Для:
Еміліо Кастро К.М.
Фонд Чилі

якості

24.1. Вступ

Ця робота має наступні цілі:

Надайте додаткову інформацію про харчову роль двох найважливіших вітамінів для кормів для аквакультури: вітаміну С та холіну.

Перегляньте основи сучасних аналітичних методів, рекомендованих для їх визначення.

24.2. Загальна довідка

Вітаміни відповідають органічним хімічним сполукам, які необхідні в невеликих кількостях для нормального росту, розмноження, здоров'я та підтримки метаболізму риби та креветок.

Разом з мінералами вони вважаються мікроелементами і вважаються життєво важливими, оскільки вони не можуть синтезуватися рибою.

Особливий інтерес пробуджує вітамін С, оскільки він має вимогу, яка варіюється залежно від фізіологічного стану тварини і тому, що історично стабільність його зберігання була дуже поганою.

Вітаміни класифікуються на 8 типів В, які розчиняються у воді, макровітаміни L, аскорбінова кислота, холін і міозитол, та такі, що розчиняють жири, такі як так звані жиророзчинні, які відповідають A, D, E і К.

Таблиця 24.1. показана рекомендована/необхідна потреба у вітамінах мг/кг дієта (крім випадків, коли зазначено) для максимального збільшення ваги для різних видів.

Таблиця 24.1. Рекомендовані/необхідні потреби у вітамінах для максимального збільшення ваги для різних видів (мг/кг, крім випадків, коли зазначено) Вітаміни Лососі (1) Кури (2) (0–6 тижнів) Свині (3) (1–5 кг) Соми (4)
ДО2500 МО1500 МО2200 МО1000–2000 МО
D32400 МО200 МО220 МО500–1000 МО
І30 МО10 UI16 МО30 МО
К100,50,5R (5)
C.100NR (6)NR (6)60
Тіамін101.81.51
Рибофлавіндвадцять3.649
B6103два3
Пантотенова кислота40101210–20
Ніацин15027двадцять14
Біотин10,150,08R (5)
Фолієва кислота50,550,3NR (6)
B120,020,0090,02R (5)
Пагорб30001300600R (5)
Міоінозитол400NR (6)NR (6)NR (6)

Наведена вище таблиця показує, що рекомендації щодо вітамінів для водних видів набагато перевищують рекомендовані рівні для інших видів, що характеризуються швидкими темпами зростання.

24.3. Вітамін С

24.3.1 Історія

Ізольований Сент-Дьоргі, 1928, ідентифікований як антискорбутичний фактор Кінгом і Во, 1932, названий "аскорбіновою кислотою" Сент-Дьоргі, 1933, і синтезований Райхштаймом, Хавортом і Херстом, 1933.

24.3.2 Основність

Багато видів тварин здатні синтезувати вітамін С, інші види тварин - ні. Вважається, що ця здатність була придбана в процесі еволюційного процесу і згодом була знову втрачена. Риби та ракоподібні ще не змогли придбати цю здатність. Тому вони повністю залежать від достатнього вживання їжі з цим вітаміном.

24.3.3 Позитивні функції

Бере участь у біохімічних реакціях практично з усіма поживними групами.

Діє як фізіологічний антиоксидант.

Це необхідно при утворенні міжклітинної речовини (ретикулуму та колагену) тканин.

Бере участь у формуванні кісток, зубів, відновленні кісток та загоєнні тканин.

Бере участь у дозріванні еритроцитів, вживанні заліза та нормальному підтримці гемоглобіну.

Його пропонують як механізм транспортування водню.

Це пов’язано з адренокортикальною функцією.

24.3.4 Вимоги

Таблиця 24.2. показує різні рекомендовані/необхідні рівні аскорбінової кислоти для лососів залежно від призначення дієтолога.

Таблиця 24.2. Потреба аскорбінової кислоти в лососях Вимоги до діяльності (мета)
50-100 промілеЗапобігає ознакам дефіциту.
250 - 500 ppmДозволяє максимально заживати тканини.
1000 - 2500 промілеДозволяє забезпечити максимальну стійкість до захворювань у лабораторних умовах. Дозволяє максимальний рівень зберігання на рівні тканини.

Джерело: Харді, Р. 1990 (особисте спілкування).

Вітамін С має різну потребу в залежності від призначення дієтолога і сильно визначається фізіологічним станом тварини. Наприклад, у Норвегії загальноприйнятою практикою є дозування їжі 2000 - 3000 ppm вітаміну С протягом 7-10 днів до та після лікування від зовнішніх паразитів.

24.3.5 Симптоми дефіциту

Таблиця 24.3. показує ознаки дефіциту вітаміну С в лососях:

Таблиця 24.3. Ознаки дефіциту вітаміну С в лососях D субклінічна ефективність D клінічна ефективність
Зниження концентрації аскорбінової кислоти в печінці та нирках.Анорексія, менше зростання
Гістологічні зміни та порушення формування хряща, зябер та шкіри.Лордоз, сколіоз
Знижений рівень гормонів щитовидної залози (Т3)Геморагічна екзофтальмія
Підвищення рівня холестерину та тригліцеридів та плазми.Асцит
Знижена здатність зв’язувати залізо.Анемія
Зниження хребетного колагену.Внутрішньом’язові крововиливи
Нижня фагоцитарна здатністьЗатримка загоєння
Менше утворення антитілДепігментація
Зниження концентрації гематоцитів

Окремої уваги заслуговують симптоми клінічної недостатності, що характеризується деформацією кісток: лордоз та сколіоз, спричинені неадекватним синтезом колагену та розривом хребців, та деформації голови з опроміненням зябер, про які свідчить форель з дефіцитом вітаміну С ( Halver, JE, 1957).

