Нассіф П.А., Рібас Каліфорнія, Аріде Б.Л., Сью К.Н., Крус М.А. Індукація де обсидідає додаткових щурів. ABCD Arq Bras Cir Dig. 2013; 26 (Додаток 1): 17-21. . Експериментальні дієти (табл. 1) були підготовлені на основі підтримуючої дієти 18 18. Національна наукова рада. Вимоги до поживних речовин лабораторних тварин [Інтернет]. Вашингтон, округ Колумбія: Національна академія преси, 1995 [цитоване рішення від 24 липня 2017 року]. Доступно за адресою: https: // www. ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK231927, і їм вводили в ad libitum, так само, як вода.

СОМАТИЧНІ ПОКАЗНИКИ

В кінці експериментального періоду та після відповідного голодування тваринам знеболювали кетамін та ксилазин для вимірювання окружності грудної клітки та окружності живота рулеткою (Seca, модель 203), носо-анальної довжини за допомогою ноніуса (Uyustools, 300 ± 0,02 мм) для визначення індексу Лі (IL), що визначає значення ожиріння більше 0,3 та індекс маси тіла (ІМТ) зі значеннями більше 0,68 г/см2.

ВИЗНАЧЕННЯ ГЛЮКОЗИ, ТРИГЛИЦЕРИДІВ І ЛПВЩ

Зразки крові витягували шляхом перпендикулярного зрізу на кінчику хвоста на два мм і м'яким натиском для збору крові через капіляри, обробляючи тест-смужками за допомогою On Call (r) Advanced для визначення рівня глюкози та місії (r ) Вимірювач холестерину для тригліцеридів (TG) та HDL-C. Так само було визначено співвідношення TG/HDL-C для оцінки атерогенного ризику, що виникає в результаті споживання оцінених дієт.

ОРГАН ОТРИМАННЯ

Всіх тварин приносили в жертву шляхом серцевої пункції відповідно до етичних норм для експериментів на тваринах. Після підтвердження клінічної смерті щурів печінку, тонкий кишечник і нирки видаляли, промивали сольовим розчином, сушили на промокальному папері і зважували.

МАЛЕНЬКА КІШКОВА ГІСТОРМФОМЕТРІЯ

Сегменти тонкої кишки витягували і занурювали в 10% формаліну. Зразки зневоднювали за допомогою спиртових розчинів меншої до вищої концентрації, їх замочували в смолах та восках до затвердіння заморожуванням, а згодом вирізали зрізи, які фарбували гематоксилін-еозином. Нарешті, фіксований зразок був встановлений на предметних стеклах для його оцінки 19 19. Caruso M, Demonte A. Гістоморфометрія тонкої кишки щурів, підданих дії різних джерел білка. Алім Нутр. 2005; 16 (2): 131-36. . Довжину, ширину, площу ворсинок та кількість келихоподібних клітин визначали із загальної кількості 15 ворсинок для кожної тварини в кожній групі за допомогою оптичного мікроскопа (Leica, модель DM750) та аналізатора зображення (Leica, модель ICC50W).

СТАТИСТИЧНИЙ АНАЛІЗ

ГЛЮКОЗ, ТРИГЛИЦЕРИДИ ТА ЛПВЩ

Не було різниці між групами у визначенні глюкози, тригліцеридів та ЛПВЩ. Однак споживання дієти з високим вмістом жиру впливало на ці параметри, оскільки рівень глюкози та тригліцеридів перевищував нормальний рівень, встановлений для здорових тварин (глюкоза 48,4 - 91,2 мг/дл, тригліцериди 60,4 - 92,3 мг/дл), тоді як ЛПВЩ -С рівні (45,5 - 56,9 мг/дл) були нижчими, ніж встановлені для тварин цього віку 20 20. Goñi ACL, Blanco D, Peña A, Ronda M, González BO, Arteaga ME та ін. Гематологічні та біохімічні значення щурів Sprague Dawley, вироблених на CENPALAB, Cenp: SPRD. Rev Electron Vet. 2011; 12 (11): 1-10. - 21 21. Ihedioha JI, Noel-Uneke OA, Ihedioha TE. Референтні значення сироваткового ліпідного профілю щурів-альбіносів (Rattus norvegicus) різного віку та статі. Комп Клін Патол. 2013; 22 (1): 93-99. .

