Завдяки нашій серії «За лаштунками» ми подивимось на життя лабораторії ембріонів Центру родючості Reprosys, своїми короткими роботами ми хотіли б допомогти всім зацікавленим зрозуміти науку, що лежить в основі програми колб.

  • Частина 1: Традиційне ЕКО
  • Частина 2: ІКС
  • Частина 3: Зигота
  • Частина 4: Ембріон
  • Частина 5: 6-8 клітинний ембріон
  • Частина 6: Морула
  • Частина 7: Бластоциста
  • Частина 8: Вбудовування
  • Частина 9: AHA
  • Частина 10: Скло
  • Частина 11: Ембріональний розвиток на зображеннях
  • Частина 12: Аналіз сперми
  • Частина 13: Тест HBA
  • Частина 14 Фрагментація ДНК

День 0: Звичайне запліднення (звичайне ЕКО)


День аспірації ооцитів (пункція ооцитів) та підготовка сперми. Зріла яйцеклітина з полярним тілом запліднює подібним чином до природи з партнером із нормальним зображенням сперми та хорошим тестом на фертильність. При цьому сперма досягає яйцеклітини через купчастий шар, що покриває яйцеклітини, а потім один із них здійснює запліднення за допомогою складного біохімічного процесу.

може бути

День 0: ICSI (внутрішньоцитоплазматична ін’єкція сперми)

Зріла яйцеклітина з полярним тілом може бути запліднена, навіть якщо проблема є у чоловіка члена пари. У випадку партнера з ненормальним зображенням сперми та поганим тестом на фертильність необхідно ввести сперму в яйцеклітину за допомогою процедури мікроманіпуляції. Під час ICSI яйцеклітина фіксується утримуючою піпеткою, тоді як інша дуже тонка пірсингова піпетка використовується для доставки сперми, яку вважають найкращою всередині яйцеклітини.

Запліднене яйце, зигота, характеризується 2 предками (пронуклеусом) і 2 полярними тілами. Цей стан видно через 8-14 годин після запліднення протягом 4-5 годин. Два предки (материнський, батьківський) розташовані поряд в середині яйцеклітини, після чого відбувається перший поділ клітини. Якщо в цей час пронуклеуса в яйцеклітині не видно, яйцеклітина вважається безплідною.

Перший поділ клітин ембріонів пре, як правило, відбувається між 20 і 27 годинами після запліднення. На другий день ці ембріони вже перебувають у стані 2-4 клітин. В ідеалі спостерігається синхронний поділ, бластомери мають правильну форму, подібні за розміром, фрагменти, вакуолі присутні в невеликій кількості. Між клітинами ембріона розвивається зв’язок.

Частина 5: День 3 - 6-8 клітинний ембріон

На третій день ембріони досягають 6-8 клітинного поділу. Це може бути датою перенесення ембріонів (перенесення ембріонів), якщо за кількістю та якістю ембріонів можна визначити, які ембріони будуть передані. Ці ембріони повинні відповідати наступним критеріям: спостерігається синхронний поділ, бластомери правильної форми, подібні за розміром, фрагменти, вакуолі присутні в невеликій кількості, між клітинами існує високий ступінь асоціації.

Якщо є понад 3-5 ембріонів, класифікованих як однаково хороші, їх культивують до п’ятого дня.

Частина 6: День 4- Морула

Початковий поділ ембріонів контролюється генетичним запасом яйцеклітини, потім, досягнувши стану 4-8 клітин, загальний генетичний запас власного ембріона повинен бути активований, якщо цього не відбувається, розвиток ембріона припиняється, це називається блоком розвитку.

На четвертий день, дуже важливий поворотний момент у житті ембріонів, у клітинному стані 12-16, його клітини ущільнюються, прилипають одна до одної з тісними клітинними зв’язками, межі клітин зникають, а незалежні клітини стають цілісною клітиною гроно, зародок ожини (морула). У цей день трансплантація ембріонів не відбудеться.

частина: день 5 - Бластоциста

На п’яту добу після запліднення відповідні ембріони розвиваються в бластоцисти, кількість клітин наближається до ста. Ці багато клітин вже присутні в диференційованому стані. Утворюється зовнішній клітинний шар (трофобласт), який згодом відіграє роль у формуванні плаценти, оточуючи заповнену рідиною порожнину (бластоцель), в яку висить внутрішня клітинна маса вузлика ембріона. Плід розвивається із зародкового вузла.

