МИГОВИЙ

public

Насіннєве дослідження виявляє клітинні механізми безалкогольної жирової дистрофії печінки

Одним з можливих несприятливих наслідків ожиріння є так званий "метаболічний синдром", який характеризується інсулінорезистентністю, високим кров'яним тиском та дисліпідемією, проблемами, які можуть призвести до небезпечного погіршення здоров'я. Цей синдром, у свою чергу, пов’язаний із дедалі поширенішим станом, який в даний час відомий іспанською мовою під назвою «безалкогольна жирова дегенерація печінки» [NAFDL, англ. неалкогольна жирова хвороба печінки]. Хвороба, яка починається з накопичення жиру в паренхімі печінки у пацієнтів без алкоголізму в анамнезі, з часом може супроводжуватися запальною реакцією і перероджуватися в паренхіматозний фіброз і навіть цироз печінки. До цього часу причини НАФДЛ, яка є формою ліпотоксичності, не були повністю розшифровані, хоча, наприклад, було відомо, що роль відіграє фактор некрозу пухлини альфа (TNF-a) і що кислоти вільні жирні кислоти ( FFA) мав пряму токсичну дію на гепатоцити і призвів до накопичення внутрішньопечінкового жиру.

Ожиріння також відіграє ключову роль у захворюванні. Люди, що страждають ожирінням, мають підвищену кількість FFA, яка проникає в гепатоцит, і якщо вони також мають резистентність до інсуліну, печінка виробляє більше FFA, ніж можна метаболізувати та елімінувати, в результаті чого FFA накопичується в печінковій паренхімі. У людей з НАФДЛ концентрація жирних кислот у плазмі крові також зазвичай підвищена і корелює зі ступенем ураження печінки.

Фельдштейн та ін., Із клініки Mayo у Рочестері, штат Міннесота, Сполучені Штати Америки, щойно опублікували результати першого дослідження з визначення клітинних механізмів ліпотоксичності печінки, опосередкованої FFA. Дослідження проводилося на різних етапах. По фазі в пробірці, Культивовані гепатоцити від різних типів мишей інкубували 24 години із сумішшю AGL. Під мікроскопом імунофлюоресценція виявила велику кількість катепсину В (ctsb) у цитозолі понад 80% клітин. Зазвичай ця речовина міститься в лізосомах, і її присутність у цитозолі є чітким показником проникності лізосом. Дослідники також дослідили культури клітин, які не інкубували з AGL за тим самим методом, і виявили, що ctsb концентрувався в лізосомах. На наступному етапі вони інкубували деякі клітини лише з LGA, а інші з AGL та препаратом-інгібітором ctsb (R-3032). Інкубація помітно знизила кількість CTSB у клітинному цитозолі, підтверджуючи тим самим медіаторну роль ctsb у проникності лізосом, пов'язаній з FFA.

Для того, щоб з'ясувати, чи експресія FNT-a FNT-a, дослідники вимірювали кількість передавальної РНК цього фактора в гепатоцитах і спостерігали збільшення більш ніж у 100 разів тих, які інкубували з FNT-a порівняно тим, якими вони не були. Вони також визначили, що експресія TNF-a в свою чергу опосередковується активацією ядерного фактора k B (FN-k B).

Наведені вище результати були підтверджені у людей із НАФДЛ. Біопсовані зразки печінки у пацієнтів із цим захворюванням та у людей без захворювань печінки досліджували за допомогою імунофлюоресценції. Знову ж було помічено, що у здорових людей ctsb знаходився в гепатоцитарних лізосомах, тоді як у людей з NAFDL ctsb диспергувався в клітинному цитозолі. Крім того, кількість ctsb продемонструвала пряму кореляцію з тяжкістю ураження печінки таким чином, що найвищі концентрації були виявлені у пацієнтів із запущеним стеатогепатитом.

Нарешті, дослідники вирішили визначити, чи може інактивація ctsb захистити від харчових NAFDL. З цією метою вони ставлять звичайних мишей дикого типу та мишей, інактивованих ctsb (мишей ctsb -1- ) їсти високовуглеводну їжу протягом 16 тижнів, після чого обидві групи мишей сильно ожиріли. Вони також годували іншу групу мишей протягом 16 тижнів стандартною дієтою для гризунів, і ожиріння у цієї групи не спостерігалося. Печінка останніх мишей та мишей ctsb -1- пацієнти з ожирінням мали нормальний макроскопічний вигляд, і гепатомегалія не спостерігалася; під мікроскопом не було доказів макровезикулярного стеатозу. На відміну від цього, печінка диких мишей із ожирінням важила набагато більше, ніж у інших тварин, і мікроскопічне дослідження виявило розвинений дифузний макровезикулярний стеатоз. Коли деяким ожирілим мишам дикого типу вводили R-3032 протягом останніх 7 днів вуглеводної дієти, стеатоз печінки повністю зник, а концентрація аланінамінотрансферази в сироватці крові, яка є маркером пошкодження печінки, знизилася.

Той самий дисметаболічний синдром, який вражає людей із НАФДЛ, спостерігався у диких мишей із ожирінням: підвищений рівень FFA у сироватці крові, інсуліну, лептину та TNF-a. Цей синдром не спостерігався у мишей. ctsb -1- ні у диких мишей, яких лікували R-3032. Можна зробити висновок, що дезактивація ctsb за допомогою фармакологічних або генетичних механізмів захищає від стеатозу печінки та дисметаболічного синдрому, який з ним пов'язаний. У диких мишей із ожирінням також спостерігали, що експресія РНК TNF-a була у вісім разів вищою, ніж у худорлявих тварин та мишейctsb -1- ожиріння Однак лікування R-3032 повністю придушило це збільшення, підтверджуючи, що TNF-a бере участь у харчовому стеатозі печінки. Це також було перевірено у мишей з інактивацією TNF-a (миші FNTR1 -1- ), які піддавалися дієті з високим вмістом вуглеводів. Хоча ці миші ожиріли, жодна з них не мала печінкового стеатозу або метаболічного синдрому.

Завдяки цьому базовому дослідженню тепер зрозумілі клітинні механізми, за допомогою яких FFA травмує паренхіму печінки у людей, що страждають ожирінням. Коли в циркуляції є дуже високі концентрації ліпідів, клітини організму, де вони зазвичай зберігаються, не в змозі впоратися, і ліпіди залишаються вільно плавати у формі FFA в клітинному цитозолі. У гепатоцитах це запускає ланцюг ліпотоксичних реакцій, які спостерігаються при НАФДЛ. Ця інформація є критично важливою, оскільки вона є основою для майбутньої розробки ліків, які переривають ланцюг шкідливих реакцій. В даний час лікування НАФДЛ не існує, крім фізичних вправ та здорового харчування. (Фельдштейн А.Е. та ін. Вільні жирні кислоти сприяють печінковій ліпотоксичності, стимулюючи експресію ФНП за допомогою лізосомного шляху. Гепатологія. 2004; 40 (1): 185 ? 194).