Ще одним аспектом, який дуже важливо врахувати перед введенням аналітичної частини вітаміну С, є визначення різних форм аскорбінової кислоти, що в даний час використовуються в кормах для видів аквакультури.

24.3.6 Утворюється аскорбінова кислота

Таблиця 24.4. показані різні форми аскорбінової кислоти, призначені для корму для аквакультури.

Таблиця 24.4. Форми аскорбінової кислоти, що використовуються в аквакормі Рекомендації щодо рекомендацій
Кристалічна аскорбінова кислотаДуже доступний для риби. Однак відомо, що він швидко втрачає свою активність під час гранулювання та зберігання, особливо у вологих продуктах.
Аскорбінова кислота, покрита жиромДуже доступний для риби. Однак він лише 70% активний у ваговій основі завдяки своєму жировому покриву.
Аскорбат-2-сульфатВін має сульфатну групу в активному центрі, що запобігає втратам на окислення. Він має низьку доступність для багатьох активованих водних видів. Це дуже стабільно.
Аскорбат 2Він має фосфатну групу в активному центрі, що запобігає втратам на окислення. Здається, він є більш доступним для риб, ніж сульфатована форма, але активний лише на 15–20%. Його стабільність відмінна.
Аскорбінова кислота, покрита етилцелюлозою.Більш стійкий, ніж кристалічна форма, але менш стійкий, ніж покритий жиром.

Джерело: Харді, Р. 1990 (особисте спілкування).

24.3.7 Визначення вітаміну С у кормі для риб

Дуже важливо мати можливість диференціювати, чи є це визначення аскорбінової кислоти як такої (вільної) чи поліфосфатованої, оскільки процедури різні.

а) Визначення вільної аскорбінової кислоти

Вільну аскорбінову кислоту екстрагують метафосфорною кислотою та визначають за допомогою високоефективної рідинної хроматографії за допомогою електрохімічного виявлення. Наступна блок-схема показує різні етапи, задіяні в цій процедурі.

Зразок рибної їжі.
Подрібнення (10 - 20 г)
Просіювання (сітка 40 меш)
Екстракція вітаміну С метафосфорною кислотою (6%), механічне струшування при постійній температурі (25 ° С)
Центрифугування (10 '/ 4000 об/хв)
Розведення надосадової рідини хлорною кислотою (0,005 М)
Фільтрація
Визначення методом ВЕРХ за допомогою електрохімічного виявлення.

Джерело: Вальдівія, М. 1993 (особисте спілкування).

б) Визначення поліфосфату вітаміну С

Загалом застосовується та ж процедура, що і для вільного вітаміну С. Однак після центрифугування і перед розведенням хлорною кислотою необхідно ферментативно вивільнити вітамін С з фосфатних груп.

24.4. К оліна

Він відповідає водорозчинному вітаміну, який присутній у багатьох тканинах і необхідний у великих кількостях лососевим рибам.

24.4.1 Історія

Метилювання як основний метаболічний процес вперше постулював Хофмейстером в 1894 році, тоді як живий перенос метильних груп продемонстрував Томпсон в 1917 році. Ду Віньє і зі свого боку продемонстрував взаємозв'язок між холіном, метіоніном і гомоцистином між 1939 і 1942 роками.

24.4.2 Позитивні функції

Пагорб характеризується тим, що:

Донор метильних груп у фізіологічних процесах організму.

Беруть участь у синтезі фосфоліпідів, необхідних для транспортування жиру.

Передають стани збудження через гангліозні синапси та нервово-м'язові з'єднання.

24.4.3 Ознаки дефіциту

Поганий ріст і перетворення їжі, ниркові та кишкові кровотечі, зміни жирового обміну.

24.4.4 Метод визначення холіну

Найбільш широко застосовуваний метод визначення вмісту холіну в кормах заснований на випадінні холіну, оскільки діамінохромний тетратіоціанат (реагент Рейнекеата) Холін спочатку екстрагують із зразка, як правило, з використанням метанолу, а потім виділяють гідролізом. Потім холін осаджують у вигляді діамінохромної солі тетратіоціанату в кислому або лужному розчині. Нарешті, промивання проводиться для усунення надлишку реагенту з повторною обробкою, і осад розчиняється в ацетоні, вимірюючись спектрофотометрично (Scott, M.L. та ін., 1976).

24.5. Бібліографія

Халвер, Дж. 1957 рік. Професор з рибного харчування. Університет Вашингтона. ВИКОРИСТАННЯ. Особисте спілкування. 1990 рік.

Харді, Р. 1990 рік. Хімік наглядових досліджень. Північно-західний та Аляска рибний центр. ВИКОРИСТАННЯ. Особисте спілкування. 1991 рік.

Скотт, Л.М. та ін. 1971 рік. Харчування курки. Опублікував М.Л. Скотт Associates. Ітака, Нью-Йорк. стор.530.

Вальдівія, М. 1993. Керівник лабораторії. Фонд Чилі. Особисте спілкування. 1993 рік.