Для вивчення преембріонів у стані бластоцисти використовується детальна система оцінки, на основі якої один або два ембріони найкраще підходять для пересадки. Цікавим явищем є коли розширений, розширений ембріон пульсує (стискається і розширюється) перед тим, як покинути зону.

Частина 8: Вбудовування

Імплантовані ембріони, які вилуплюються з оболонки та вбудовуються в матку приблизно на 7 день.

Незвично, ми хочемо показати цей процес із відео:

Частина 8: Допоміжне штрихування (AHA)

Зародок оточений конвертом, це зона pellucida. Ембріони, що надходять у порожнину матки, повинні вийти з цього конверта, щоб бути вбудованими. Цей процес є штрихуванням. У деяких випадках (вік, густа зона pellucida) може знадобитися розрідження та розкриття оболонки ембріона. Цей процес мікроманіпуляції - це допоміжне штрихування, яке може здійснюватися механічним, хімічним або лазерним процесом.

Частина 10: Вітрифікація

Рясні п’ятиденні ембріони, які не імплантуються і мають хорошу якість, можна зберігати замороженими. Відомі два типи методів кріоконсервації - повільне заморожування та більш складна скляність. У нашому інституті ми віддаємо перевагу останньому, надшвидкому методу. Під час вітрифікації витягується більша частина вмісту води ембріонів, щоб допомогти цьому, рідина бластоцелю зливається за методикою, подібною до допоміжного вилуплення, а потім ембріони поміщають у спеціальну серію розчинів, що також призводить до зменшення у вмісті води. Це мінімізує утворення пошкоджуючих кристалів льоду і стабілізує структуру ембріонів. Ембріони зберігаються на носіях у рідкому азоті при -196 ° C. За незмінних умов ембріони можуть зберігатися необмежений час. Зберігання заморожених ембріонів є широко розповсюдженим і усталеним методом.

Частина 11: Ембріональний розвиток на зображеннях

Від яйцеклітини до бластоцисти доступно лише кілька днів для спостереження за долею ембріонів. Ми хотіли б представити цю розробку за допомогою блок-схеми.

Частина 12: Аналіз сперми

Після періоду зберігання 3-5 днів результат зразка сперми, поданий на лист для оцінки (сперматограма-SPG), порівнюється з такими межами ВООЗ:

  • Обсяг: мінімум 1,5 мл
  • Концентрація: мінімум 15 млн/мл
  • Загальна кількість сперми: мінімум 39 мільйонів/проба
  • Рухливість: мінімум 40%
  • Морфологія: мінімум 4% в нормі

Відповідні значення відносяться до категорії нормозооспермії. Оцінка результату в усіх випадках несе відповідальність андролога.

Наша лабораторія гамет має міжнародну акредитацію СЕРТИФІКАЦІЇ QuaDeGA.

Частина 13: Тест HBA (аналіз зв’язування гіалуроном)

Тест HBA - це метод визначення частки зрілої сперми у свіжому еякуляті на основі здатності зрілої сперми зв’язувати гіалуронову кислоту. Це один крок у процесі запліднення. У природі лише сперма зі зрілим рецептором зв’язування гіалуронової кислоти може зв’язуватися з гіалуроновою кислотою в яйцеклітині. Відсутність цього також може лежати в основі проблеми безпліддя невідомого походження.

Результат тесту аж ніяк не є достатнім для діагностики можливої ​​фертильності, але це може допомогти вибрати наступні варіанти лікування ЕКО.

Частина 14 Фрагментація ДНК


Фрагментація ДНК - це фрагментація ДНК сперматозоїдів, яка може бути спричинена кількома причинами, такими як: похилий вік, куріння, надмірне вживання алкоголю, недоїдання, ожиріння, запалення, стрес. Плодючість сперми з фрагментованою ДНК зменшується, а ризик передчасного переривання вагітності зростає під час вагітності.
Існує кілька аналізів для виявлення фрагментації ДНК. У нашому центрі фертильності доступний тест SCSA (аналіз структури хроматину сперми), який за короткий час тестує десятки тисяч сперматозоїдів. Пошкодження ДНК сперми виражається у відсотках. Якщо для консультації з нашим фрагментованим андрологом проконсультується більше 30 відсотків сперми, можна запропонувати кілька рішень.