ОРГАН ОТРИМАННЯ

МАЛЕНЬКА КІШКОВА ІСТОРОМОРФОМЕТРІЯ

Відмінностей між оціненими показниками порівняно з контрольною групою не виявлено. Однак наявність пластирів Пейєра було засвідчено у групах, які споживали варене Altiplano та Negra Collana quinoa (Таблиця 2).

Включення підсмаженої лободи в раціон ожирілих щурів не змінило харчовий статус від ожиріння до здорового у досліджуваній популяції. З іншого боку, споживання дієт з високим вмістом жиру призводить до гіпертрофії тонкої кишки через посилений ріст кишкових ворсин на рівні тонкої кишки (22), однак групи, які вживали сорти Пасканкалла і Негра Коллана, показали меншу вагу тонкої кишки, що, можливо, пов’язано із вмістом біоактивних сполук, що містяться у більшій концентрації у забарвлених сортах 23 23. Тан Y, Li X, Чжан В, Чень Р, Лю Р, Цао Р. Характеристика фенолів, бетанінів та антиоксидантна активність у насінні трьох Chenopodium quinoa Willd. генотипи. Food Chem.2015; 166: 380-8. - 24 24. Tang Y, Li X, Chen P, Zhang B, Hernandez M, Zhang H, et al. Характеристика композицій жирних кислот, каротиноїдів, токоферолу/токотрієнолу та антиоксидантної активності у насінні трьох Chenopodium quinoa Willd. генотипи. Food Chem.2015; 174: 502-8. .

Не виявлено відмінностей у ІМТ, біохімічному профілі (глюкоза, TG, HDL-C), співвідношенні TG/HDL-C, вазі печінки та нирок та гістоморфометрії тонкої кишки між експериментальними групами. Однак отримані значення ІМТ перевищують значення, встановлені на еталонних кривих фізичного зростання самців щурів (ІМТ = 0,56 г/см2) на основі хронологічного віку та соматичного дозрівання 25 25. Cossio-Bolaños M, Campos RG, Vitoria RV, Fogaça RT, De Arruda M. Значення надійності соматичних показників у самців щурів Wistar. Оновлення харчування. 2010; 11 (4): 296-302. . Також було показано, що лобода у різних її формах споживання (пророщених, ферментованих, смажених тощо) не впливає на біохімічні показники (10-11), посилюючи отримані результати. Співвідношення TG/HDL-C у людини вважається показником атерогенного ризику та резистентності до інсуліну 26 26. Da Luz PL, Favarato D, Junior JR, Lemos P, Chagas AC. Високе співвідношення тригліцеридів до співвідношення ЛПВЩ-холестерин передбачає велику ішемічну хворобу. Клініки. 2008; 64: 427-32., у досліджуваній популяції, включення переробленої лободи в раціон з високим вмістом жиру не змінило атерогенний ліпідний профіль або зменшило ризик розвитку захворювання.

Серед обмежень слід зазначити, що визначення біохімічних параметрів проводилося за допомогою приладів швидкого тестування, що використовуються у людей, які мають специфічні діапазони вимірювань на основі відбивної фотометрії, завдяки їх низькій вартості та простоті в експлуатації. Аналогічним чином, включення негативної контрольної групи, тобто групи здорових щурів, які харчуються стандартною дієтою та дистильованою водою, може бути доречним для порівняння їх із ожирілими, які споживали дієти на основі лободи.

Нарешті, робиться висновок, що споживання переробленої лободи не знижує рівні глюкози та тригліцеридів, а також не підвищує рівні ЛПВЩ; так само, це не змінило гістоморфометрії тонкої кишки у ожирілих щурів. Однак включення переробленої лободи сортів Пасканкалла та Негра Коллана зменшило вагу тонкої кишки у щурів із ожирінням. Слід врахувати, що з огляду на ці висновки на моделях тварин неможливо дати конкретну рекомендацію щодо споживання одного з досліджених сортів, оскільки для доповнення результатів необхідні нові дослідження.